Manifestazioni neurologiche dell'infezione da Arbovirus in Colombia

NEAS è guidato dal Dr. Carlos Pardo-Villamizar presso la Johns Hopkins University (JHU) e Drs. Beatriz Parra e Lyda Osorio all'Universidad del Valle (UV) in Colombia. Hanno stabilito una rete di collaborazione con medici, neurologi ed esperti in microbiologia ed epidemiologia in quel paese. NEAS sta attivamente reclutando pazienti in sette ospedali universitari in cinque città colombiane. Il protocollo dello studio è stato approvato in ciascuno dei centri partecipanti.

Lo studio prospettico caso-controllo del NEAS mira a definire l'associazione tra l'esposizione ad arbovirus (Zika, Dengue e Chikungunya) e lo sviluppo di una sindrome neurologica in pazienti provenienti dalla Colombia, un paese con trasmissione endemica di arbovirus. I casi sono definiti come individui che presentano una nuova insorgenza di una sindrome neurologica di eziologia sconosciuta, inclusa ma non limitata a encefalite, mielite, meningite, polineuropatia/sindrome di Guillain-Barre e coinvolgimento del nervo cranico. Esistono due gruppi di controllo di pari età: 1) controlli domestici e 2) controlli con sindrome febbrile di eziologia sconosciuta che non presentano coinvolgimento neurologico. La dimensione stimata del campione nello studio è di 50 partecipanti in ciascun gruppo (casi e controlli 1 e 2). Il tempo per raccogliere la dimensione completa del campione è compreso tra 12 e 24 mesi e dipende dall'incidenza locale dei casi.

Ogni centro ha un team di coordinatori che comprende un neurologo, un medico residente in neurologia o medicina interna e un coordinatore della ricerca. Il team controlla costantemente i pazienti ricoverati nel centro. I pazienti che soddisfano i criteri per casi o controlli vengono avvicinati dal coordinatore della ricerca che è incaricato di informare il partecipante sullo studio e completare il consenso informato. Quindi, l'equipe medica esegue la valutazione neurologica, compresa l'anamnesi e l'esame fisico secondo i moduli NEAS. Campioni di sangue e urina vengono raccolti in tutti i partecipanti. Se viene eseguita una puntura lombare come parte dello standard di cura, viene raccolto anche il liquido spinale. In base alla disponibilità delle risorse, i partecipanti vengono seguiti ogni settimana per un periodo di 4 settimane e in ogni visita vengono completate una valutazione clinica e la raccolta dei campioni.

Le informazioni demografiche e cliniche, i risultati di laboratorio e di imaging sono archiviati in un database Web protetto nella piattaforma REDcap, con sede presso JHU. Ogni centro ha una combinazione univoca di username e password per entrare nel database e includere le informazioni di ogni partecipante in tempo reale. Ogni centro ha accesso alle informazioni incluse dallo stesso centro e non da altri centri. I moduli standardizzati (moduli NEAS) sono stati creati dal gruppo di studio che include le informazioni pertinenti necessarie per raggiungere gli obiettivi di questo studio e garantire la coerenza dei dati. I risultati dei test di laboratorio e delle immagini sono ottenuti dalle cartelle cliniche. Un monitoraggio permanente del database viene effettuato dai team di JHU e UV.

Dopo che i campioni sono stati raccolti, vengono spediti al laboratorio del nucleo di studio situato a UV (Dr. Beatrice Parra). Ogni centro è stato addestrato alla corretta manipolazione, elaborazione e spedizione dei campioni. Una volta che i campioni sono nel laboratorio centrale, vengono aliquotati e conservati. Il sangue, l'urina e il liquido spinale vengono testati mediante Real Time/Reverse Transcriptase (RT)- Polymerase Chain Reaction (PCR) per la presenza di RNA virale (acido ribonucleico) del virus Zika e del virus Dengue. Il siero e il liquido spinale vengono testati mediante ELISA per la rilevazione di IgM e IgG anti-flavivirus. I risultati vengono condivisi con il team di studio locale e con il team medico che si prende cura del partecipante. Inoltre, aliquote di campioni vengono inviate alla JHU per ulteriori valutazioni immunologiche e virologiche (Dr. Carlos Pardo-Vllamizar).

Sono state create procedure operative standard (SOP) per il reclutamento e il consenso dei pazienti, l'inserimento dei dati REDcap e il processo e la spedizione dei campioni biologici. L'analisi statistica sarà effettuata dagli epidemiologi dell'UV (Dr. Lyda Osorio) e includerà misure di frequenza e misure di tendenza centrale delle variabili. La misura della forza dell'associazione sarà effettuata utilizzando l'odds ratio e gli intervalli di confidenza.

DIZIONARIO DEI DATI

Le variabili sono suddivise in tre categorie: demografiche, cliniche e di laboratorio. Di seguito sono descritte le variabili più rilevanti raccolte nello studio.

Variabili demografiche:

• Caso: definizione di caso
• Tipo di controllo: definizione del controllo
• Soddisfazione dei criteri di inclusione: Soddisfazione dei criteri di inclusione stabiliti dal protocollo
• Sesso: fenotipo sessuale del partecipante supportato dalla cartella clinica o dall'ID
• Età: l'età del partecipante in base alla cartella clinica o al documento d'identità
• Razza: fenotipo riportato dal partecipante
• Città di residenza: Luogo in cui è stato principalmente negli ultimi 3 mesi
• Città del rapporto: luogo in cui il partecipante viene reclutato per lo studio

Variabili cliniche:

• Sintomi generali: manifestazioni cliniche coerenti con la diminuzione della normale forma di salute del partecipante
• Insorgenza dei sintomi generali: Data di insorgenza dei sintomi generali
• Sintomi neurologici: manifestazioni cliniche che riflettono un funzionamento anormale del sistema nervoso
• Profilo temporale: tempo (in giorni) tra l'insorgenza dei sintomi generali e i sintomi neurologici
• Visita a regioni endemiche: Storia di aver visitato nelle ultime 4 settimane regioni con attuale trasmissione locale del virus Zika, Dengue e/o Chikungunya
• Anamnesi patologica passata: Storia di una malattia diagnosticata dal medico o riportata in cartella clinica nell'ultimo anno
• Anamnesi familiare: Malattie sofferte da parenti di primo o secondo grado di consanguineità diagnosticate dal medico o riportate in cartella clinica
• Vaccinazione recente: anamnesi di vaccinazione nelle ultime 4 settimane prima dell'insorgenza dei sintomi neurologici
• Malattia infettiva recente: storia di una malattia infettiva nelle ultime 4 settimane prima della comparsa dei sintomi neurologici
• Procedura chirurgica recente: Storia di una procedura chirurgica maggiore nelle ultime 4 settimane prima dell'insorgenza dei sintomi neurologici
• Data dell'esame fisico: data in cui l'esame fisico è stato completato dal gruppo di studio
• Stato mentale: gamma della coscienza propria/esterna
• Orientamento: Consapevolezza del tempo, del luogo e della persona
• Disartria: disfunzione dell'articolazione delle parole secondaria a un danno alle vie motorie
• Deficit di attenzione: incapacità di concentrarsi selettivamente su una parte specifica delle informazioni
• Anomalie dei nervi cranici: Compromissione di uno/più nervi cranici rilevata all'esame obiettivo
• Forza muscolare: quantità di forza esercitata da un muscolo contro la resistenza
• Riflessi tendinei profondi: estensione secondaria a uno stimolo tendineo profondo
• Deficit sensoriale: assenza o anormalità nella funzione sensoriale
• Segno di Romberg: segno clinico che suggerisce atassia sensoriale, secondaria ad anomalie della colonna dorsale
• Atassia: coordinazione muscolare anormale durante i movimenti volontari
• Tono muscolare: resistenza muscolare al movimento passivo
• Ritenzione urinaria: incapacità di completare lo svuotamento della vescica
• Basso tono muscolare rettale: Diminuzione della forza dello sfintere rettale
• Movimenti anormali: nessun movimento volontario, senza scopo, secondario a una disfunzione neurologica
• Insufficienza respiratoria: incapacità di eseguire un efficiente scambio di gas o di mantenere livelli normali di ossigeno e/o anidride carbonica
• Disfunzione autonomica: anomalie nel sistema nervoso autonomo
• Elettromiografia: Studio elettrofisiologico dell'attività muscolare
• Elettroencefalogramma: Studio elettrofisiologico della conduzione cerebrale
• Brain MRI: studio di imaging del cervello
• Risonanza magnetica del midollo spinale: studio di imaging del midollo spinale
• Punteggio Rankin: scala funzionale per pazienti con disturbi neurologici
• Scala ASIA: Gravità della lesione del midollo spinale

Variabili di laboratorio:

• Analisi del sangue: includono conta dei globuli bianchi, piastrine, emoglobina, ematocrito ed enzimi della funzionalità epatica.
• Analisi del liquido spinale: include leucociti, glucosio, proteine, globuli rossi, bande oligoclonali, colture, PCR del virus dell'herpes.
• Analisi virologica: include il rilevamento o l'assenza di rilevamento di IgM e IgG mediante ELISA e l'RNA mediante RT-PCR per virus Zika, virus Dengue e virus Chikungunya.