Disponibilità di energia nelle atlete

La popolazione studiata è stata reclutata attraverso le federazioni sportive danesi e svedesi negli sport di resistenza sotto carico e nei club sportivi di resistenza competitivi locali, attraverso volantini, annunci di pagine web e mailing. Le atlete interessate hanno ricevuto il protocollo di studio e un questionario autosomministrato, valutando l'età, lo sport, il regime di allenamento e la funzione mestruale autovalutata. Gli atleti che hanno restituito il questionario e che erano interessati a un'ulteriore partecipazione sono stati contattati dal gruppo di ricerca. Prima dell'inclusione, tutti i soggetti sono stati informati oralmente e per iscritto di tutte le procedure dello studio e hanno firmato un modulo di consenso informato. I soggetti inclusi e definiti come atleti di resistenza d'élite erano atleti a livello di squadra nazionale o atleti di resistenza agonistica di società sportive regionali, di età compresa tra 18 e 38 anni, che si allenavano un minimo di cinque volte a settimana. I criteri di esclusione includevano disfunzioni mestruali clinicamente verificate diverse da oligomenorrea/amenorrea ipotalamica funzionale; gravidanza; malattia cronica; fumare; uso di forme di contraccettivi diversi da quelli orali, ad esempio coil/cerotti ormonali; incapacità o non volontà di interrompere i contraccettivi ormonali per almeno 6 settimane prima dell'indagine; o lesioni che impediscono all'atleta di allenarsi ≥ 2 settimane.

La raccolta dei dati è stata eseguita in due giorni consecutivi seguiti da un periodo di registrazione di 7 giorni nell'ambiente normale degli atleti. Il primo giorno comprendeva esami riguardanti la salute delle ossa, la pressione sanguigna e la funzione riproduttiva. Il secondo giorno comprendeva esami del metabolismo energetico, della capacità aerobica e della valutazione dei disturbi alimentari. I soggetti sono stati istruiti a non esercitare per più di 30 minuti a intensità bassa o moderata il giorno prima e il primo giorno di visita e ad arrivare in clinica a digiuno (da mezzanotte) e riposati.

PANORAMICA DEL PROTOCOLLO:

GIORNO 1: inizio alle 7:45

1. Prova di gravidanza
2. Prelievo di sangue
3. Scansione DXA
4. Pressione sanguigna
5. Pasto
6. Visita ginecologica

GIORNO 2: Inizio alle 7:00

1. RMR
2. Prelievo di sangue
3. Efficienza lavorativa
4. Pasto
5. Intervista EDE
6. Prova da sforzo incrementale
7. Questionario EDI

REGISTRO DI ALIMENTAZIONE E ATTIVITÀ DI 7 GIORNI

La tempistica del periodo di esame e registrazione è stata pianificata individualmente per ciascun soggetto al fine di scegliere un periodo che riflettesse le loro abitudini alimentari abituali e i regimi di esercizio. L'assunzione dietetica e l'intensità dell'allenamento sono state registrate dai soggetti per sette giorni consecutivi per valutare l'attuale EA. L'assunzione di energia è stata calcolata da un record alimentare prospettico pesato (Exido 246030 Kitchen Scale, Göteborg, Svezia), utilizzando un programma di analisi dei nutrienti, Dankost 2000 (Dankost, Copenhagen, Danimarca) per i prodotti alimentari danesi e Dietist XP (Kost och Näringsdata AB, Bromma, Svezia) per i prodotti alimentari svedesi. Ai soggetti sono state fornite istruzioni verbali e scritte approfondite e una dimostrazione di come gli alimenti e le bevande dovrebbero essere pesati e registrati. I soggetti sono stati istruiti a mantenere le loro normali abitudini alimentari e modelli alimentari. Prima di inserire i dati nel programma di analisi dei nutrienti, lo stesso dietologo ha rivisto tutti i record dietetici completati e ha chiesto informazioni supplementari se necessario, e nell'analisi è stata utilizzata l'assunzione giornaliera media di energia dal record di 7 giorni. Per identificare i soggetti che hanno fornito dati nutrizionali di scarsa validità, è stato calcolato il cutoff di Goldberg utilizzando l'equazione descritta da Black (2000). I cardiofrequenzimetri (Polar RS400®, Stoccolma, Svezia) e i registri di allenamento sono stati utilizzati per valutare il dispendio energetico dell'esercizio. I soggetti sono stati istruiti a mantenere e seguire il loro normale regime di allenamento. Sono stati inoltre istruiti a descrivere ogni sessione nel modo più dettagliato possibile, per quanto riguarda il tipo, la durata e l'intensità dell'esercizio e a indossare il cardiofrequenzimetro durante tutte le sessioni di allenamento (tranne il nuoto) e durante il ciclismo (allenamento e trasporto ).

Il comportamento alimentare è stato valutato utilizzando l'Eating Disorder Inventory (EDI-3), un questionario che valuta il comportamento e gli atteggiamenti relativi al comportamento DE, nonché alla DE conclamata. I soggetti sono stati classificati come aventi comportamento DE quando il punteggio della sottoscala del rischio EDI per Drive for Thinness (DT) era ≥ 14 e/o un punteggio di rischio di insoddisfazione corporea (BD) ≥ 19 e senza la presenza di ED diagnosticata dal DSM-IV. L'Eating Disorder Examination (EDE-16) è stato utilizzato per determinare se i soggetti soddisfacevano i criteri per l'ED, secondo i criteri del DSM-IV per l'anoressia nervosa, la bulimia nervosa e l'ED non altrimenti specificata (EDNOS). Tutte le interviste sono state eseguite dallo stesso membro certificato EDE del gruppo di ricerca.

I soggetti sono stati trasportati in auto alla clinica la mattina del secondo giorno di test per ridurre al minimo l'attività fisica prima della misurazione. L'RMR è stato valutato tra le 7:00 e le 8:30, dopo un digiuno notturno, utilizzando un sistema a cappa aperta ventilata (Oxycon Pro 4, Jeager, Germania). Il sistema è stato calibrato automaticamente prima di ogni test, e sempre settimanalmente, mediante un test di combustione dell'alcool con coefficienti di variabilità (CV) dello 0,7% per O2, 1,1% per CO2, 0,8% per il rapporto di scambio respiratorio e 2% per EE. Dopo la minzione, i soggetti si sono sdraiati per 15 minuti prima delle misurazioni del consumo di ossigeno (VO2) e della produzione di anidride carbonica (VCO2) per 35 minuti (l'equazione è definita in Calcoli). L'efficienza lavorativa è stata valutata mediante un protocollo di prova standardizzato a digiuno, avviato dal soggetto seduto sul cicloergometro (Monark 939E, Monark Exercise AB, Vansbro, Sweden) per 6 min, seguito da 6 min in bicicletta a 0 W, 50 W e 100W, rispettivamente. Per misurare lo scambio di gas respiratorio è stata utilizzata una maschera a tenuta d'aria che copriva la bocca e il naso (le equazioni per i calcoli sono definite in Calcoli). Per calcolare l'EE totale giornaliero, sono stati utilizzati i monitor HR (Polar RS400®) per valutare l'EE durante il trasporto in bicicletta, mentre l'actigrafia (ActiGraph GT3X®, Pensacola, FL, USA) e il software di analisi dei dati ActiLife 5 (ActiGraph) sono stati utilizzati per valutazione del NEAT. I soggetti sono stati istruiti a indossare un accelerometro al polso durante il sonno e sul fianco dall'alzarsi la mattina fino all'ora di andare a letto, e solo a toglierlo durante la doccia, il nuoto, il trasporto in bicicletta e l'allenamento.

Due ore dopo una colazione standardizzata, è stato eseguito un test di esercizio incrementale sul cicloergometro, iniziato pedalando per 6 minuti a 50 W, seguito da un aumento del carico di lavoro di 12-14 W/min fino all'esaurimento. È stata utilizzata una maschera ermetica che copriva la bocca e il naso per misurare il VO2peak e il rapporto di scambio respiratorio ed è stata misurata la FC (Polar RS400®).

Ai soggetti che usavano contraccettivi ormonali è stato chiesto di interrompere per un minimo di 6 settimane prima dell'esame al fine di garantire un periodo di washout sufficiente per estrogeni esogeni e progesterone. I soggetti che non recuperavano il sanguinamento mestruale entro le 6 settimane sono stati contattati mensilmente dal gruppo di ricerca durante un periodo di follow-up di almeno 3 mesi prima della valutazione ginecologica. Le atlete mestruate sono state esaminate nella prima fase follicolare, dal terzo al quinto giorno delle mestruazioni. All'arrivo in ospedale è stato eseguito un test di gravidanza e la funzione mestruale è stata esaminata da un ginecologo esperto che ha eseguito un esame ecografico transvaginale (Ultrasound Scanner, Class 1 type B, B-K Medical REF TYPE 2202, Bedfordshire, UK). È stato contato il numero massimo di follicoli ovarici presenti in un singolo piano ed è stato valutato il volume totale. Stato degli ormoni sessuali [estrogeni, progesterone, LH, ormone follicolo-stimolante (FSH), globulina legante gli ormoni sessuali (SHBG), prolattina, deidroepiandrosterone solfato (DHEA-S), androstendion e testosterone totale] e valutazione anamnestica, ad es. età del menarca , precedenti irregolarità mestruali, uso di contraccettivi ormonali e numero di cicli mestruali durante l'ultimo anno, sono stati registrati utilizzando il questionario per le donne con basso EAin (LEAF-Q) (Melin et al., 2014). I soggetti sono stati quindi classificati con eumenorrea (cicli mestruali di 28 giorni ± 7 giorni e ormoni sessuali nella norma); oligomenorrea (cicli mestruali > 35 giorni in cui erano state escluse altre cause oltre alla soppressione ipotalamica); FHA (primaria: nessun menarca dopo i 15 anni di età, o secondaria: assenza di almeno tre cicli mestruali consecutivi in ​​cui erano state escluse altre cause oltre alla soppressione ipotalamica) (Nattiv et al., 2007); altri MD (difetti anatomici, iperprolattinemia o altre condizioni ovariche disfunzionali); PCOS che coinvolge almeno due dei seguenti: (a) ovaie ingrossate con un volume superiore a 10 mL e/o ≥ un ovaio che mostra ≥ 12 follicoli su un piano; (b) sanguinamento irregolare o assente; e (c) livelli di androgeni elevati, o altrimenti stigmatizzati da androgeni.

Il peso corporeo è stato misurato con una precisione di 0,01 kg in biancheria intima su una bilancia elettronica (Lindeltronic 8000, Samhall Lavi AB, Kristianstad, Svezia). L'altezza è stata misurata senza scarpe e in piedi con le gambe unite contro un muro, utilizzando uno stadiometro fisso (Hultafors AB, Hultafors, Svezia). Dopo aver riposato in posizione supina per 7 minuti, HR e BP sono stati misurati tre volte (è stata utilizzata la media) utilizzando uno sfigmomanometro elettronico (Microlife BP A100, Widnau, Svizzera). L'ipotensione è stata definita come pressione sistolica <90 mmHg e/o pressione diastolica <60 mmHg. L'assorbimetria a raggi X a doppia energia (DXA) (Hologic, Model Discovery 2009, Hologic Inc., Waltham, MA, USA) è stata utilizzata per determinare rispettivamente la massa magra, grassa e ossea. La BMD è stata determinata per tutto il corpo, colonna lombare (L1-L4) e anca. Tutte le misurazioni e le scansioni sono state eseguite a digiuno e a riposo tra le 7:30 e le 9:00, e sono state valutate dallo stesso tecnico ed eseguite sullo stesso scanner. La calibrazione dell'Hologic Discovery 2009 è stata eseguita settimanalmente, utilizzando un fantoccio fornito dal produttore. I soggetti sono stati classificati come aventi BMD normale: Z-score > -1 in tutti i siti misurati, BMD bassa: Z-score da -1 a -2 in almeno un sito e osteoporosi: Z-score < -2 in almeno un sito insieme ad almeno un fattore di rischio secondario come basso EA, ED e oligomenorrea/FHA.

I campioni di sangue sono stati prelevati dopo un digiuno notturno da una vena antecubitale il primo e il secondo giorno, tra le 8:30 e le 8:50, in uno stato di riposo.