Karakterisering af Pulpitis: En Observationsstudie med Anvendelse af Biologiske Prøver Indsamlet under Rutinemæssig Tandpleje (INFLAPULP)

Vital pulpa-terapi (VPT) er en nøglekomponent i minimal invasiv tandpleje og har til formål at bevare pulpaens vitalitet, når det er klinisk muligt. Tænder med vital pulpa har vist sig at have bedre langtidsoverlevelse end endodontisk behandlede tænder. Derfor bør VPT-procedurer – inklusive indirekte pulpa-dækning, direkte pulpa-dækning, delvis pulpotomi og fuld pulpotomi – foretrækkes frem for rodkanalbehandling, når pulpaens biologiske status tillader det.

Succesen med VPT afhænger af to væsentlige faktorer: brugen af bioaktive materialer, der kan fremme pulpaheling, og en præcis vurdering af alvorlighedsgraden og omfanget af pulpa-inflammation. Komplikationer relateret til upassende caseudvælgelse forbliver dog hyppige og opstår ofte inden for det første år efter behandling. Disse fiaskoer tilskrives i høj grad vanskelighederne ved at præcist evaluere pulpaens inflammatoriske status, hvilket fremhæver et stort uopfyldt behov inden for endodontisk diagnostik, især i forbindelse med akutbehandling.

Pulpa-inflammation er et forsvarssvar fra tandpulpaen på eksterne aggressioner som karieslæsioner, frakturer, parodontal sygdom eller restaurative procedurer. Denne biologiske proces er dynamisk, progressiv og rumligt heterogen. Inflammation udvikler sig først lokalt i pulpevævet ved siden af skaden og kan efterfølgende sprede sig til at omfatte hele den kroniske pulpa og, i mere fremskredne stadier, den radikulære pulpa. Når inflammation forbliver begrænset til den kroniske pulpa, kan fjernelse af det inflammerede væv gennem delvis eller fuldstændig pulpotomi efterfulgt af påføring af et bioaktivt materiale være tilstrækkeligt til at opnå heling og langsigtet succes.

På det kliniske niveau er vurderingen af pulpa-inflammation dog stadig udfordrende. Den mest udbredte diagnostiske klassifikation af pulpasygdomme er hovedsageligt baseret på patientrapporterede smertekarakteristika og svar på termiske følsomhedstests. Denne klassifikation skelner mellem sund pulpa, reversibel pulpitis, irreversibel pulpitis (akut eller kronisk) og pulpanekrose. Intraoperative kriterier, såsom vurdering af blødning og hemostase, bruges nogle gange til at estimere pulpaens status, men disse kriterier forbliver subjektive og dårligt standardiserede.

Flere undersøgelser har demonstreret uoverensstemmelser mellem klinisk diagnose og pulpevævets faktuelle histologiske tilstand. Desuden tillader den nuværende diagnostiske ramme ikke en klar korrespondance mellem klinisk diagnose og indikation for specifikke VPT-procedurer. Mens der er fire VPT-teknikker til rådighed, anerkendes kun tre inflammatoriske diagnostiske kategorier, hvilket bidrager til usikkerhed i terapeutisk beslutningstagning og betydelig variabilitet i klinisk praksis.

I 2017 blev en ny diagnostisk klassifikation kendt som Endolight-klassifikationen foreslået. Baseret på histologiske observationer af inflammatorisk pulpevæv og prognostiske data fra VPT-resultater skelner denne klassifikation mellem initial, mild, moderat og alvorlig pulpitis. Den har til formål bedre at guide behandlingsvalg og reducere variabilitet i klinisk praksis. Denne klassifikation er dog endnu ikke valideret gennem undersøgelser, der direkte sammenligner klinisk diagnose med in situ biologiske analyser af menneskeligt pulpevæv.

På væv- og molekylært niveau har flere undersøgelser udforsket mekanismerne bag pulpa-inflammation. Histologisk er reversible former for pulpitis karakteriseret ved bevaret odontoblastlags kontinuitet og fravær af nekrotisk væv, mens irreversible former er forbundet med afbrydelse af odontoblastlaget, inflammatoriske infiltrater, nekrose eller abscessdannelse. Molekylære studier har identificeret flere inflammatoriske mediatorer, hvis udtryk stiger med alvorligheden af pulpa-inflammation, herunder interleukin-8 (IL-8), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) og tumor nekrose faktor alfa (TNF-α). Identifikationen af pålidelige molekylære og cellulære biomarkører forbliver en stor udfordring, men repræsenterer et kritisk skridt mod udviklingen af mere præcise diagnostiske og prognostiske værktøjer.

Nærværende studie er designet til at karakterisere de immuno-inflammatoriske profiler af menneskelig tandpulpa på tværs af forskellige kliniske former for pulpa-inflammation ved at integrere kliniske, transkriptomiske og proteomiske data. Dette er et prospektivt, monocentrisk observationsstudie udført på Afdelingen for Tandpleje på Pitié-Salpêtrière Hospital. Patienter rekrutteres under rutinemæssig tandpleje, og pulpevævsprøver eller hele tænder indeholdende pulpa indsamles som operationsaffald under endodontisk behandling eller tandudtrækning. Ingen yderligere procedurer udføres, og patientplejen ændres ikke ved deltagelse i studiet.

Voksne patienter (≥18 år), hvis pulpevæv fjernes som en del af standardpleje, og som ikke udtrykker modstand mod deltagelse, er berettigede til inklusion. Patienter, der har indtaget antiinflammatorisk medicin inden for 12 timer før proceduren, eller som er under juridisk beskyttelse, inkluderes ikke. Hver deltager inkluderes for et enkelt besøg svarende til tandplejeproceduren, hvor prøven indsamles, uden efterfølgende klinisk opfølgning.

Kliniske og demografiske data udtrækkes fra journaler og inkluderer patientrelaterede variable (alder, køn, sygehistorie, medicin, smerteintensitet vurderet ved hjælp af en visuel analog skala) og tandrelaterede variable (klinisk pulpa-diagnose i henhold til både den nuværende klassifikation og Endolight-klassifikationen, tandtype og -nummer, oral patologi, der påvirker tanden og dens alvorlighed, restaurativ status og kvalitet samt radiografiske parametre).

Biologiske prøver pseudonymiseres på indsamlingstidspunktet og behandles i henhold til de planlagte analyser. Transkriptomisk profilering udføres ved hjælp af RNA-sekventering med validering ved real-time kvantitativ PCR og in situ hybridisering. Proteomiske analyser, inklusive degradomiske tilgange, udføres ved hjælp af massespektrometri; denne komponent af studiet udføres inden for et specifikt projekt finansieret af det franske nationale forskningsagentur (ANR), hvis mål er fuldt integrerede og kompatible med nærværende protokol. Proteinekspression vurderes yderligere ved hjælp af ELISA-assays og immunhistokemiske eller immunofluorescensanalyser.

Studiets primære resultat er identifikation og karakterisering af immuno-inflammatoriske gen- og proteinekspressionsprofiler i menneskeligt tandpulpevæv i henhold til den kliniske diagnose af pulpa-inflammation. Sekundære resultater inkluderer vurdering af overensstemmelse mellem kliniske diagnostiske kategorier – især dem fra Endolight-klassifikationen – og biologiske inflammatoriske profiler samt analysen af sammenhænge mellem inflammatoriske profiler og patientrelaterede eller tandrelaterede faktorer.

Biologiske prøver opbevares kun i forskningens varighed og bruges udelukkende til de analyser, der er beskrevet i denne protokol. Alle prøver ødelægges ved studiet afslutning, og ingen langsigtet biologisk samling etableres.

Ved at levere en integreret klinisk og biologisk karakterisering af pulpa-inflammation sigter dette studie mod at understøtte mere præcis, biologi-drevet diagnostisk og terapeutisk beslutningstagning, forbedre indikationen for vital pulpa-terapier og i sidste ende optimere håndteringen af endodontiske akutte tilfælde.