cKIT, mutazioni BRAF/NRAS nel melanoma avanzato: esito clinico in risposta agli inibitori della tirosin-chinasi - Progetto KitMel (KitMel)

Sfondo: Il melanoma metastatico ha una prognosi devastante ed è una delle principali cause di morte per cancro nei giovani pazienti. Fino ad ora, le terapie disponibili erano poche e inaffidabili, ma la recente comprensione delle vie molecolari dei melanomi ha migliorato la loro classificazione e sono state proposte nuove strategie cliniche.

Studi iniziali hanno dimostrato che le mutazioni B-Raf/N-Ras (rispettivamente V600E e Q61) sono l'alterazione più frequente essendo presente nel 70-80% dei melanomi, caratterizzando le pelli con danno indotto dal sole non cronico (CSD). Questi includono i melanomi a diffusione superficiale (SSM) e i melanomi nodulari (NM). Altri studi hanno dimostrato che le mutazioni c-Kit sono attualmente la mutazione attivante predominante (20-40%) nei melanomi acro-lentiginosi (ALM), nei melanomi mucosi (MM) e nei melanomi che insorgono sulla pelle dei CSD. Il modello di mutazione c-Kit è più complesso con quattro esoni colpiti che portano a diverse mutazioni, la cui incidenza e impatto biologico sono meno documentati.

Le alterazioni genetiche BRAF/NRAS guidano costantemente la crescita cellulare, essendo quindi bersagli attraenti. Risultati spettacolari sono stati effettivamente ottenuti con l'inibitore BRAF che prende di mira la forma mutata BRAF V600E. I dati della malattia GIST hanno rivelato che le diverse mutazioni del c-Kit modulano in modo diverso la funzione del c-Kit e la risposta alle terapie mirate.

Poiché la terapia mirata con c-Kit è un problema clinico critico, i ricercatori miravano a identificare le mutazioni più frequenti presenti nella nostra popolazione per proporre test di screening appropriati e adattare la terapia.

Metodi: Verranno esaminati 250 campioni di melanoma corrispondenti a una popolazione omogenea bianco-caucasica (Bretagna, Francia). Gli esoni 11, 13, 17 e 18 del c-Kit saranno sequenziati (sequenziamento diretto e pirosequenziamento quando possibile). Il numero di copie di c-Kit sarà quantificato mediante q-PCR e il livello di c-Kit determinato mediante immunoistochimica (IHC, CD117). I campioni saranno inoltre analizzati per le mutazioni B-Raf nei codoni 464, 466, 469 e 600, e per le mutazioni N-Ras nei codoni 12, 13 e 61 (Pyrosequencing).

Risultati aspettati:

Presi insieme, i ricercatori prevedono che l'attuale analisi genetica dei tumori di pazienti con melanoma avanzato documenterà prima il tipo e la frequenza delle mutazioni di cKit, confermerà o meno che le mutazioni di BRAF, NRAS e cKit si escludono a vicenda e documenterà la loro ripartizione nel sottotipi di melanomi. Infine, questo studio indicherà ai ricercatori quanto bene i pazienti risponderanno a una terapia che prende di mira le proteine ​​che promuovono la crescita BRAF/NRAS e cKIT.