Mutacje cKIT, BRAF/NRAS w zaawansowanym czerniaku: wyniki kliniczne w odpowiedzi na inhibitory kinazy tyrozynowej - projekt KitMel (KitMel)

Wstęp: Czerniak z przerzutami ma druzgocące rokowania i jest jedną z głównych przyczyn zgonów z powodu raka u młodych pacjentów. Do tej pory dostępne terapie były nieliczne i niewiarygodne, ale najnowsze zrozumienie szlaków molekularnych czerniaków poprawiło ich klasyfikację i zaproponowano nowe strategie kliniczne.

Wstępne badania wykazały, że mutacje B-Raf/N-Ras (odpowiednio V600E i Q61) są najczęstszą zmianą występującą w 70 do 80% czerniaków, charakteryzujących skórę inną niż chroniczne uszkodzenia wywołane słońcem (CSD). Należą do nich czerniaki rozprzestrzeniające się powierzchownie (SSM) i czerniaki guzkowe (NM). Inne badania wykazały, że mutacje c-Kit są obecnie dominującą mutacją aktywującą (20-40%) w czerniakach akro-soczewkowatych (ALM), czerniakach śluzowych (MM) oraz w czerniakach powstających na skórze CSD. Wzór mutacji c-Kit jest bardziej złożony i dotyczy czterech eksonów, co prowadzi do różnych mutacji, których częstość występowania i wpływ biologiczny są mniej udokumentowane.

Zmiany genetyczne BRAF/NRAS napędzają ciągły wzrost komórek, będąc w ten sposób atrakcyjnymi celami. Spektakularne wyniki rzeczywiście uzyskano z inhibitorem BRAF, którego celem jest forma V600E z mutacją BRAF. Dane dotyczące choroby GIST ujawniły, że różne mutacje c-Kit w różny sposób modulują funkcję c-Kit i odpowiedź na terapie celowane.

Ponieważ terapia celowana c-Kit jest krytycznym problemem klinicznym, badacze starali się zidentyfikować najczęstsze mutacje obecne w naszej populacji, aby zaproponować odpowiedni test przesiewowy i dostosować terapię.

Metody: 250 próbek czerniaka odpowiadających jednorodnej populacji rasy białej (Bretania, Francja) zostanie przebadanych. Eksony c-Kit 11, 13, 17 i 18 zostaną zsekwencjonowane (bezpośrednie sekwencjonowanie i pirosekwencjonowanie, jeśli to możliwe). Liczba kopii c-Kit zostanie określona ilościowo za pomocą q-PCR, a poziom c-Kit określony za pomocą immunohistochemii (IHC, CD117). Próbki będą również analizowane pod kątem mutacji B-Raf w kodonie 464, 466, 469 i 600 oraz mutacji N-Ras w kodonie 12, 13 i 61 (pirosekwencjonowanie).

Oczekiwane rezultaty:

Podsumowując, badacze spodziewają się, że obecna analiza genetyczna guzów od pacjentów z zaawansowanym czerniakiem najpierw udokumentuje typ i częstość mutacji cKit, potwierdzi lub nie, że mutacje BRAF, NRAS i cKit wzajemnie się wykluczają i udokumentuje ich podział w podtypy czerniaka. Wreszcie, to badanie dostarczy naukowcom wskazówek, jak dobrze pacjenci zareagują na terapię ukierunkowaną na białka promujące wzrost BRAF/NRAS i cKIT.