Effetti dell'etanolo sull'integrità della parete intestinale (E-GUT)

Un reperto comune nei pazienti traumatizzati ricoverati al pronto soccorso con lesioni gravi è la presenza di abuso di alcol. L'alcol è coinvolto fino al 40% dei decessi per incidenti automobilistici, il 60% dei decessi per lesioni intenzionali e il 50% dei ricoveri ospedalieri per lesioni.

Il consumo cronico di alcol porta a una diminuzione dell'integrità della parete intestinale negli alcolisti che bevono attivamente e nei pazienti con malattia epatica indotta dall'alcol. Studi sugli animali dimostrano che il danno alla mucosa causato dal consumo di alcol aumenta la permeabilità dell'intestino alle macromolecole. Ciò facilita la traslocazione dell'endotossina e di altre tossine batteriche dal lume intestinale alla circolazione portale. Oltre all'aumento dell'endotossiemia, altri studi mostrano che l'evento iniziale in risposta all'alcol è un aumento dell'afflusso di leucociti che porta a un aumento del rilascio di mediatori nocivi, come le specie reattive dell'ossigeno, i leucotrieni e l'istamina da parte dei mastociti. Il consumo di alcol porta quindi a una diminuzione dell'integrità della parete intestinale con aumento dell'endotossiemia e di conseguenza induce una risposta infiammatoria. I dati sugli effetti del consumo acuto di alcol sull'integrità della parete intestinale nei non alcolisti sono ancora scarsi.

Nei pazienti esposti a gravi traumi, la perdita di integrità della parete intestinale è stata implicata come un importante contributo allo sviluppo di un'infiammazione eccessiva [6]. Il danno della mucosa intestinale si sviluppa subito dopo il trauma portando alla perdita di integrità della parete intestinale e con conseguente traslocazione di batteri e tossine luminali nella parete intestinale. Ciò è stato associato allo sviluppo di una risposta infiammatoria. Questa eccessiva infiammazione può a sua volta portare alla sindrome da risposta infiammatoria sistemica (SIRS) che alla fine può portare a insufficienza multiorgano (MOF) e morte. Fino al 20% dei decessi nei pazienti traumatizzati è dovuto alle conseguenze di SIRS e MOF.

Quando si valutano gli effetti dell'alcol e del trauma grave sull'integrità della parete intestinale, combinati con il fatto che i due coesistono frequentemente, si può ipotizzare che l'esito per i pazienti traumatizzati sotto l'influenza dell'alcol sia dannoso. La letteratura su questo problema è inequivocabile, costituita solo da serie retrospettive relativamente piccole.

Popolazione (base) 15 volontari umani maschi adulti sani saranno inclusi in questo studio

Criterio di inclusione

• volontari maschi
• età compresa tra i 18 e i 60 anni
• consenso informato scritto

Criteri di esclusione

• storia medica di abuso di alcol
• uso di qualsiasi farmaco
• anamnesi di malattia intestinale

I volontari confermeranno di aver soddisfatto i criteri di inclusione firmando il consenso informato.

Calcolo della dimensione del campione Poiché attualmente non sono disponibili dati sull'effetto dell'alcol sull'integrità della parete intestinale misurata dal FABP, i ricercatori condurranno uno studio pilota. La dimensione scelta della popolazione di 15 volontari si basa su vantaggi finanziari e organizzativi.

Prodotto sperimentale/trattamento I soggetti consumeranno 1 g/kg di vino (12%) o 600 ml di acqua entro 45 minuti.

METODI Parametro/endpoint principale dello studio Obiettivo primario: lo scopo di questo studio è determinare gli effetti immediati del consumo orale di alcol in volontari sani sull'integrità della parete intestinale misurata mediante I-FABP e LBP.

L'integrità della parete intestinale sarà valutata utilizzando I-FABP come misura dell'integrità dell'enterocita. La proteina legante il lipopolisaccaride (LBP), una proteina che lega l'LPS, servirà come misura dell'endotossiemia. Inoltre, l'effetto dell'alcol sui marcatori di integrità della parete intestinale di per sé viene valutato aggiungendo artificialmente alcol al sangue e confrontandolo con sangue non alcolizzato.

Le seguenti caratteristiche del "paziente" vengono acquisite per valutare il loro possibile effetto sui livelli di FABP/LBP e per correggere eventuali variazioni osservate: età, peso, lunghezza, temperatura corporea e razza.

Procedure dello studio Dopo il consenso informato, quindici volontari maschi adulti sani, di età compresa tra 18 e 60 anni, parteciperanno allo studio. Saranno randomizzati in due gruppi: uno consumerà alcol, l'altro consumerà acqua (vedi sotto). Una settimana dopo, i gruppi cambieranno i volontari con una storia medica di abuso di alcol o malattie intestinali o i soggetti che usano qualsiasi farmaco saranno esclusi dallo studio.

I volontari saranno a digiuno per 6 ore prima del campionamento per ottenere un assorbimento riproducibile di alcol. Per evitare la disidratazione o l'ipoglicemia, i volontari potranno bere tè, acqua o succhi di frutta limpidi fino a 2 ore prima del campionamento.

Prelievo di sangue: da ogni volontario verranno prelevati due campioni di sangue senza additivi. Il primo campione (S1) di 14 ml di sangue sarà diviso in due metà: 5 ml di sangue per l'analisi dell'integrità della parete intestinale senza aggiunta di etanolo, gli altri 5 ml saranno analizzati dopo l'aggiunta di 5 µl di etanolo puro al 96% per ottenere un sangue concentrazione di 1‰ di etanolo. Dopo il primo campione i volontari vengono randomizzati a bere 1 g/kg di etanolo nel vino (12 gr/100 ml) per ottenere un livello di alcol nel sangue di 1 ‰ o a bere la stessa quantità in acqua. Le bevande verranno consumate in un massimo di 45 minuti. Trenta minuti dopo aver consumato l'ultimo bicchiere di bevanda, verrà raccolto il secondo campione (S2) di 8 ml di sangue. I successivi 4 campioni vengono prelevati con intervalli di un'ora (rispettivamente S3, S4, S5 e S6). L'ultimo campione viene prelevato in una seconda visita alle 19:00 del giorno successivo. Una settimana dopo questa visita si ripeterà lo stesso protocollo in cui si incrocerà il gruppo alcol e acqua.

In ogni campione verranno misurati I-FABP, L-FABP, LBP, IL-6, ALT, AST, GGT e la percentuale di alcol.

Ritiro di singoli soggetti I soggetti possono lasciare lo studio in qualsiasi momento per qualsiasi motivo se lo desiderano senza alcuna conseguenza. Tutti i dati finora raccolti verranno distrutti. Lo sperimentatore può decidere di ritirare un soggetto dallo studio per motivi medici urgenti.

Sostituzione dei soggetti a seguito di recesso La sostituzione dei soggetti a qualsiasi titolo receduti avverrà, se necessario. Questo sarà concluso una volta che l'analisi sarà stata fatta in quanto si tratta di uno studio pilota. La sostituzione avverrà solo quando un soggetto non è in grado di completare il protocollo.

SEGNALAZIONE SULLA SICUREZZA Ai sensi dell'articolo 10, comma 1, del WMO, lo sperimentatore informerà i soggetti e il METC accreditato esaminatore se si verifica qualcosa, sulla base del quale sembra che gli svantaggi della partecipazione possano essere significativamente maggiori di quanto previsto in la proposta di ricerca. Lo studio sarà sospeso in attesa di ulteriore revisione da parte del METC accreditato, salvo nella misura in cui la sospensione metterebbe a repentaglio la salute dei soggetti. L'investigatore si prenderà cura che tutti i soggetti siano tenuti informati.

Eventi avversi e eventi avversi gravi Gli eventi avversi sono definiti come qualsiasi esperienza indesiderata verificatasi a un soggetto durante lo studio. Verranno registrati tutti gli eventi avversi segnalati spontaneamente dal soggetto o osservati dallo sperimentatore o dal suo staff.

Un evento avverso grave è qualsiasi evento o effetto medico sfavorevole che a qualsiasi dose:

• provoca la morte;
• è in pericolo di vita (al momento dell'evento);
• richiede il ricovero in ospedale o il prolungamento del ricovero ospedaliero esistente dei pazienti;
• comporta disabilità o incapacità persistenti o significative;
• è un'anomalia congenita o un difetto congenito;
• è un nuovo evento dello studio suscettibile di influire sulla sicurezza dei soggetti, come un esito inatteso di una reazione avversa, la mancanza di efficacia di un IMP utilizzato per il trattamento di una malattia potenzialmente letale, un importante risultato di sicurezza da un animale appena completato studio, ecc.

Tutti gli eventi avversi gravi verranno segnalati tramite il portale web ToetsingOnline al METC accreditato che ha approvato il protocollo, entro 15 giorni dalla prima conoscenza da parte dello sponsor delle reazioni avverse gravi.

Gli eventi avversi gravi che provocano la morte o che mettono in pericolo la vita devono essere segnalati tempestivamente. La segnalazione accelerata avverrà entro e non oltre 7 giorni dopo che lo sperimentatore responsabile ha avuto la prima conoscenza della reazione avversa. Questo è per un rapporto preliminare con altri 8 giorni per il completamento del rapporto.

Reazioni avverse gravi inattese sospette (SUSAR)

Le reazioni avverse sono tutte risposte spiacevoli e non intenzionali a un prodotto sperimentale correlate a qualsiasi dose somministrata.

Le reazioni avverse inattese sono reazioni avverse la cui natura o gravità non è coerente con le informazioni sul prodotto applicabili (ad es. opuscolo dello sperimentatore per un IMP non approvato o riassunto delle caratteristiche del prodotto (SPC) per un medicinale autorizzato).

Lo sponsor segnalerà al METC le seguenti SUSAR attraverso il portale web ToetsingOnline:

• SUSAR che sono emerse nella sperimentazione clinica che è stata valutata dal METC;
• SUSAR sorte in altre sperimentazioni cliniche dello stesso sponsor e con lo stesso medicinale, e che potrebbero avere conseguenze sulla sicurezza dei soggetti coinvolti nella sperimentazione clinica valutata dal METC.

Le restanti SUSAR sono registrate in un elenco riepilogativo (line-listing) che sarà presentato una volta ogni semestre al METC. Questo elenco di linee fornisce una panoramica di tutte le SUSAR del medicinale oggetto dello studio, accompagnata da una breve relazione che evidenzia i principali punti di preoccupazione.

La segnalazione accelerata delle SUSAR attraverso il portale web ToetsingOnline è sufficiente come notifica all'autorità competente.

Lo sponsor comunicherà tutte le SUSAR spedite alle autorità competenti degli altri Stati membri, secondo i requisiti degli Stati membri.

La segnalazione accelerata avverrà entro e non oltre 15 giorni dopo che lo sponsor è venuto a conoscenza delle reazioni avverse. Per i casi mortali o in pericolo di vita il termine sarà massimo di 7 giorni per un rapporto preliminare con altri 8 giorni per il completamento del rapporto.

Relazione annuale sulla sicurezza Oltre alla segnalazione accelerata delle SUSAR, lo sponsor presenterà, una volta all'anno per tutta la durata della sperimentazione clinica, una relazione sulla sicurezza al METC accreditato, all'autorità competente, al comitato di valutazione dei medicinali e alle autorità competenti degli Stati membri interessati.

Questo rapporto sulla sicurezza è composto da:

• un elenco di tutte le reazioni avverse gravi sospette (impreviste o attese), insieme a una tabella riepilogativa aggregata di tutte le reazioni avverse gravi segnalate, ordinate per organo e sistema, per studio;
• una relazione riguardante la sicurezza dei soggetti, consistente in un'analisi completa della sicurezza e una valutazione dell'equilibrio tra l'efficacia e la nocività del farmaco in esame.

Follow-up degli eventi avversi Tutti gli eventi avversi saranno seguiti fino alla loro riduzione o fino al raggiungimento di una situazione stabile. A seconda dell'evento, il follow-up può richiedere ulteriori esami o procedure mediche come indicato e/o l'invio al medico generico oa un medico specialista.

CONSIDERAZIONI ETICHE Dichiarazione del regolamento Lo studio sarà condotto secondo i principi della Dichiarazione di Helsinki (59a Assemblea generale WMA, Seoul, ottobre 2008 t) e in conformità con il Medical Research Involving Human Subjects Act (WMO) e altre linee guida, regolamenti e Atti

Reclutamento e consenso Tutte le persone interessate riceveranno una cartella riguardante lo studio almeno due settimane prima dell'inizio dello studio. Se il volontario accetta di prendere parte allo studio, gli verrà chiesto di firmare il consenso informato e di riportarlo in ospedale il giorno dello studio.

Valutazione dei benefici e dei rischi, parentela di gruppo I soggetti consumano 1 g di alcol per kg di peso corporeo. Tra le ore 17.00 e le ore 18.00 del giorno successivo verrà prelevato un campione di sangue da 19 ml seguito da 5 campioni da 11 ml e uno da 8 ml. Le osservazioni si svolgeranno in due visite di sei ore e due visite di un'ora. È improbabile che i soggetti sperimentino alcun disagio fisico o psicologico dal campione di sangue totale di 82 ml.

I volontari digiuneranno per sei ore prima del primo prelievo di sangue per ottenere una concentrazione affidabile di etanolo nel sangue. Dopo il campionamento alle ore 22.00 i volontari saranno trasportati a casa in taxi.

Risarcimento per lesioni Lo sponsor/investigatore ha un'assicurazione di responsabilità civile conforme all'articolo 7, sottosezione 6 del WMO.

Lo sponsor ha (anche) un'assicurazione conforme ai requisiti legali nei Paesi Bassi (articolo 7 WMO e misura relativa all'assicurazione obbligatoria per la ricerca clinica nell'uomo del 23 giugno 2003). Questa assicurazione fornisce copertura per danni ai soggetti della ricerca a causa di lesioni o morte causate dallo studio.

L'assicurazione si applica ai danni che si manifestano durante lo studio o entro 4 anni dalla fine dello studio.