Biomarkery oxidačního stresu a zánětu u chirurgicky léčených pacientů s rakovinou hrtanu

Výběr pacienta

Experimentální intervenční prospektivní studie by zahrnovala 100 pacientů se skvamocelulárním karcinomem hrtanu chirurgicky léčených v období od října 2022 do února 2023 v terciárním referenčním centru. Tato studie byla schválena Institucionálním etickým výborem (745/5-22) a všichni pacienti podepsali formulář informovaného souhlasu před svým zařazením do studie. Diagnóza karcinomu hrtanu byla potvrzena otorinolaryngologickým klinickým vyšetřením a laryngomikroskopickým vyšetřením hrtanu s biopsií a histopatologickým vyšetřením tkáně. Ke stanovení TNM stadia onemocnění byla provedena další diagnostika (rtg hrudníku a počítačová tomografie krku a ultrasonografie břicha). Do studie byli zařazeni pacienti se všemi stádii operabilního karcinomu hrtanu (T1-T4, N0-N2), bez předchozích léčených malignit. Kritéria pro vyloučení byla inoperabilní maligní onemocnění, přítomnost vzdálených metastáz, dříve léčené malignity, přítomnost neurologických nebo jiných závažných komorbidit, které brání chirurgické léčbě, přítomnost neurologických nebo jiných závažných fyzických a metabolických komorbidit, zneužívání návykových látek a neschopnost poskytnout informovaný souhlas. .

O způsobu léčby každého pacienta rozhodovala ústavní onkologická rada (složená z radioterapeuta, chirurgů hlavy a krku, onkologa a histopatologa). Otevřená chirurgická léčba zahrnovala resekci tumoru (kordektomie, parciální nebo totální laryngektomie) s nebo bez nějaké formy krční disekce v případě cervikální lymfadenopatie. Byly zaznamenány demografické, klinické a histopatologické charakteristiky (věk a pohlaví, užívání tabáku, histopatologický stupeň nádoru, TNM klasifikace a modalita terapie).

Hodnocení kvality života

Dotazník Kvalita života u pacientů s rakovinou hlavy a krku (QLQ - H&N35) byl použit k posouzení kvality života u pacientů s chirurgicky léčeným karcinomem hrtanu.

Hodnocení bolesti

Pro hodnocení bolesti byla použita vizuální analogová stupnice (VAS). Skóre vycházelo z měření intenzity bolesti, kterou sami uvedli a které jsou zaznamenány značkou umístěnou v jednom bodě po délce 10 cm čáry, která představuje kontinuum mezi dvěma konci stupnice (0 cm na levém konci značky na stupnici ''žádná bolest'' a 10 cm na pravém konci stupnice značí ''nejhorší bolest'').

Pro hodnocení kvality pooperační bolesti byly použity dotazník Brief Pain Inventory, Diagnosing Neuropathic Pain 4 (DN4) a Pain Detect Questionnaire

Pooperační analgezie

Byl sledován druh a spotřeba analgetik užívaných po operaci. Analgetika byla použita podle žebříčku WHO: (1) pro mírnou až střední bolest, neopioid (acetaminofen nebo nesteroidní protizánětlivé léčivo, NSAID) s nebo bez adjuvans; (2) pro středně silnou nebo silnou bolest, neopioid s opioidem pro středně silnou bolest a (3) opioid pro středně silnou až silnou bolest nekombinovaný s jinou látkou.

Měření oxidačního stresu a zánětlivých parametrů

Pacientům byla odebrána krev na analýzu parametrů oxidačního stresu a parametrů zánětu před operačním ošetřením a po operaci (1-2 pooperační den a 9-10 pooperační den). Koncentrace interleukinu 1 (IL-1) a 6 (IL-6), glutathionperoxidázy 1 (GPX1), superoxiddismutázy 1 (SOD1) a malondialdehydu (MDA) v séru byly stanoveny metodou ELISA (coated enzyme-linked immunosorbent assay). ) soupravy podle pokynů výrobce (Elabscience, Wuhan, Čína). Soupravy ELISA pro stanovení koncentrací IL-1 a IL-6 byly založeny na principu Sandwich ELISA s destičkami předem potaženými protilátkou specifickou pro lidské cytokiny. Optická hustota (OD) byla měřena spektrofotometricky při 450 nm za použití čtečky destiček Multiskan EX (Thermo Fisher Scientific, Vantaa, Finsko). Koncentrace analytesinu testovaných vzorků byla vypočtena porovnáním OD vzorků se standardní křivkou vytvořenou softwarem GraphPad Prism 9.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA).

Statistická analýza

Kategorická data byla popsána absolutními a relativními čísly (v procentech), zatímco numerická data byla uváděna jako aritmetický průměr a směrodatná odchylka nebo medián a interkvartilní rozmezí (IQR), v závislosti na distribuci dat. Normalita byla hodnocena pomocí matematických (Shapiro-Willk, šikmost a špičatost a variační koeficient) a grafických (histogram, krabicový graf) metod. Pro hodnocení změny intenzity bolesti, parametrů oxidačního stresu a biomarkerů zánětu byl použit Friedmanův test s Wilcoxonovým signovaným rank testem jako post-hoc testovací metodou. Pro analýzu asociace mezi intenzitou bolesti (VAS), parametry oxidačního stresu a biomarkery zánětu byl použit Spearmanův koeficient pořadové korelace, protože proměnné neměly normální distribuci. Aby bylo možné vyhodnotit všechny možné faktory, které ovlivňují úroveň oxidačního stresu vyjádřenou jako úrovně SOD a MDA, byla provedena lineární regresní analýza (metoda enter) s regresním koeficientem B, 95% hladinou spolehlivosti (CI) B a hodnotou p. Nejprve byla provedena jednorozměrná analýza a všechny významné faktory byly kombinovány ve vícerozměrných modelech. Všechny statistické metody byly považovány za významné, pokud hodnota p byla menší nebo rovna 0,05. Analýza byla provedena v IBM SPSS ver. 26.