Cirkulující nádorové buňky snižující bezdotykovou nefrektomii (CITO-CERENE)

Tato studie bude studovat profil CTC u RCC a jejich uvolňování do krevního oběhu během LRN.

Zařazení pacienti budou odesláni na oddělení pro léčbu rakoviny ledvin Urologického centra univerzitní nemocnice v severním Lisabonu (CHLUN) s diagnózou renální masy způsobilé pro LRN. U pacientů bude jejich diagnóza potvrzena, bude vhodně stanovena a o možnostech jejich léčby bude rozhodnuto po společném a informovaném rozhodovacím procesu ve světle aktuálních pokynů Evropské urologické asociace (EAU) o RCC. Pacienti mladší 18 let a těhotné ženy budou vyloučeni. Pacienti budou adekvátně informováni o protokolu studie a podepíší konkrétní informovaný souhlas.

Pacienti podstupující LRN ​​vstoupí do dvouramenné prospektivní jednocentrické randomizované kontrolované studie srovnávající bezdotykovou techniku ​​s přímou ligací pediklu (skupina A) vs. konvenční disekce a ligací ledvinového pediklu pomocí trakce ledvin (skupina B ). Vzorek periferní krve bude odebrán při příjezdu na operační sál. Poté pacienti skupiny A podstoupí bezdotykovou RN, přičemž disekce se provádí přes Gerotovu fasciální rovinu, dokud se neobjeví odpovídající velká céva (dutá žíla na pravé straně a aorta na levé straně). Ledvinový pedikl bude přímo izolován a podvázán pomocí Weck® klipů bez manipulace s ledvinami. Pacienti skupiny B podstoupí konvenčnější přístup, počínaje otevřením Gerotovy fascie, identifikací močovodu, tahem na perirenální tuk pod močovodem při disekci hlavonožce až do dosažení renálního pediklu. Ledvinový pedikl bude poté izolován při zachování trakce na ledvinu a perirenální tuk a podvázán pomocí Weck® klipů. Druhý vzorek periferní krve bude odebrán v době extrakce vzorku. Třetí a čtvrtý vzorek periferní krve bude odebrán v pooperačním dni 1 a 30, v daném pořadí, pro studium pooperační kinetiky CTC. Všechny vzorky odeberou 7,5 ml periferní krve.

Jako kontroly budou sloužit pacienti s hypofunkčními ledvinami s indikací k totální nefrektomii. Pacienti s celkovou nefrektomií podstoupí randomizační protokol v kontrolní větvi.

CTC budou izolovány ze vzorků periferní krve pomocí zařízení pro zachycení CTC založeného na velikosti mikrofluidiky - Ruby™. Vzorky plné krve budou vstřikovány do zařízení při průtoku 80 µl/min. CTC zachycené na zařízeních budou poté obarveny protilátkami proti 4',6-diamidino-2-fenylindolu (DAPI) k identifikaci buněčných jader, shluku diferenciačního antigenu 45 (CD45) k identifikaci leukocytů, cytokeratinu 8/18 k identifikaci epitelu CTC a vimentin k identifikaci mezenchymálních CTC nebo CTC, které prošly přechodem z epitelu na mezenchym. Vzorky krve budou zpracovány nejpozději do 30 minut po odběru.