蚊に刺されたときの体液性免疫反応の特徴付け (SG6)
ヒトチャレンジモデルを用いたマラリアおよびデング熱の東南アジア蚊ベクターの唾液抗原に対する体液性免疫応答の特徴付け
蚊の唾液抗原に対する体液性反応の特徴は正確にはわかっていません。 これは、疫学試験の結果として、および介入の運用展開の指標として免疫学的マーカーを使用するための主要な制限です。 いくつかのハマダラカおよびネッタイシマカのベクター種のゲノムのアセンブリにおける最近の進歩は、オルソロガス唾液腺タンパク質の配列および B 細胞予測アルゴリズムを使用して、インシリコでの新しい候補ペプチドの同定を容易にしました。 この研究の目的は、An.ミニマス、アン。 maculatusとAn。 ディラス、Ae。 aegypti と Ae。 アルボピクタス。
この研究は、東南アジアにおけるマラリアおよびデング熱媒介蚊へのヒト曝露の免疫学的マーカーを特定および検証するための重要な情報を提供します。 免疫学的マーカーは、伝染力学を理解し、監視システムの一部として伝染のリスクを予測し、昆虫学的試験または地域での介入の運用展開中のベクター制御介入の有効性を評価するのに役立ちます。
調査の概要
詳細な説明
この研究は、Anopheles minimus、An の感染していない実験室適応コロニーの咬傷への制御された暴露に対応する 5 つの腕を持つ人間の攻撃モデルです。マクラトゥス、アン。ディラス、ヤブカ属。 aegypti または Ae。 アルボピクタス。 スクリーニングと適格性評価の後、150 人の参加者が、蚊の種と刺された回数 (合計 35 または 305 刺され) で層別化されたブロック無作為化デザインを使用して研究に登録されます。勉強の様子。 参加者は112日間研究に参加します。 ベースラインは、2 週間にわたる 2 回の訪問 (0 日目と 7 日目) で構成されます。
低暴露グループでは、参加者は 14 日目から 56 日目まで毎週 5 回の蚊に刺されます (6 週間にわたって 5 回の蚊に刺された 7 回の課題/チャレンジで、合計 35 回の蚊に刺されました)。 高曝露群では、参加者は 14 日目に 5 回蚊に刺され、その後 21 日目から 56 日目まで毎週 50 回蚊に刺されます (5 回の蚊に刺された 1 つの課題と 50 回の蚊に刺された 6 つの課題/チャレンジオーバー)。 6 週間、合計 305 の蚊に刺されました)。
この研究で使用された咬傷の数とフォローアップのモダリティは、この分野で実施された以前の昆虫学的調査、蚊に刺された人間の挑戦に関する発表された報告、および唾液抗原に対する体液性反応の特徴に関する現在の知識に基づいて選択されました。 14 日目と 21 日目のチャレンジの後に即時および遅発性の両方の皮膚反応が記録され、15 日目と 22 日目に追加の訪問が必要になります。 蚊に刺されて過敏症の参加者は研究から除外されます。 毛細血管および静脈血サンプルの両方が、各研究参加者から毎週収集されます。 スクリーニング訪問中に採取された 2 mL の 1 つのサンプル、訪問 2、3、6、8、9、10、11、12、14、15、16、17、18 の間に 8.6 mL の 14 サンプルを含む 18 の静脈血サンプルが収集されます。および 19、および訪問 4、13、および 20 中の 18.6 mL の 3 つのサンプル (合計参加者あたりの静脈血 178.2 mL)。 2、3、4、6、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18 の訪問中に収集された 300 μL の毛細血管血から、17 の乾燥血液スポット (DBS) サンプルが作成されます。 、19 および 20 (参加者あたり合計 5.1 mL の毛細血管血)。
候補ペプチドは、公開されているゲノム配列と B 細胞エピトープ予測アルゴリズムを使用して in silico で特定されます。 候補バイオマーカーに対する抗体力価の動態は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）と、血清およびDBS標本を用いたメソスケールスクリーニングによって評価されます。 簡単に言えば、アッセイの陽性閾値は、前述のように、蚊に刺されていない個人からの参照血清標本を使用して決定されます。 暴露されていない個人から得られた 60 の参照血清 (タイ赤十字から得られた 30 のタイの血清およびバーネット研究所から得られた 30 のオーストラリアの血清) で測定された ELISA シグナルは、アッセイの陽性閾値を定義するために使用されます。 アッセイの陽性閾値は、非曝露対照集団について測定された平均光学濃度（ΔOD）を超える 3 標準偏差（SD）として定義されます。 このカットオフを超える ΔOD を持つ研究集団でのテストは、陽性 (つまり、免疫応答) と見なされます。 研究サンプルの特異的抗体力価は、連続希釈実験を行うことによって決定されます。 研究サンプルから連続希釈を行い、各希釈についてΔODを決定する。 抗体価は、陽性シグナルを与える最高希釈として定義されます。 DBS と血清標本で得られた結果は、DBS サンプルを使用して疫学的研究中に蚊に刺された場合の曝露を監視することの実現可能性を評価するために比較されます。 4回目（ベースライン）、13回目（暴露終了直後）、20回目（暴露後）に採取された血清検体は、免疫プロテオミクスアプローチ（唾液腺タンパク質抽出物の2Dゲル電気泳動、ウェスタンブロットおよび質量分析）でも分析されます。 ) 蚊の唾液腺プロテオームの抗原特性に関する追加情報が得られます。
予定サンプルサイズ: 150 人の参加者を 16 週間フォローアップ
参加者の識別:
研究参加者は、18歳から60歳までの健康な参加者と定義され、研究に参加する意思があります。 この研究は、メーソットの Shoklo マラリア研究ユニット (SMRU) 研究センターで行われます。
研究の種類
入学 (実際)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究場所
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Changwat Tak
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Mae Sot、Changwat Tak、タイ、63110
- Shoklo Malaria Research Unit (SMRU)
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
説明
包含基準:
- -責任ある医師によって判断された健康な男性または女性の参加者で、医学的評価で異常が確認されていない;
- タイ人、ビルマ人、またはカレン族。
- 18 歳以上 60 歳未満。
- メーソート市に過去 12 か月間居住している。
- -活動に参加する意思があり、研究に参加するためのインフォームドコンセントを与えることができる;
- 蚊の直接暴露に耐えることができます。
除外基準:
- -過去12か月間のマラリア流行地（農村部）への旅行歴、または研究中にそうする予定;
- 責任ある医師によって結果測定を妨げると見なされた投薬または状態;
- 中等度および重度の貧血 (ヘモグロビン濃度が 110 g/L 血液未満);
- 蚊に刺されたときの過敏症またはアナフィラキシー;
- 妊娠中の女性
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：基礎科学
- 割り当て：ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：アン。ミニマス
このアームは 2 つのグループに分けられます。低露出グループと高露出グループ。 低暴露グループでは、参加者は 14 日目から 56 日目まで毎週 5 回の蚊に刺されます (6 週間にわたって 5 回の蚊に刺された 7 つの課題/チャレンジで、合計 35 回の蚊に刺されました)。 高曝露群では、参加者は 14 日目に 5 回蚊に刺され、その後 21 日目から 56 日目まで毎週 50 回蚊に刺されます (5 回の蚊に刺された 1 つの課題と 50 回の蚊に刺された 6 つの課題/チャレンジオーバー)。 6 週間、合計 305 の蚊に刺されました)。 |
参加者は蚊に刺されます。 低用量チャレンジでは、生後 5 ～ 7 日の未経産雌成虫 (つまり、これまで一度も血液を与えられたことがない) 5 匹を、ネット素材で覆われた 50 mL プラスチックチューブに個別に導入します。 高用量チャレンジでは、47 匹の蚊を網素材で覆われた直径 10 cm の 4 つのプラスチック カップ (12 匹の蚊で 3 カップ、11 匹の蚊で 1 カップ) に分割し、3 匹の蚊を 50 mL のプラスチック チューブに個別に導入します。 . 参加者の腕に投与される蚊に刺されて、即時および遅延の皮膚反応を評価します。 即時および遅延皮膚反応は、14日目および21日目のチャレンジからそれぞれ20〜30分および24〜36時間後に記録され、15日目および22日目に追加の訪問が必要になります。 |
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実験的：アン。黄斑
同上
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参加者は蚊に刺されます。 低用量チャレンジでは、生後 5 ～ 7 日の未経産雌成虫 (つまり、これまで一度も血液を与えられたことがない) 5 匹を、ネット素材で覆われた 50 mL プラスチックチューブに個別に導入します。 高用量チャレンジでは、47 匹の蚊を網素材で覆われた直径 10 cm の 4 つのプラスチック カップ (12 匹の蚊で 3 カップ、11 匹の蚊で 1 カップ) に分割し、3 匹の蚊を 50 mL のプラスチック チューブに個別に導入します。 . 参加者の腕に投与される蚊に刺されて、即時および遅延の皮膚反応を評価します。 即時および遅延皮膚反応は、14日目および21日目のチャレンジからそれぞれ20〜30分および24〜36時間後に記録され、15日目および22日目に追加の訪問が必要になります。 |
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実験的：アン。ディルス
同上
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参加者は蚊に刺されます。 低用量チャレンジでは、生後 5 ～ 7 日の未経産雌成虫 (つまり、これまで一度も血液を与えられたことがない) 5 匹を、ネット素材で覆われた 50 mL プラスチックチューブに個別に導入します。 高用量チャレンジでは、47 匹の蚊を網素材で覆われた直径 10 cm の 4 つのプラスチック カップ (12 匹の蚊で 3 カップ、11 匹の蚊で 1 カップ) に分割し、3 匹の蚊を 50 mL のプラスチック チューブに個別に導入します。 . 参加者の腕に投与される蚊に刺されて、即時および遅延の皮膚反応を評価します。 即時および遅延皮膚反応は、14日目および21日目のチャレンジからそれぞれ20〜30分および24〜36時間後に記録され、15日目および22日目に追加の訪問が必要になります。 |
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実験的：あえ。ネッタイシマカ
同上
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参加者は蚊に刺されます。 低用量チャレンジでは、生後 5 ～ 7 日の未経産雌成虫 (つまり、これまで一度も血液を与えられたことがない) 5 匹を、ネット素材で覆われた 50 mL プラスチックチューブに個別に導入します。 高用量チャレンジでは、47 匹の蚊を網素材で覆われた直径 10 cm の 4 つのプラスチック カップ (12 匹の蚊で 3 カップ、11 匹の蚊で 1 カップ) に分割し、3 匹の蚊を 50 mL のプラスチック チューブに個別に導入します。 . 参加者の腕に投与される蚊に刺されて、即時および遅延の皮膚反応を評価します。 即時および遅延皮膚反応は、14日目および21日目のチャレンジからそれぞれ20〜30分および24〜36時間後に記録され、15日目および22日目に追加の訪問が必要になります。 |
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実験的：あえ。アルボピクタス
同上
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参加者は蚊に刺されます。 低用量チャレンジでは、生後 5 ～ 7 日の未経産雌成虫 (つまり、これまで一度も血液を与えられたことがない) 5 匹を、ネット素材で覆われた 50 mL プラスチックチューブに個別に導入します。 高用量チャレンジでは、47 匹の蚊を網素材で覆われた直径 10 cm の 4 つのプラスチック カップ (12 匹の蚊で 3 カップ、11 匹の蚊で 1 カップ) に分割し、3 匹の蚊を 50 mL のプラスチック チューブに個別に導入します。 . 参加者の腕に投与される蚊に刺されて、即時および遅延の皮膚反応を評価します。 即時および遅延皮膚反応は、14日目および21日目のチャレンジからそれぞれ20〜30分および24〜36時間後に記録され、15日目および22日目に追加の訪問が必要になります。 |
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
時間枠 |
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ELISAおよびメソスケールスクリーニングによって決定された、実験室で飼育された蚊刺されへの反復暴露前および暴露中の候補ペプチドに対する特異的抗体価のレベル。
時間枠：112日目までのベースライン
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112日目までのベースライン
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ELISAおよびメソスケールスクリーニングによって決定された、実験室で飼育された蚊刺されへの反復暴露前および暴露中の候補ペプチドに対する特異的抗体価の動態。
時間枠：112日目までのベースライン
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112日目までのベースライン
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免疫プロテオミクス法 (唾液腺タンパク質抽出物の 2D ゲル電気泳動、ウエスタンブロットおよび質量分析法) で決定された唾液抗原の配列。
時間枠：14日目から112日目
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14日目から112日目
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二次結果の測定
結果測定 |
時間枠 |
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異なる暴露レベルに対応するサブグループで決定された抗体価の比較。
時間枠：0、7 日目 (ベースライン)、14、21、28、35、42、49、56 (暴露期間)、63、70、77、84、91、98、105、112 (暴露後期間)。
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0、7 日目 (ベースライン)、14、21、28、35、42、49、56 (暴露期間)、63、70、77、84、91、98、105、112 (暴露後期間)。
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DBS および静脈血サンプルで決定された抗体価の比較。
時間枠：0、7 日目 (ベースライン)、14、21、28、35、42、49、56 (暴露期間)、63、70、77、84、91、98、105、112 (暴露後期間)。
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0、7 日目 (ベースライン)、14、21、28、35、42、49、56 (暴露期間)、63、70、77、84、91、98、105、112 (暴露後期間)。
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協力者と研究者
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協力者
捜査官
- 主任研究者：François Nosten、Shoklo Malaria Research Unit
出版物と役立つリンク
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
追加の関連 MeSH 用語
その他の研究ID番号
- MAL19009
個々の参加者データ (IPD) の計画
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医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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蚊に刺されるの臨床試験
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The University of Texas Health Science Center,...Vitamix Foundation; University of Texas at Austin; Brighter Bites; Penn State Better Kid Care完了
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Cornell UniversityLaidlaw Foundation; Epperson Fund; Beck Fellowship; Dan Cane Fund完了多嚢胞性卵巣症候群 | 卵巣嚢腫 | PCOS | 月経困難症 | 生理痛 | 月経前不快気分障害 | 月経前症候群 | 生理痛 | 月経の問題 | PMS | 生理不順 | 月経困難症プライマリ | 痙攣 | 月経周期異常 | 両側卵巣のPCOS（多嚢胞性卵巣症候群） | 周期の問題 | 左卵巣のPCOS（多嚢胞性卵巣症候群） | 右卵巣のPCOS（多嚢胞性卵巣症候群）アメリカ