ウマの異種移植片とコラーゲン化されたブタの皮質板を使用した水平尾根増強

この研究で使用された異種移植片は、OsteoBiol の Gen-Os® でした。使用される軟質ラミナ (OsteoBiol®) は、豚由来の 35x35mm の中型湾曲膜です。

使用した固定システムは、1.5 mm x 3.0 mm のセルフドリリング メンブレン固定ネジで構成される Pro-fix™ Precision Fixation System でした。

27 歳から 64 歳までの 15 人の患者 (男性 1 人、女性 14 人) が、ベイルートのセント ジョセフ大学歯学部の歯周病学科から選ばれました。

あらゆる処置の前に、臨床検査および放射線検査が行われました。 無歯顎領域を検査して、角化粘膜の利用可能性と、近遠心面およびアーチ間平面でのインプラント配置の可能性を特定しました。 X 線検査は、患部のコーン ビーム コンピューター断層撮影 (CBCT) スキャンを使用して完了し、垂直増強の適応が選択され、研究から除外されました。 すべての患者は、口腔衛生の指導と予防を受けました。

各患者は、手術の 1 時間前に 2g のアモキシシリンを投与されました。 患者は、クロルヘキシジン 0.12% グルコン酸洗口液で 1 分間洗口するように指示されました。 局所クロルヘキシジンを使用して口腔外消毒を行った。

Septanest® (アドレナリン 1:100,000 を含む Articaine 塩酸塩 4%) を使用して、局所および/または局所麻酔を行いました。 粘膜歯肉接合部を越えて延びる少なくとも 1 つの垂直リリース切開が行われました。 全層の粘膜骨膜弁が隆起し、頬側に伸びたのに対し、口蓋側では反射して 3 mm の骨が露出しました。 舌側では、舌骨筋線に到達するまで皮弁を持ち上げました。 移植片の良好な灌流を確実にするために、長さ3mmのストップを備えたツイストドリルを使用して剥皮を行った。

柔らかい皮質板は、良好な弾力性とより簡単な操作を達成するために、手術の開始以来生理食塩水に浸されていました。 次に、滅菌ハサミでトリミングし、周囲の歯と接触していないことを確認しながら、レシピエント部位に適合させました. 最初に口蓋/舌側に固定されました。 前もって滅菌生理食塩水で 10 分間水和した皮質海綿骨異種骨混合物を十分な量で尾根に置き、将来の尾根の望ましい形状に適合させながら膜で覆いました。 メンブレンをリクライニングし、頬側にも固定して、適応性と固定性を向上させました。 緊張のない閉鎖を確実にするために、垂直切開を接続する骨膜解放切開を使用して頬側フラップを前進させ、フラップの弾力性を達成した。 精神神経が存在する場合は、周囲の組織から精神神経を特定し、慎重に分離するために注意が払われました。 鈍器を使用して舌片を前進させ、舌骨からミロ舌骨の筋肉の挿入を取り外した。

適切な弾力性が得られたら、非吸収性ポリテトラフルオロエチレン (PTFE) 4/0 モノフィラメント縫合糸を使用して、切開線から 4 mm の位置に水平マットレス縫合糸を配置しました。

その後、結合組織と結合組織の接触を作成するために、フラップの端に近い単一の中断された縫合糸が続き、膜露出の発生率を減らすためのバリアが作成されました。

すべての患者は、手術直後にジプロピオン酸ベタメタゾンとリン酸二ナトリウムの注射を受けるように指示され、合計 7 日間、1 日あたり 2g のアモキシシリンを投与されました。

術後の推奨事項は明確に書かれ、患者に渡されました。 クロルヘキシジンは、手術後 2 日目から抜糸まで処方されました。

縫合糸は14日目に除去され、治癒を確保するために必要であることが判明した場合、さらに7日間放置されました.

手術から 6 か月後、移植部位の CBCT スキャンを行い、インプラントの直径と長さを選択するための措置を講じました。 術後 CBCT のすべてで、インプラントの留置が可能であると思われました。

インプラント埋入当日、局所麻酔を行い、続いて歯槽頂中央を切開し、場合によっては垂直切開を行い、固定ネジを取り外して固定ネジにアクセスできるようにしました。

外径3.5mm、内径2.5mmのトレフィンバーを用いてインプラント埋入部位の生検を行った。 トレフィンと骨を 10% 緩衝ホルムアルデヒドに浸し、組織学のために固定しました。 インプラント (Straumann®、Bone Level Cylindrical) を生検の対応する部位に配置し、臨床状況とインプラントの一次安定性に応じて、カバーまたはヒーリング スクリューを選択しました。

インプラント挿入トルクは、インプラント トルク レンチに記載されているとおりに記録されました。 根尖周囲の X 線写真を撮影し、皮弁を縫合し、患者に毎日 2g のアモキシシリンを 7 日間投与し、疼痛管理のためにジクロフェナク カリウムの炎症を抑えました。 彼らはまた、クロルヘキシジン0.12％で10日間洗口するように通知されました.

放射線プロトコル

画像取得:

診察時および再生処置の 6 か月後に、患者は Newton VGI CBCT 装置でスキャンされました。 撮影条件は次のとおりです。110 kV の管電圧。 2.2 ～ 8.30 ミリアンペア (mA) の管電流。 15 x 15 cm の視野。および 0.3 mm ボクセル サイズ。 投影データは、患者の周りを 360 度回転するデバイスを使用して、合計取得時間 18 秒で収集されました。

画像の評価:

スキャン データは DICOM (Digital Imaging and Communications in Medicine) 形式で保存され、画像解析と測定は Blue Sky Plan® (Blue Sky Bio, LLC, Grayslake, IL, USA) を使用して実行されました。 0.3 mm スライスの多平面再構成。 軸方向の画像は、存在する場合は咬合面に、または水平基準として口蓋面に再配置されました。 パノラマ曲線が作成され、その曲線に垂直な断面画像が 1 mm 間隔で再構成されました。

高度な顎セグメンテーション:

スキャンごとに、Blue Sky Plan ソフトウェアを使用して、しきい値セグメンテーションと輪郭補間によって高度な顎セグメンテーション技術を実現しました。 最初に、関心領域 (対応する顎) がパノラマ ビューで選択されました。 第二に、ソフトウェアによって均等に分散/選択されたいくつかの軸方向、冠状および断面スライスを使用して、骨の輪郭を描きました。 これにより、ソフトウェアによる最終的な自動セグメンテーション ステップまでのマトリックスが作成され、セグメンテーション データが完成し、顎の 3D モデルが作成されました。 最後に、3D モデルの輪郭がチェックされ、輪郭が過剰または不足している場合に備えて、すべての平面の 2D スライスで手動で調整されました。 その結果、対応する顎の正確な 3D モデルが作成されました。

仮想インプラント埋入と顎の重ね合わせ:

術後の CBCT 計画では、バーチャル インプラントは、存在する場合、骨および補綴基準に関して最適な位置に配置されました。

術前と術後のモデルを直接比較するために、術前の骨モデルを術後計画にロードし、2 つのモデルの重ね合わせに n 点登録技術を使用しました。 各モデルの輪郭は、比較のために独特の色で表示されました。

パノラマ曲線に垂直で、シミュレートされたインプラントの長軸に平行な前庭 - 舌側インプラントの中心セクションを使用して、次のようにすべての測定を行いました。

水平骨幅測定

各インプラント部位について、術前および術後の水平方向の骨幅を 4 つのレベルで測定しました。 骨幅は、シミュレートされたインプラント プラットフォームと平行にしながら、各レベルで最も頬側の骨と最も舌側の骨の点の間の距離から計算されました。

• H0-T1 および H0-T2: インプラント プラットフォーム レベルでの術前および術後の水平骨幅。
• H2-T1 および H2-T2: 術前および術後の水平骨幅 2mm で先端からインプラント プラットフォームまで。
• H4-T1 および H4-T2: 術前および術後の水平方向の骨幅 4mm で、先端からインプラント プラットフォームまで。

垂直方向の骨の増減の測定

各インプラント部位について、術前および術後の垂直方向の骨増加を 3 つのレベルで測定しました。 垂直方向の骨の増減は、最も冠状の手術前の骨点間の距離から計算されました。

組織学

固定と包含:

サンプルは再生後 6 か月で採取され、脱塩されていない組織学で処理されました。 それらは、ｐＨ７．４の緩衝リン酸ナトリウムで１０％に希釈されたＬＩＬＬＩＥ中性ホルマリンで固定された。 固定期間は 3 週間でした。 次いで、サンプルを流水で４８時間すすいだ。

サンプルの脱水は、濃度を上げたアルコール浴で 48 時間行い、その後、それぞれ 24 時間のキシレン浴で 2 回連続してメタクリレートを浸透させて清澄化を行いました。

切断技術:

ブロックは、少なくとも８０μｍの切断ができるように、Ｅｘａｃｔ鋸（切断機ＥＸＡＣＴ－ＡＰＰＡＲＡＴＥＢＡＵ Ｎｏｒｄｅｒｓｔｅｄ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、潅注しながら低速で切断した。 これらのカットは、その後、Exact 研磨システムを使用して厚さを減らしました。 研磨は、カットの厚さを自動的に所望の値まで減少させることを可能にする、粒度が減少する研磨紙ディスクを用いて行った。 カットは、S (表面)、M (正中)、および P (深い) カットに分けられ、表面のものは骨膜に面するカットです。

染色：

切片は、ギムザパラゴンおよび塩基性フクシンで染色されました。 Giemsa は細胞と核を青色に、Paragon は骨を赤色に染色します。

組織形態計測:

切片の定性的観察は、デジタル顕微鏡 (Keyence デジタル顕微鏡 VHX-6000) の下で、通常の光と偏光による視覚化で行われました。 組織学的定量化のために、ソフトウェアImage J / Fijiとともに、デジタルカメラ（Olympus E330）に接続された光学顕微鏡（Olympus BX 60、Olympus Corporation、東京、日本）が使用されました。

最初に、画像に存在するスケール バーを測定することによって調整されました。 画像は白黒（タイプ：8ビット）にしました。 スケールは、スケールバーの長さをピクセル単位で測定し、既知の距離をミリメートル単位で設定することによって設定されました。 次に、同じスケールのすべての画像に対して「グローバル」として設定されました。

当該区間の総面積を測定した。 次に、Bone Volume Mask を使用し、「ワンド ツール」を使用してすべての黒い領域を選択することにより、骨と類骨の体積を定量化しました。 その結果、各切片の骨および類骨マトリックスの割合が計算されました。

統計分析：

データの統計分析のために、社会科学用の統計パッケージ ソフトウェア (SPSS for Windows、米国イリノイ州シカゴ、バージョン 25.0) を実行しました。 アルファ エラーは -p-value<0.05 に設定されました。 カテゴリ変数を説明するために、頻度とパーセンテージが使用されました。 連続変数には平均値と標準偏差を使用しました。

• グループ内の平均骨レベルを比較するために、被験者内の 2 つの因子 (時間: ベースラインと 6 か月、距離: 0mm、2mm、4mm、および 6 mm) を使用した反復測定分散分析を実行しました。 その後、単変量解析とボンフェローニ事後検定が行われました。
• 1 つの被験者内因子 (距離: 0mm、2mm、4mm、および 6 mm) を使用した反復測定分散分析と、それに続くボンフェローニ事後検定を使用して、平均水平ゲインを比較しました。
• 1 つの被験者内要因 (レベル: 頬側、中央値、舌側) を使用した反復測定分散分析と、それに続くボンフェローニ事後検定を実行して、平均垂直ゲインを比較しました。
• 1 つのサンプル t 検定を使用して、平均垂直ゲインを、ゲインがないと仮定した理論値「0」と比較しました。
• スチューデント t 検定を実行して、2 つのグループ間の連続変数を比較しました。
• ピアソン相関係数を計算して、連続変数間の関係を評価しました。
• Kruskal-Wallis 検定を使用して、異なるレベル間で組織形態計測測定値を比較しました。