Характеристика воспаления пульпы: наблюдательное исследование с использованием биологических образцов, собранных во время планового стоматологического лечения (INFLAPULP)

Витальная пульпотомия (ВПТ) является ключевым компонентом минимально инвазивной стоматологии и направлена на сохранение жизнеспособности пульпы, когда это клинически возможно. Доказано, что зубы с витальной пульпой демонстрируют лучшую долгосрочную выживаемость, чем зубы, подвергшиеся эндодонтическому лечению. Следовательно, процедуры ВПТ, включая непрямое покрытие пульпы, прямое покрытие пульпы, частичную пульпотомию и полную пульпотомию, должны быть предпочтительнее лечения корневых каналов, когда биологический статус пульпы это позволяет.

Успех ВПТ зависит от двух основных факторов: использования биологически активных материалов, способствующих заживлению пульпы, и точной оценки степени и распространенности воспаления пульпы. Однако осложнения, связанные с неправильным выбором случая, остаются частыми и часто возникают в течение первого года после лечения. Эти неудачи в значительной степени связаны с трудностью точной оценки воспалительного статуса пульпы, что подчеркивает серьезную неудовлетворенную потребность в эндодонтической диагностике, особенно в контексте неотложной помощи.

Воспаление пульпы — это защитная реакция зубной пульпы на внешние воздействия, такие как кариозные поражения, переломы, заболевания пародонта или реставрационные процедуры. Этот биологический процесс является динамичным, прогрессирующим и пространственно неоднородным. Воспаление первоначально развивается локально в пульпарной ткани, прилегающей к повреждению, и впоследствии может распространиться на всю коронковую пульпу и, на более поздних стадиях, на корневую пульпу. Когда воспаление остается ограниченным коронковой пульпой, удаление воспаленной ткани путем частичной или полной пульпотомии с последующим нанесением биологически активного материала может быть достаточным для достижения заживления и долгосрочного успеха.

На клиническом уровне, однако, оценка воспаления пульпы остается сложной задачей. Наиболее широко используемая диагностическая классификация заболеваний пульпы в основном основана на характеристиках боли, о которых сообщает пациент, и реакциях на тесты температурной чувствительности. Эта классификация различает здоровую пульпу, обратимый пульпит, необратимый пульпит (острый или хронический) и некроз пульпы. Интраоперационные критерии, такие как оценка кровотечения и гемостаза, иногда используются для оценки состояния пульпы, но эти критерии остаются субъективными и плохо стандартизированными.

Несколько исследований продемонстрировали расхождения между клиническим диагнозом и фактическим гистологическим состоянием пульпарной ткани. Более того, существующая диагностическая система не позволяет четко соотнести клинический диагноз с показаниями для конкретных процедур ВПТ. Хотя доступны четыре техники ВПТ, признаны только три воспалительные диагностические категории, что способствует неопределенности в терапевтическом принятии решений и значительной вариабельности в клинической практике.

В 2017 году была предложена новая диагностическая классификация, известная как классификация Endolight. Основанная на гистологических наблюдениях воспаленной пульпарной ткани и прогностических данных результатов ВПТ, эта классификация различает начальный, легкий, умеренный и тяжелый пульпит. Она направлена на лучшее руководство выбором лечения и снижение вариабельности в клинической практике. Однако эта классификация еще не была валидирована в исследованиях, напрямую сравнивающих клинический диагноз с биологическими анализами человеческой пульпарной ткани in situ.

На тканевом и молекулярном уровнях несколько исследований изучали механизмы, лежащие в основе воспаления пульпы. Гистологически обратимые формы пульпита характеризуются сохраненной непрерывностью одонтобластического слоя и отсутствием некротической ткани, тогда как необратимые формы связаны с разрушением одонтобластического слоя, воспалительными инфильтратами, некрозом или образованием абсцесса. Молекулярные исследования выявили несколько воспалительных медиаторов, экспрессия которых увеличивается с тяжестью воспаления пульпы, включая интерлейкин-8 (IL-8), матриксную металлопротеиназу-9 (MMP-9) и фактор некроза опухоли альфа (TNF-α). Идентификация надежных молекулярных и клеточных биомаркеров остается серьезной проблемой, но представляет собой важный шаг на пути к разработке более точных диагностических и прогностических инструментов.

Настоящее исследование предназначено для характеристики иммуно-воспалительных профилей человеческой зубной пульпы при различных клинических формах воспаления пульпы путем интеграции клинических, транскриптомных и протеомных данных. Это проспективное, одноцентровое обсервационное исследование, проводимое в отделении стоматологии больницы Питье-Сальпетриер. Пациенты набираются во время планового стоматологического лечения, а образцы ткани пульпы или целые зубы, содержащие пульпу, собираются как операционные отходы во время эндодонтического лечения или удаления зуба. Дополнительные процедуры не проводятся, и уход за пациентом не изменяется в связи с участием в исследовании.

Взрослые пациенты (≥18 лет), у которых ткань пульпы удаляется в рамках стандартного лечения и которые не выражают возражений против участия, имеют право на включение. Пациенты, принимавшие противовоспалительные препараты в течение 12 часов до процедуры или находящиеся под законной защитой, не включаются. Каждый участник включается на одно посещение, соответствующее стоматологической процедуре, во время которой собирается образец, без последующего клинического наблюдения.

Клинические и демографические данные извлекаются из медицинских карт и включают переменные, связанные с пациентом (возраст, пол, история болезни, медикаменты, интенсивность боли, оцениваемая с помощью визуальной аналоговой шкалы) и переменные, связанные с зубом (клинический диагноз пульпы согласно как текущей классификации, так и классификации Endolight, тип и номер зуба, патология полости рта, поражающая зуб, и ее тяжесть, состояние и качество реставрации, а также рентгенологические параметры).

Биологические образцы псевдонимизируются во время сбора и обрабатываются в соответствии с запланированными анализами. Транскриптомный профилирование выполняется с помощью РНК-секвенирования с валидацией методом количественной ПЦР в реальном времени и гибридизации in situ. Протеомные анализы, включая деградомные подходы, выполняются с использованием масс-спектрометрии; этот компонент исследования проводится в рамках конкретного проекта, финансируемого Французским национальным агентством по исследованиям (ANR), цели которого полностью интегрированы и совместимы с настоящим протоколом. Экспрессия белка дополнительно оценивается с помощью ELISA-анализов и иммуногистохимических или иммунофлуоресцентных анализов.

Основным результатом исследования является идентификация и характеристика профилей экспрессии иммуно-воспалительных генов и белков в ткани человеческой зубной пульпы в соответствии с клиническим диагнозом воспаления пульпы. Вторичные результаты включают оценку соответствия между клиническими диагностическими категориями, особенно классификации Endolight, и биологическими воспалительными профилями, а также анализ ассоциаций между воспалительными профилями и факторами, связанными с пациентом или зубом.

Биологические образцы хранятся только на время исследования и используются исключительно для анализов, описанных в этом протоколе. Все образцы уничтожаются в конце исследования, и долгосрочная биологическая коллекция не создается.

Предоставляя интегрированную клиническую и биологическую характеристику воспаления пульпы, это исследование направлено на поддержку более точного, биологически обоснованного диагностического и терапевтического принятия решений, улучшение показаний для витальных пульпарных терапий и, в конечном итоге, оптимизацию ведения эндодонтических неотложных состояний.