A Fogbélgyulladás Jellemzése: Megfigyelési Vizsgálat Rutin Fogászati Kezelés Során Gyűjtött Biológiai Minták Felhasználásával (INFLAPULP)

A vitalis pulpa terápia (VPT) kulcsfontosságú eleme a minimálisan invazív fogászatnak, és célja a pulpa vitalitásának megőrzése minden alkalommal, amikor ez klinikailag lehetséges. A vitalis pulpával rendelkező fogak hosszú távon jobb túlélési arányt mutatnak, mint az endodontiásan kezelt fogak. Következésképpen a VPT-eljárásokat – beleértve az indirekt pulpa fedést, a direkt pulpa fedést, a részleges pulpotómiát és a teljes pulpotómiát – előnyben kell részesíteni a gyökérkezeléssel szemben, ha a pulpa biológiai állapota ezt lehetővé teszi.

A VPT sikerét két alapvető tényező határozza meg: a pulpa gyógyulását elősegítő bioaktív anyagok használata, valamint a pulpa gyulladás súlyosságának és kiterjedésének pontos felmérése. Azonban a nem megfelelő esetválasztáshoz kapcsolódó szövődmények továbbra is gyakoriak, és gyakran a kezelést követő első évben fordulnak elő. Ezek a kudarcok nagyrészt annak a nehézségnek tulajdoníthatók, hogy a pulpa gyulladásos állapotát pontosan fel lehessen mérni, ami egy jelentős, még nem teljesített igényt támaszt az endodontiás diagnosztika területén, különösen a sürgősségi ellátás keretein belül.

A pulpa gyulladás a fogpulpa védekező reakciója a külső agressziókkal szemben, mint például a cáriás elváltozások, törések, parodontális betegségek vagy restaurációs beavatkozások. Ez a biológiai folyamat dinamikus, progresszív és térben heterogén. A gyulladás kezdetben lokálisan fejlődik ki a sérüléshez szomszédos pulpaszövetben, majd később kiterjedhet a teljes koronapulpára, és haladóbb stádiumokban a radikuláris pulpara is. Amikor a gyulladás a koronapulpára korlátozódik, a gyulladt szövet eltávolítása részleges vagy teljes pulpotómiával, majd bioaktív anyag alkalmazása elegendő lehet a gyógyulás és a hosszú távú siker eléréséhez.

A klinikai szinten azonban a pulpa gyulladás felmérése továbbra is kihívást jelent. A pulpa betegségek legszélesebb körben használt diagnosztikai osztályozása főként a beteg által jelentett fájdalom jellemzőire és a termikus érzékenységi tesztekre adott válaszokra épül. Ez az osztályozás megkülönbözteti az egészséges pulpát, a reverzibilis pulpitiszt, az irreverzibilis pulpitiszt (akut vagy krónikus) és a pulpa nekrózist. Az intraoperatív kritériumokat, mint például a vérzés és a hemostasis értékelését, néha a pulpa állapotának becslésére használják, de ezek a kritériumok szubjektív maradnak és rosszul standardizáltak.

Számos tanulmány kimutatta eltéréseket a klinikai diagnózis és a pulpaszövet tényleges hisztológiai állapota között. Továbbá a jelenlegi diagnosztikai keretrendszer nem teszi lehetővé a klinikai diagnózis és a specifikus VPT-eljárások indikációi közötti egyértelmű megfeleltetést. Míg négy VPT-technika áll rendelkezésre, csak három gyulladásos diagnosztikai kategóriát ismernek el, ami bizonytalanságot okoz a terápiás döntéshozatalban és jelentős változatosságot a klinikai gyakorlatban.

2017-ben egy új diagnosztikai osztályozást javasoltak, az Endolight osztályozást. A gyulladt pulpaszövet hisztológiai megfigyeléseire és a VPT-eredmények prognosztikai adataira alapozva ez az osztályozás megkülönbözteti a kezdeti, enyhe, mérsékelt és súlyos pulpitiszt. Célja, hogy jobban irányítsa a kezelés kiválasztását és csökkentse a változatosságot a klinikai gyakorlatban. Azonban ezt az osztályozást még nem érvényesítették olyan tanulmányokkal, amelyek közvetlenül összehasonlítják a klinikai diagnózist az emberi pulpaszövet in situ biológiai analíziseivel.

A szöveti és molekuláris szinten számos tanulmány vizsgálta a pulpa gyulladás mögötti mechanizmusokat. Hisztológiailag a reverzibilis pulpitis formáit a megőrzött odontoblast réteg folytonossága és a nekrotikus szövet hiánya jellemzi, míg az irreverzibilis formák az odontoblast réteg felszakadásával, gyulladásos infiltrátumokkal, nekrózissal vagy abscesszus képződéssel társulnak. A molekuláris tanulmányok számos gyulladásos mediátort azonosítottak, amelyek expressziója a pulpa gyulladás súlyosságával növekszik, beleértve az interleukin-8-at (IL-8), a matrix metalloproteináz-9-et (MMP-9) és a tumor nekrózis faktor alfát (TNF-α). A megbízható molekuláris és celluláris biomarkerek azonosítása továbbra is jelentős kihívást jelent, de kritikus lépés a pontosabb diagnosztikai és prognosztikai eszközök fejlesztése felé.

A jelen tanulmány célja, hogy integrálva a klinikai, transzkriptomikai és proteomikai adatokat, jellemezze az emberi fogpulpa immun-gyulladásos profiljait a pulpa gyulladás különböző klinikai formáinál. Ez egy prospektív, monocentrikus megfigyelési tanulmány, amely a Pitié-Salpêtrière Kórház Fogászati Osztályán zajlik. A betegeket rutin fogászati ellátás során toborozzák, és a pulpaszövet mintákat vagy teljes, pulpa tartalmú fogakat műtéti hulladékként gyűjtik össze endodontiás kezelés vagy fogeltávolítás során. Nincs további eljárás, és a betegellátás nem módosul a tanulmányban való részvétel miatt.

Felnőtt betegek (≥18 év), akiknél a pulpaszövetet a szokásos ellátás részeként távolítják el, és akik nem fejeznek ki ellenkezést a részvétellel szemben, jogosultak a bevonásra. Nem kerülnek bevonásra azok a betegek, akik a beavatkozást megelőző 12 órában gyulladáscsökkentő gyógyszert szedtek, vagy akik jogi védelem alatt állnak. Minden résztvevő egyetlen látogatásra kerül be, amely megfelel a fogászati beavatkozásnak, amely során a mintát gyűjtik, utólagos klinikai követés nélkül.

A klinikai és demográfiai adatokat az orvosi dokumentációból nyerik ki, és magukban foglalják a beteggel kapcsolatos változókat (életkor, nem, betegségtörténet, gyógyszerek, fájdalom intenzitása vizuális analóg skálán értékelve) és a foggal kapcsolatos változókat (a pulpa klinikai diagnózisa a jelenlegi osztályozás és az Endolight osztályozás szerint, fogtípus és száma, a fogot érintő szájbetegség és annak súlyossága, restaurációs állapot és minőség, valamint radiográfiai paraméterek).

A biológiai mintákat a gyűjtéskor pszeudonimizálják, és a tervezett analízisek szerint dolgozzák fel. A transzkriptomikai profilkészítést RNS-szekvenálással végzik, valós idejű kvantitatív PCR-rel és in situ hibridizációval validálva. A proteomikai analíziseket, beleértve a degradomikus megközelítéseket, tömegspektrometriával végzik; a tanulmány ezen részét a Francia Nemzeti Kutatási Ügynökség (ANR) által finanszírozott egy specifikus projekt keretében végzik, amelynek céljai teljes mértékben integráltak és kompatibilisek a jelen protokollal. A fehérje expressziót további ELISA tesztekkel és immunhisztokémiai vagy immunofluoreszcens analízisekkel értékelik.

A tanulmány elsődleges kimenetele a humán fogpulpa szövet immun-gyulladásos gén- és fehérje expressziós profiljainak azonosítása és jellemzése a pulpa gyulladás klinikai diagnózisa szerint. A másodlagos kimenetelek közé tartozik a klinikai diagnosztikai kategóriák – különösen az Endolight osztályozásé – és a biológiai gyulladásos profilok közötti egyezés értékelése, valamint a gyulladásos profilok és a beteggel vagy a foggal kapcsolatos tényezők közötti asszociációk elemzése.

A biológiai mintákat csak a kutatás időtartama alatt tárolják, és kizárólag a jelen protokollban leírt analízisekre használják fel. Minden mintát a tanulmány végén megsemmisítenek, és nem hoznak létre hosszú távú biológiai gyűjteményt.

A pulpa gyulladás integrált klinikai és biológiai jellemzésével ez a tanulmány célja, hogy támogassa a pontosabb, biológiailag vezérelt diagnosztikai és terápiás döntéshozatalt, javítsa a vitalis pulpa terápiák indikációit, és végső soron optimalizálja az endodontiás sürgősségek kezelését.