Mobilizzazione autologa delle cellule progenitrici CD117+ per trapianto di polmone

I ricercatori hanno sviluppato una nuova terapia utilizzando una cellula staminale trovata nel midollo osseo che è definita dall'espressione sulla superficie cellulare della proteina "cluster of differenziation antigen 117" (CD117). Gli studi che utilizzano queste cellule staminali in un modello di trapianto di cuore di topo hanno dimostrato una sopravvivenza significativamente migliorata dei cuori trapiantati (fino a più di 5 volte quella osservata con trapianti di cuore non trattati). Studi in vitro sui topi mostrano anche che queste cellule lavorano per inibire il sistema immunitario inibendo l'attivazione/proliferazione delle cellule T mediante meccanismi paracrini (primari) e dipendenti dal contatto (minori). È importante sottolineare che queste cellule staminali vengono prelevate dal destinatario del trapianto previsto (autologo) e poiché queste cellule fanno normalmente parte del proprio corpo (in piccole quantità); queste cellule sono teoricamente prive di rischi per il paziente. Questo è molto diverso da altre terapie con cellule staminali, che vengono prelevate dal donatore e come tali espongono il paziente a un rischio significativo di sviluppare reazioni immunitarie potenzialmente letali. Poiché l'uso delle nostre cellule staminali è potenzialmente sicuro, il rapido studio, sviluppo e implementazione della terapia con cellule staminali CD117 autologhe (SC) nei pazienti umani sottoposti a trapianto è teoricamente possibile. Pertanto, queste cellule hanno un alto potenziale di impatto per il campo del trapianto di tessuti e organi, nonché per l'autoimmunità - per migliorare potenzialmente l'attecchimento di tessuto/cellulare, ridurre il rigetto acuto e/o promuovere la tolleranza al trapianto di organi (mancanza di rigetto nonostante l'assenza di concomitante immunosoppressione). Prima del pieno sviluppo clinico (prove di efficacia nell'uomo), il passo successivo è sviluppare un mezzo sicuro ed efficace per ottenere quantità relativamente grandi di queste cellule da potenziali riceventi umani. Poiché la biopsia del midollo osseo per la cattura delle cellule non è priva di rischi (soprattutto per i potenziali malati di trapianto di polmone), i ricercatori propongono di utilizzare Plerixafor (Mozobil), un inibitore del recettore 4 delle chemochine CXC (CXCR4) per causare l'efflusso di midollo osseo derivato Cellule CD117+ nel sangue periferico per la cattura mediante aferesi/selezione positiva. In caso di successo, il prossimo passo sarà eseguire studi iniziali sulla sicurezza in pazienti umani in attesa di trapianto e controlli normali (non un obiettivo di questo protocollo iniziale). Questi studi hanno il potenziale per portare a studi di efficacia clinica su larga scala e l'indicazione/implementazione definitiva per le malattie umane.

Misura dell'esito primario: il numero di cellule CD117+ circolanti per millilitro (ml) di sangue periferico al basale e dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) (variazione delle cellule CD117+ del sangue periferico per ml).

Misure di risultato secondario:

i.) Il numero di eventi avversi (AE) correlati a Plerixafor (Mozobil). ii.) Il numero di pazienti con eventi avversi correlati a Plerixafor (Mozobil) iii.) Il numero di eventi avversi gravi (SAE) correlati a Plerixafor (Mozobil). iv.) Il numero di pazienti con eventi avversi gravi (SAE) correlati a Plerixafor (Mozobil).

Come elencato nel foglietto illustrativo, le reazioni avverse più comuni (≥10%) durante la mobilizzazione delle cellule staminali ematopoietiche sono state: diarrea (37%), nausea (34%), affaticamento (27%), reazione al sito di iniezione (34%), mal di testa (22%), artralgia (13%), vertigini (11%) e vomito (10%). Va notato che la maggior parte di questi si è verificata in pazienti sottoposti anche ad aferesi.

Intervallo di misurazione del risultato:

Intervallo di misurazione dell'esito primario: al basale e 8 ore dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil)

Misure di esito secondario Intervallo di tempo:

i.): Continuamente per i primi 30 minuti dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil), a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento.

ii.): Per i primi 30 minuti dopo la somministrazione, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento.

iii.): Per i primi 30 minuti dopo la somministrazione, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento.

iv.): Per i primi 30 minuti dopo la somministrazione, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento, a 1 settimana dopo il trattamento con Plerixafor (Mozobil) e fino a 1 anno dopo il trattamento.

Obiettivi di studio primari:

Per determinare se Plerixafor (Mozobil) mobiliterà le cellule progenitrici CD117+ dal midollo osseo in pazienti con malattie polmonari croniche in lista d'attesa per il trapianto di polmone (rispetto ai controlli normali). Confronteremo le conte basali delle cellule CD117+ con le conte cellulari 8 ore dopo Plerixafor per determinare l'efficacia della mobilizzazione.

I risultati primari verranno utilizzati per determinare il numero di cicli di aferesi che potrebbero essere necessari per isolare cellule sufficienti per la reinfusione in momenti successivi in ​​uno studio futuro.

Significato:

Se gli investigatori possono mobilitare un numero sufficiente di cellule CD117+ autologhe, alla fine le reinfonderanno al momento del trapianto per determinare se possiamo abrogare il rigetto acuto dopo il trapianto di polmone umano (studio futuro). I ricercatori ritengono che queste siano più sicure delle cellule staminali allogeniche in quanto non vi è alcun rischio di malattia del trapianto contro l'ospite (GVHD) con cellule autologhe.

Ipotesi:

Questi esperimenti dovrebbero dimostrare l'efficacia della mobilizzazione delle cellule staminali CD117+ dal midollo osseo al sangue periferico (PB) tramite antagonismo CXCR4 (Plerixafor) e se la malattia polmonare allo stadio terminale influisce sulla capacità di mobilizzare le cellule staminali. Inoltre, questi risultati verranno utilizzati per estrapolare matematicamente approssimativamente quanti cicli di aferesi del sangue periferico saranno necessari per ottenere un numero adeguato di cellule staminali per l'infusione clinica (10e7) per uno studio futuro.

Metodi:

Gli esperimenti comporteranno il prelievo di sangue da pazienti consenzienti in attesa di trapianto di polmone (così come controlli normali) prima del trattamento con Plerixafor (Mozobil) (240 mcg/kg per via sottocutanea) e poi 8 ore dopo il trattamento come nella Tabella 1.

TABELLA 1:

Categoria paziente Analisi PB al basale Plerixafor (Mozobil) Rx Analisi PB 8 ore post-Rx

In attesa di Tx (n=15, 5 broncopneumopatia cronica ostruttiva (BPCO), 5 fibrosi cistica (CF) e 5 fibrosi polmonare (PF)) CD117 isolamento/analisi mediante citometria a flusso Sì - 240 mcg/kg CD117+ isolamento/analisi delle cellule staminali mediante citometria a flusso

Controllo normale (n=5) Isolamento/analisi di CD117 mediante citometria a flusso Sì - 240 mcg/kg Isolamento/analisi di cellule staminali CD117+ mediante citometria a flusso