Мобилизация аутологичных клеток-предшественников CD117+ для трансплантации легких

Исследователи разработали новую терапию с использованием стволовых клеток, обнаруженных в костном мозге, которые определяются экспрессией на клеточной поверхности белка «кластер дифференцировочного антигена 117» (CD117). Исследования с использованием этих стволовых клеток в модели трансплантации сердца мыши продемонстрировали значительное улучшение выживаемости пересаженных сердец (более чем в 5 раз по сравнению с необработанными трансплантатами сердца). Исследования in vitro на мышах также показывают, что эти клетки ингибируют иммунную систему, ингибируя активацию/пролиферацию Т-клеток как паракринными (первичными), так и контактно-зависимыми (в меньшей степени) механизмами. Важно отметить, что эти стволовые клетки берутся у предполагаемого реципиента трансплантата (аутологичные), и, поскольку эти клетки обычно являются частью их собственного тела (в небольшом количестве); эти клетки теоретически не представляют опасности для пациента. Это очень отличается от других методов лечения стволовыми клетками, которые берутся у донора и, как таковые, подвергают пациента значительному риску развития потенциально опасных для жизни иммунных реакций. Поскольку использование наших собственных стволовых клеток потенциально безопасно, теоретически возможно быстрое изучение, разработка и внедрение терапии аутологичными стволовыми клетками (СК) CD117 у пациентов с трансплантацией человека. Таким образом, эти клетки обладают высоким потенциалом воздействия в области трансплантации тканей и органов, а также аутоиммунитета, потенциально улучшая приживление ткани/клеточного трансплантата, уменьшая острое отторжение и/или способствуя толерантности к трансплантации органов (отсутствие отторжения, несмотря на отсутствие сопутствующей терапии). подавление иммунитета). До полной клинической разработки (испытания эффективности на людях) следующим шагом является разработка безопасных и эффективных способов получения относительно больших количеств этих клеток от потенциальных реципиентов-людей. Поскольку биопсия костного мозга для захвата клеток не лишена риска (особенно для больных потенциальных реципиентов трансплантата легких), исследователи предлагают использовать плериксафор (Мозобил), ингибитор СХС-хемокинового рецептора 4 (CXCR4), чтобы вызвать отток костномозгового происхождения. Клетки CD117+ в периферическую кровь для захвата путем афереза/положительного отбора. В случае успеха следующим шагом будет проведение первоначальных исследований безопасности у пациентов, ожидающих трансплантации, и у обычных контролей (однако это не является целью этого первоначального протокола). Эти исследования могут привести к крупномасштабным испытаниям клинической эффективности и окончательному показанию/применению для лечения заболеваний человека.

Измерение первичного результата: количество циркулирующих клеток CD117+ на миллилитр (мл) периферической крови в начале исследования и после лечения плериксафором (мозобилом) (изменение количества клеток CD117+ в периферической крови на мл).

Вторичные итоговые показатели:

i.) Количество нежелательных явлений (НЯ), связанных с плериксафором (мозобилом). II.) Количество пациентов с НЯ, связанными с Плериксафором (Мозобилом) iii.) Количество серьезных нежелательных явлений (СНЯ), связанных с плериксафором (мозобилом). IV.) Число пациентов с серьезными нежелательными явлениями (СНЯ), связанными с плериксафором (мозобилом).

Как указано в листке-вкладыше, наиболее частыми побочными реакциями (≥10%) во время мобилизации гемопоэтических стволовых клеток были: диарея (37%), тошнота (34%), утомляемость (27%), реакция в месте инъекции (34%). головная боль (22%), артралгия (13%), головокружение (11%) и рвота (10%). Следует отметить, что большинство из них произошло у пациентов, также подвергавшихся аферезу.

Сроки измерения результатов:

Временные рамки измерения первичного исхода: Исходный уровень и через 8 часов после лечения плериксафором (мозобилом).

Временные рамки для измерения вторичных результатов:

i.): Непрерывно в течение первых 30 минут после лечения Плериксафором (Мозобилом), через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобилом) и до 1 года после лечения.

II.): В течение первых 30 минут после введения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения.

III.): В течение первых 30 минут после введения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения.

IV.): В течение первых 30 минут после введения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения, через 1 неделю после лечения Плериксафором (Мозобил) и до 1 года после лечения.

Основные цели исследования:

Определить, будет ли Plerixafor (Mozobil) мобилизовать клетки-предшественники CD117+ из костного мозга у пациентов с хроническими заболеваниями легких, находящихся в листе ожидания трансплантации легких (по сравнению с контрольной группой). Мы сравним исходное количество клеток CD117+ с количеством клеток через 8 часов после введения плериксафора, чтобы определить эффективность мобилизации.

Первичные результаты будут использованы для определения количества раундов афереза, которые могут потребоваться для выделения достаточного количества клеток для реинфузии в более поздние моменты времени в будущем исследовании.

Значимость:

Если исследователи смогут мобилизовать достаточное количество аутологичных клеток CD117+, они в конечном итоге повторно введут их во время трансплантации, чтобы определить, сможем ли мы отменить острое отторжение после трансплантации легкого человека (будущее исследование). Исследователи считают, что они безопаснее, чем аллогенные стволовые клетки, поскольку при использовании аутологичных клеток отсутствует риск реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ).

Гипотеза:

Эти эксперименты должны продемонстрировать эффективность мобилизации стволовых клеток CD117+ из костного мозга в периферическую кровь (PB) посредством антагонизма CXCR4 (плериксафор) и влияние терминальной стадии заболевания легких на способность мобилизовать стволовые клетки. Кроме того, эти результаты будут использованы для математической экстраполяции приблизительного количества раундов афереза ​​периферической крови, которое потребуется для достижения адекватного количества стволовых клеток для клинической инфузии (10e7) для будущего исследования.

Методы:

Эксперименты будут включать забор крови у пациентов, давших согласие, ожидающих трансплантацию легких (а также у обычных контролей) до лечения плериксафором (мозобилом) (240 мкг/кг подкожно), а затем через 8 часов после лечения, как указано в таблице 1.

ТАБЛИЦА 1:

Категория пациента Базовый анализ PB Plerixafor (Mozobil) Rx Анализ PB через 8 часов после Rx

В ожидании Tx (n = 15, 5 хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), 5 муковисцидоз (CF) и 5 ​​фиброз легких (PF)) Выделение/анализ CD117 с помощью проточной цитометрии Да - 240 мкг/кг CD117+ выделение/анализ стволовых клеток методом проточной цитометрии

Нормальный контроль (n=5) Выделение/анализ CD117 с помощью проточной цитометрии Да - 240 мкг/кг Выделение/анализ стволовых клеток CD117+ с помощью проточной цитометрии