Mobilização de Células Progenitoras CD117+ Autólogas para Transplante de Pulmão

Os pesquisadores desenvolveram uma nova terapia utilizando uma célula-tronco encontrada na medula óssea que é definida pela expressão da superfície celular da proteína "agrupamento de antígeno de diferenciação 117" (CD117). Estudos utilizando essas células-tronco em um modelo de transplante de coração em camundongos demonstraram uma melhora significativa na sobrevida de corações transplantados (até mais de 5 vezes a observada em transplantes de coração não tratados). Estudos in vitro em camundongos também mostram que essas células funcionam para inibir o sistema imunológico, inibindo a ativação/proliferação de células T por mecanismos parácrinos (primários) e dependentes de contato (menores). É importante ressaltar que essas células-tronco são retiradas do destinatário do transplante pretendido (autólogo) e, como essas células fazem parte de seu próprio corpo normalmente (em pequeno número); essas células são teoricamente sem risco para o paciente. Isso é muito diferente de outras terapias com células-tronco, que são retiradas do doador e, como tal, colocam o paciente em risco significativo de desenvolver reações imunológicas potencialmente fatais. Como o uso de nossas próprias células-tronco é potencialmente seguro - o rápido estudo, desenvolvimento e implementação da terapia de células-tronco CD117 autólogas (SC) em pacientes humanos transplantados é teoricamente possível. Portanto, essas células têm alto potencial de impacto para o campo de transplante de tecidos e órgãos, bem como auto-imunidade - para melhorar potencialmente o enxerto de tecido/celular, diminuir a rejeição aguda e/ou promover a tolerância ao transplante de órgãos (ausência de rejeição apesar de nenhum imunossupressão). Antes do desenvolvimento clínico completo (testes de eficácia em humanos), o próximo passo é desenvolver um meio seguro e eficaz para obter quantidades relativamente grandes dessas células de potenciais receptores humanos. Como a biópsia da medula óssea para captura de células não é isenta de riscos (especialmente para potenciais receptores de transplante de pulmão), os pesquisadores propõem o uso de Plerixafor (Mozobil), um inibidor do receptor 4 da quimiocina CXC (CXCR4) para causar efluxo de células derivadas da medula óssea células CD117+ ao sangue periférico para captação por aférese/seleção positiva. Se for bem-sucedido, o próximo passo será realizar estudos iniciais de segurança em pacientes humanos aguardando transplante e controles normais (no entanto, não é um objetivo deste protocolo inicial). Esses estudos têm o potencial de levar a ensaios clínicos de eficácia em larga escala e indicação/implementação definitiva para doenças humanas.

Medida de resultado primário: O número de células CD117+ circulantes por mililitro (ml) de sangue periférico na linha de base e após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) (alteração nas células CD117+ de sangue periférico por ml).

Medidas de resultados secundários:

i.) O número de eventos adversos (EAs) relacionados ao Plerixafor (Mozobil). ii.) O número de pacientes com EAs relacionados ao Plerixafor (Mozobil) iii.) O número de eventos adversos graves (SAEs) relacionados com Plerixafor (Mozobil). 4.) O número de pacientes com Plerixafor (Mozobil) relacionados a eventos adversos graves (SAEs).

Conforme listado na bula, as reações adversas mais comuns (≥10%) durante a mobilização de células-tronco hematopoiéticas foram: diarreia (37%), náusea (34%), fadiga (27%), reação no local da injeção (34%), cefaléia (22%), artralgia (13%), tontura (11%) e vômito (10%). Deve-se notar que a maioria destes ocorreram em pacientes também submetidos a aférese.

Período de tempo da medida de resultado:

Período de tempo da medida de resultado primário: na linha de base e 8 horas após o tratamento com Plerixafor (Mozobil)

Período de tempo das medidas de resultado secundário:

i.): Continuamente durante os primeiros 30 minutos após o tratamento com Plerixafor (Mozobil), 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento.

ii.): Nos primeiros 30 minutos após a administração, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento.

ii.): Nos primeiros 30 minutos após a administração, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento.

4.): Nos primeiros 30 minutos após a administração, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento, 1 semana após o tratamento com Plerixafor (Mozobil) e até 1 ano após o tratamento.

Objetivos primários do estudo:

Determinar se Plerixafor (Mozobil) irá mobilizar células progenitoras CD117+ da medula óssea em pacientes com doenças pulmonares crônicas na lista de espera para transplante de pulmão (versus controles normais). Iremos comparar as contagens basais de células CD117+ com as contagens de células 8 horas após Plerixafor para determinar a eficácia da mobilização.

Os resultados primários serão usados ​​para determinar o número de rodadas de aférese que podem ser necessárias para isolar células suficientes para reinfusão em pontos de tempo posteriores em um estudo futuro.

Significado:

Se os investigadores puderem mobilizar um número suficiente de células CD117+ autólogas, eles eventualmente as reinfundirão no momento do transplante para determinar se podemos revogar a rejeição aguda após o transplante de pulmão humano (estudo futuro). Os investigadores acreditam que elas são mais seguras do que as células-tronco alogênicas, pois não há risco de doença do enxerto contra o hospedeiro (GVHD) com células autólogas.

Hipótese:

Esses experimentos devem demonstrar a eficácia da mobilização de células-tronco CD117+ da medula óssea para o sangue periférico (PB) via antagonismo CXCR4 (Plerixafor) e se a doença pulmonar em estágio terminal afeta a capacidade de mobilizar células-tronco. Além disso, esses resultados serão usados ​​para extrapolar matematicamente quantos ciclos de aférese de sangue periférico serão necessários para atingir números adequados de células-tronco para infusão clínica (10e7) para um estudo futuro.

Métodos:

Os experimentos envolverão a coleta de sangue de pacientes consentidos aguardando transplante de pulmão (bem como controles normais) antes do tratamento com Plerixafor (Mozobil) (240mcg/kg por via subcutânea) e 8 horas após o tratamento, conforme a Tabela 1.

TABELA 1:

Categoria do paciente PB análise inicial Plerixafor (Mozobil) Rx PB análise 8 horas após Rx

Aguardando Tx (n=15, 5 doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), 5 Fibrose Cística (FC) e 5 Fibrose Pulmonar (FP)) CD117 isolamento/análise por Citometria de Fluxo Sim - 240 mcg/kg CD117+ isolamento/análise de células-tronco por Citometria de Fluxo

Controle Normal (n=5) Isolamento/análise de CD117 por Citometria de Fluxo Sim - 240mcg/kg Isolamento/análise de células-tronco CD117+ por Citometria de Fluxo