Cellule tumorali circolanti che riducono la nefrectomia senza contatto (CITO-CERENE)

Questo studio studierà il profilo delle CTC nell'RCC e il loro rilascio nella circolazione sanguigna durante la LRN.

I pazienti inclusi verranno indirizzati all'Unità di cancro renale del Dipartimento di urologia del Centro ospedaliero universitario di Lisbona settentrionale (CHLUN) con la diagnosi di una massa renale idonea per un LRN. I pazienti riceveranno conferma della diagnosi, saranno opportunamente stadiati e le loro opzioni di gestione saranno decise dopo un processo decisionale condiviso e informato alla luce delle attuali linee guida dell'Associazione europea di urologia (EAU) sull'RCC. Saranno esclusi i pazienti < 18 anni e le donne in gravidanza. I pazienti saranno adeguatamente informati del protocollo dello studio e firmeranno uno specifico consenso informato.

I pazienti sottoposti a LRN entreranno in uno studio controllato randomizzato monocentrico prospettico a due bracci, confrontando una tecnica no-touch, con legatura diretta del peduncolo (Gruppo A) rispetto alla dissezione convenzionale e legatura del peduncolo renale con trazione renale (Gruppo B ). All'arrivo in sala operatoria verrà prelevato un campione di sangue periferico. Successivamente, i pazienti del gruppo A verranno sottoposti a un RN no-touch, con la dissezione eseguita attraverso il piano della fascia di Gerota fino a quando non si ottiene l'esposizione del grande vaso corrispondente (vena cava sul lato destro e aorta sul lato sinistro). Il peduncolo renale sarà isolato direttamente e legato utilizzando clip Weck® senza manipolazione renale. I pazienti del gruppo B saranno sottoposti a un approccio più convenzionale, a partire dall'apertura della fascia di Gerota, identificazione dell'uretere, trazione sul grasso peri-renale sotto l'uretere durante la dissezione cefalica fino a raggiungere il peduncolo renale. Il peduncolo renale verrà quindi isolato mantenendo la trazione sul rene e sul grasso peri-renale e legato utilizzando clip Weck®. Un secondo campione di sangue periferico verrà raccolto al momento dell'estrazione del campione. Un terzo e un quarto campione di sangue periferico saranno raccolti rispettivamente nei giorni 1 e 30 post-operatori, per studiare la cinetica post-operatoria delle CTC. Tutti i campioni raccoglieranno 7,5 ml di sangue periferico.

I pazienti che presentano reni ipofunzionanti con indicazione alla nefrectomia totale saranno utilizzati come controlli. I pazienti con nefrectomia totale saranno sottoposti al protocollo di randomizzazione, in un braccio di controllo.

Le CTC saranno isolate da campioni di sangue periferico utilizzando un dispositivo di cattura CTC basato sulla dimensione della microfluidica - Ruby™. I campioni di sangue intero verranno iniettati nei dispositivi a una portata di 80 µL/min. Le CTC catturate sui dispositivi saranno quindi colorate con anticorpi anti-4',6-diamidino-2-fenilindolo (DAPI) per identificare i nuclei cellulari, cluster dell'antigene di differenziazione 45 (CD45) per identificare i leucociti, citocheratina 8/18 per identificare cellule epiteliali CTC e vimentina per identificare CTC mesenchimali o CTC che hanno subito una transizione da epiteliale a mesenchimale. I campioni di sangue verranno processati non più di 30 minuti dopo la raccolta.