Nefrectomia Sem Toque Redutora de Células Tumorais Circulantes (CITO-CERENE)

Este estudo estudará o perfil de CTC no CCR e sua liberação na circulação sanguínea durante o LRN.

Os doentes incluídos serão encaminhados para a Unidade de Cancro Renal do Departamento de Urologia do Centro Hospitalar Universitário de Lisboa Norte (CHLUN) com o diagnóstico de massa renal elegível para LRN. Os pacientes terão seu diagnóstico confirmado, serão adequadamente estadiados e suas opções de tratamento serão decididas após um processo de decisão compartilhado e informado à luz das diretrizes atuais da Associação Européia de Urologia (EAU) sobre CCR. Serão excluídos pacientes < 18 anos e gestantes. Os pacientes serão adequadamente informados sobre o protocolo do estudo e assinarão um consentimento informado específico.

Os pacientes submetidos a LRN entrarão em um estudo controlado randomizado prospectivo de centro único de dois braços, comparando uma técnica sem toque, com ligadura direta do pedículo (Grupo A) versus a dissecção convencional e ligadura do pedículo renal com tração renal (Grupo B ). Uma amostra de sangue periférico será coletada na chegada à sala de cirurgia. Em seguida, os pacientes do Grupo A serão submetidos a RN sem toque, sendo a dissecção feita pelo plano da fáscia de Gerota até a exposição do grande vaso correspondente (veia cava à direita e aorta à esquerda). O pedículo renal será isolado diretamente e ligado com clipes Weck® sem manipulação do rim. Os pacientes do grupo B serão submetidos a uma abordagem mais convencional, iniciando com abertura da fáscia de Gerota, identificação do ureter, tração da gordura perirrenal abaixo do ureter e dissecção cefálica até atingir o pedículo renal. O pedículo renal será então isolado, mantendo a tração no rim e na gordura perirrenal, e ligado com clipes Weck®. Uma segunda amostra de sangue periférico será coletada no momento da extração da amostra. Uma terceira e quarta amostras de sangue periférico serão coletadas nos dias 1 e 30 do pós-operatório, respectivamente, para estudar a cinética pós-operatória da CTC. Todas as amostras irão coletar 7,5 mL de sangue periférico.

Pacientes com rins hipofuncionantes com indicação de nefrectomia total serão usados ​​como controles. Os pacientes com nefrectomia total serão submetidos ao protocolo de randomização, em um braço controle.

As CTCs serão isoladas de amostras de sangue periférico usando um dispositivo de captura de CTC baseado em tamanho microfluídico - Ruby™. Amostras de sangue total serão injetadas nos dispositivos a uma taxa de fluxo de 80 µL/min. As CTCs capturadas nos dispositivos serão então coradas com anticorpos para 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) para identificar núcleos celulares, cluster de antígeno de diferenciação 45 (CD45) para identificar leucócitos, citoqueratina 8/18 para identificar células epiteliais CTCs e vimentina para identificar CTCs mesenquimais ou CTCs que sofreram transição epitelial para mesenquimal. As amostras de sangue serão processadas no máximo 30 minutos após a coleta.