Effetto dell'omogenato di germogli di broccoli ricchi di sulforafano sull'infiammazione indotta dall'ozono attraverso la modulazione di NRF2 (BroccOz)

I potenziali soggetti saranno visti per una visita di screening di base in cui verrà ottenuto il consenso informato, verrà eseguito un ECG a 12 derivazioni e verrà eseguita la spirometria con successiva induzione dell'espettorato. Solo i soggetti che soddisfano i criteri di funzionalità polmonare e i criteri per un'adeguata produzione di espettorato continueranno nello studio. Se il campione è considerato "borderline" dal gruppo di studio, il soggetto può essere invitato a ripetere la raccolta di un altro campione di espettorato. Ai soggetti sarà richiesto di astenersi dalla caffeina per 12 ore prima di tutte le visite di studio e non devono utilizzare/ingerire farmaci antinfiammatori non steroidei, vitamine antiossidanti, succhi/bevande fortificate con supplemento vitaminico extra e verdure crocifere 7 giorni prima tutte le visite. Ai soggetti verrà fornito un elenco di verdure crocifere.

I volontari qualificati saranno successivamente visitati per una visita di formazione, durante la quale saranno sottoposti a un esame fisico da parte di un medico dello studio. Dopo aver valutato la spirometria di base, il soggetto si eserciterà su un tapis roulant e verranno raccolte le misurazioni della ventilazione minuto. La velocità e/o l'elevazione del tapis roulant verranno regolate fino a quando la ventilazione minuto del soggetto raggiungerà il livello target di 30-40 L/min. La velocità e l'elevazione risultanti verranno utilizzate durante le sessioni di esposizione all'ozono. Alla visita di addestramento, i partecipanti saranno sottoposti anche a biopsia epiteliale nasale da una narice e verrà raccolto un tampone buccale per la genotipizzazione. In questo momento verranno raccolti anche campioni di sangue al basale per analisi di marcatori di infiammazione, valutazioni di citochine, livelli di SFN e conteggio completo delle cellule del sangue con differenziale.

Dopo il completamento della sessione di formazione, il soggetto tornerà per 4 giorni consecutivi. Durante i primi 3 giorni, i soggetti ingeriranno (ingestione osservata) omogenato di germogli di broccoli o omogenato di germogli di erba medica sulla base di una precedente randomizzazione. Un'ora dopo la dose supplementare il 3° giorno, il volontario sarà esposto a 0,4 ppm di ozono per un periodo di 2 ore. Durante l'esposizione, i soggetti eseguiranno 15 minuti di esercizio moderato su un tapis roulant (ventilazione minuto = 30-40 L/min), ciascuno separato da 15 minuti di riposo seduto. La frequenza cardiaca e il ritmo saranno continuamente monitorati durante l'esposizione. La spirometria e il punteggio dei sintomi saranno eseguiti sia prima che dopo l'esposizione. Un'ora dopo la fine dell'esposizione, verrà prelevata una biopsia epiteliale nasale dalla narice controlaterale a quella utilizzata durante la visita precedente. Quattro ore dopo il completamento dell'esposizione, verrà prelevato il sangue per gli endpoint dello studio e verrà eseguita un'induzione dell'espettorato. Il giorno successivo il soggetto tornerà per una visita di follow-up per includere segni vitali, punteggio dei sintomi, spirometria, induzione dell'espettorato e prelievo venoso per gli endpoint del sangue.

Ai soggetti sarà richiesto di astenersi da un elenco di verdure per 1 settimana prima di ogni sessione di studio fino al completamento di tale sessione. Ai soggetti verrà anche chiesto di mantenere un diario alimentare per lo stesso tempo.

Dopo un periodo di washout da 2 a 6 settimane, i partecipanti torneranno nuovamente per una sequenza ripetuta di 4 giorni con 3 giorni di ingestione di integratori seguiti dall'esposizione all'ozono utilizzando il supplemento alternativo e una visita di follow-up post-esposizione di 24 ore. I campioni per le analisi saranno raccolti negli stessi punti temporali di quelli utilizzati nella sequenza iniziale.