Caratterizzazione dell'Infiammazione Pulpare: uno Studio Osservazionale Utilizzando Campioni Biologici Raccolti Durante le Cure Odontoiatriche di Routine (INFLAPULP)

La terapia vitale della polpa (VPT) è un componente chiave dell'odontoiatria minimamente invasiva e mira a preservare la vitalità della polpa ove clinicamente fattibile. I denti con polpa vitale hanno dimostrato una migliore sopravvivenza a lungo termine rispetto ai denti trattati endodonticamente. Di conseguenza, le procedure di VPT – inclusa la copertura indiretta della polpa, la copertura diretta della polpa, la pulpotomia parziale e la pulpotomia totale – dovrebbero essere preferite al trattamento canalare quando lo stato biologico della polpa lo consente.

Il successo della VPT si basa su due fattori essenziali: l'uso di materiali bioattivi capaci di promuovere la guarigione pulpare e una valutazione accurata della gravità e dell'estensione dell'infiammazione pulpare. Tuttavia, le complicanze legate a una selezione inappropriata dei casi rimangono frequenti e spesso si verificano entro il primo anno successivo al trattamento. Questi fallimenti sono in gran parte attribuiti alla difficoltà di valutare con precisione lo stato infiammatorio della polpa, evidenziando un bisogno insoddisfatto nella diagnosi endodontica, specialmente nel contesto delle cure d'urgenza.

L'infiammazione pulpare è una risposta di difesa della polpa dentale a un'aggressione esterna come lesioni cariose, fratture, malattia parodontale o procedure restaurative. Questo processo biologico è dinamico, progressivo e spazialmente eterogeneo. L'infiammazione si sviluppa inizialmente localmente nel tessuto pulpare adiacente alla lesione e può successivamente estendersi per coinvolgere l'intera polpa coronale e, negli stadi più avanzati, la polpa radicolare. Quando l'infiammazione rimane confinata alla polpa coronale, la rimozione del tessuto infiammato tramite pulpotomia parziale o totale seguita dall'applicazione di un materiale bioattivo può essere sufficiente per ottenere la guarigione e il successo a lungo termine.

A livello clinico, tuttavia, la valutazione dell'infiammazione pulpare rimane impegnativa. La classificazione diagnostica più utilizzata per le malattie pulpari si basa principalmente sulle caratteristiche del dolore riportate dal paziente e sulle risposte ai test di sensibilità termica. Questa classificazione distingue polpa sana, pulpite reversibile, pulpite irreversibile (acuta o cronica) e necrosi pulpare. Criteri intraoperatori, come la valutazione del sanguinamento e dell'emostasi, sono talvolta utilizzati per stimare lo stato pulpare, ma questi criteri rimangono soggettivi e scarsamente standardizzati.

Diversi studi hanno dimostrato discrepanze tra la diagnosi clinica e l'effettiva condizione istologica del tessuto pulpare. Inoltre, l'attuale quadro diagnostico non consente una chiara corrispondenza tra diagnosi clinica e indicazione per specifiche procedure di VPT. Sebbene siano disponibili quattro tecniche di VPT, solo tre categorie diagnostiche infiammatorie sono riconosciute, il che contribuisce all'incertezza nella decisione terapeutica e a una significativa variabilità nella pratica clinica.

Nel 2017 è stata proposta una nuova classificazione diagnostica nota come classificazione Endolight. Basata su osservazioni istologiche del tessuto pulpare infiammato e dati prognostici degli esiti della VPT, questa classificazione distingue tra pulpite iniziale, lieve, moderata e grave. Mira a guidare meglio la scelta del trattamento e a ridurre la variabilità nella pratica clinica. Tuttavia, questa classificazione non è stata ancora validata attraverso studi che confrontano direttamente la diagnosi clinica con analisi biologiche in situ del tessuto pulpare umano.

A livello tissutale e molecolare, diversi studi hanno esplorato i meccanismi alla base dell'infiammazione pulpare. Istologicamente, le forme reversibili di pulpite sono caratterizzate dalla continuità preservata dello strato odontoblastico e dall'assenza di tessuto necrotico, mentre le forme irreversibili sono associate alla disgregazione dello strato odontoblastico, infiltrati infiammatori, necrosi o formazione di ascessi. Gli studi molecolari hanno identificato diversi mediatori infiammatori la cui espressione aumenta con la gravità dell'infiammazione pulpare, inclusi interleuchina-8 (IL-8), metalloproteinasi di matrice-9 (MMP-9) e fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α). L'identificazione di biomarcatori molecolari e cellulari affidabili rimane una sfida importante ma rappresenta un passo cruciale verso lo sviluppo di strumenti diagnostici e prognostici più accurati.

Il presente studio è progettato per caratterizzare i profili immuno-infiammatori della polpa dentale umana attraverso diverse forme cliniche di infiammazione pulpare integrando dati clinici, trascrittomici e proteomici. Questo è uno studio osservazionale prospettico e monocentrico condotto presso il Dipartimento di Medicina Dentale dell'Ospedale Pitié-Salpêtrière. I pazienti sono reclutati durante le cure dentistiche di routine e i campioni di tessuto pulpare o interi denti contenenti polpa sono raccolti come scarto operatorio durante il trattamento endodontico o l'estrazione dentale. Non vengono eseguite procedure aggiuntive e l'assistenza al paziente non viene modificata dalla partecipazione allo studio.

Sono eleggibili per l'inclusione i pazienti adulti (≥18 anni) il cui tessuto pulpare viene rimosso come parte della cura standard e che non esprimono opposizione alla partecipazione. Non sono inclusi i pazienti che hanno assunto farmaci antinfiammatori entro 12 ore prima della procedura o che sono sotto protezione legale. Ogni partecipante è incluso per una singola visita corrispondente alla procedura dentale durante la quale viene raccolto il campione, senza successivo follow-up clinico.

I dati clinici e demografici sono estratti dalle cartelle cliniche e includono variabili relative al paziente (età, sesso, anamnesi, farmaci, intensità del dolore valutata con scala analogica visiva) e variabili relative al dente (diagnosi pulpare clinica secondo sia la classificazione corrente che la classificazione Endolight, tipo e numero del dente, patologia orale che colpisce il dente e sua gravità, stato e qualità restaurativa e parametri radiografici).

I campioni biologici sono pseudonimizzati al momento della raccolta e processati secondo le analisi pianificate. La profilazione trascrittomica viene eseguita utilizzando il sequenziamento dell'RNA, con validazione mediante PCR quantitativa in tempo reale e ibridazione in situ. Le analisi proteomiche, inclusi approcci degradomici, vengono eseguite utilizzando la spettrometria di massa; questa componente dello studio è condotta nell'ambito di un progetto specifico finanziato dall'Agenzia Nazionale per la Ricerca francese (ANR), i cui obiettivi sono pienamente integrati e compatibili con il presente protocollo. L'espressione proteica è ulteriormente valutata utilizzando saggi ELISA e analisi immunoistochimiche o immunofluorescenti.

L'esito primario dello studio è l'identificazione e la caratterizzazione dei profili di espressione genica e proteica immuno-infiammatori nel tessuto pulpare dentale umano in base alla diagnosi clinica di infiammazione pulpare. Gli esiti secondari includono la valutazione della concordanza tra le categorie diagnostiche cliniche – in particolare quelle della classificazione Endolight – e i profili infiammatori biologici, nonché l'analisi delle associazioni tra profili infiammatori e fattori relativi al paziente o al dente.

I campioni biologici sono conservati solo per la durata della ricerca e sono utilizzati esclusivamente per le analisi descritte in questo protocollo. Tutti i campioni vengono distrutti al termine dello studio e non viene costituita alcuna collezione biologica a lungo termine.

Fornendo una caratterizzazione clinica e biologica integrata dell'infiammazione pulpare, questo studio mira a supportare una decisione diagnostica e terapeutica più precisa e guidata dalla biologia, migliorare l'indicazione delle terapie vitali della polpa e ottimizzare infine la gestione delle emergenze endodontiche.