Biomarcatori di stress ossidativo e infiammazione in pazienti trattati chirurgicamente con cancro laringeo

Selezione del paziente

Uno studio prospettico interventistico sperimentale includerebbe 100 pazienti con carcinoma squamocellulare della laringe trattati chirurgicamente nel periodo da ottobre 2022 a febbraio 2023 presso il centro di riferimento terziario. Questo studio è stato approvato dal Comitato Etico Istituzionale (745/5-22) e tutti i pazienti hanno firmato il modulo di consenso informato prima della loro inclusione nello studio. La diagnosi di carcinoma laringeo è stata confermata dall'esame clinico otorinolaringoiatrico ed esame laringomicroscopico della laringe con biopsia ed esame istopatologico del tessuto. Ulteriori diagnosi (radiografia del torace e tomografia computerizzata del collo ed ecografia dell'addome) sono state eseguite per determinare lo stadio TNM della malattia. Lo studio ha incluso pazienti con tutti gli stadi di carcinoma laringeo operabile (T1-T4, N0-N2), senza tumori maligni precedentemente trattati. I criteri di esclusione erano malattia maligna inoperabile, presenza di metastasi a distanza, tumori maligni trattati in precedenza, presenza di comorbidità neurologiche o altre gravi comorbidità che impediscono il trattamento chirurgico, presenza di comorbidità neurologiche o altre gravi comorbidità fisiche e metaboliche, abuso di sostanze e incapacità di fornire il consenso informato .

La modalità di cura per ogni paziente è stata decisa dal Collegio Oncologico istituzionale (composto da un radioterapista, chirurghi cervico-cervicali, un oncologo e un istopatologo). Il trattamento chirurgico a cielo aperto prevedeva la resezione del tumore (cordectomia, laringectomia parziale o totale) con o senza qualche forma di dissezione del collo in caso di linfoadenopatia cervicale. Sono state annotate le caratteristiche demografiche, cliniche e istopatologiche (età e sesso, consumo di tabacco, grado istopatologico del tumore, classificazione TNM e modalità di terapia).

Valutazione della qualità della vita

Il questionario Quality of Life in Head and Neck Cancer Patients (QLQ - H&N35) è stato utilizzato per valutare la qualità della vita in pazienti con carcinoma laringeo trattato chirurgicamente.

Valutazione del dolore

La scala analogica visiva (VAS) è stata utilizzata per la valutazione del dolore. I punteggi erano basati su misure auto-riportate della gravità del dolore che vengono registrate con un segno posto in un punto lungo una linea di 10 cm che rappresenta un continuum tra le due estremità della scala (0 cm all'estremità sinistra della la scala segna ''nessun dolore'' e 10 cm all'estremità destra della scala segna ''il peggior dolore'').

Il questionario Brief Pain Inventory, Diagnosing Neuropathic Pain 4 (DN4) e Pain Detect Questionnaire sono stati utilizzati per la valutazione della qualità del dolore postoperatorio

Analgesia postoperatoria

È stato monitorato il tipo e il consumo di analgesici utilizzati dopo l'intervento chirurgico. Gli analgesici sono stati utilizzati secondo la scala dell'OMS: (1) per il dolore da lieve a moderato, un non oppioide (acetaminofene o farmaco antinfiammatorio non steroideo, FANS) con o senza adiuvante; (2) per il dolore moderato o grave, un non oppioide con un oppioide per il dolore moderato e (3) un oppioide per il dolore da moderato a grave non combinato con un altro agente.

Misurazione dello Stress Ossidativo e dei Parametri Infiammatori

Il sangue è stato prelevato dai pazienti per l'analisi dei parametri dello stress ossidativo e dei parametri dell'infiammazione prima del trattamento operatorio e dopo il trattamento operatorio (1-2 giorni postoperatori e 9-10 giorni postoperatori). Le concentrazioni di interleuchina 1 (IL-1) e 6 (IL-6), glutatione perossidasi 1 (GPX1), superossido dismutasi 1 (SOD1) e malondialdeide (MDA) nel siero sono state determinate mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico rivestito (ELISA ), secondo le istruzioni del produttore (Elabscience, Wuhan, Cina). I kit ELISA per la determinazione delle concentrazioni di IL-1 e IL-6 erano basati sul principio Sandwich ELISA, con piastre pre-rivestite con un anticorpo specifico per le citochine umane. La densità ottica (OD) è stata misurata spettrofotometricamente a 450 nm, utilizzando un lettore di lastre Multiskan EX (Thermo Fisher Scientific, Vantaa, Finlandia). La concentrazione di analitisina dei campioni testati è stata calcolata confrontando la densità ottica dei campioni con la curva standard creata con il software GraphPad Prism 9.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA).

analisi statistica

I dati categorici sono stati descritti da numeri assoluti e relativi (in percentuale), mentre i dati numerici sono stati riportati come media aritmetica e deviazione standard o mediana e intervallo interquartile (IQR), a seconda della distribuzione dei dati. La normalità è stata valutata utilizzando metodi matematici (Shapiro-Willk, asimmetria e curtosi e coefficiente di variazione) e grafici (istogramma, box plot). Per la valutazione del cambiamento dell'intensità del dolore, dei parametri dello stress ossidativo e dei biomarcatori dell'infiammazione, è stato applicato il test di Friedman con il Wilcoxon Signed rank test come metodo di test post-hoc. Per analizzare l'associazione tra intensità del dolore (VAS), parametri dello stress ossidativo e biomarcatori dell'infiammazione è stato utilizzato il coefficiente di correlazione del rango di Spearman, poiché le variabili non avevano una distribuzione normale. Al fine di valutare tutti i possibili fattori che influenzano il livello di stress ossidativo espresso come livelli di SOD e MDA, è stata eseguita un'analisi di regressione lineare (metodo enter) riportando il coefficiente di regressione B, il livello di confidenza al 95% (IC) di B e il valore p. L'analisi univariata è stata eseguita per prima e tutti i fattori significativi sono stati combinati in modelli multivariati. Tutti i metodi statistici sono stati considerati significativi se il valore p era inferiore o uguale a 0,05. L'analisi è stata eseguita in IBM SPSS ver. 26.