Luonnehditaan humoraalista immuunivastetta hyttysen puremiin (SG6)
Humoraalisen immuunivasteen karakterisoiminen Kaakkois-Aasian malaria- ja dengue-hyttysvektorien sylkiantigeenejä vastaan ihmisen haastemallilla
Hyttysen syljen antigeenejä vastaan suunnatun humoraalisen vasteen ominaisuuksia ei tunneta tarkasti. Tämä on suuri rajoitus immunologisten merkkiaineiden käytölle epidemiologisten tutkimusten tuloksena ja indikaattorina interventioiden operatiivisessa käyttöönotossa. Viimeaikaiset edistysaskeleet joidenkin Anopheles- ja Aedes-hyttysvektorilajien genomin kokoamisessa ovat helpottaneet uusien ehdokaspeptidien tunnistamista in silico, käyttämällä ortologisten sylkirauhasproteiinien sekvenssejä ja B-solujen ennustusalgoritmeja. Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida humoraalista immuunivastetta, joka on suunnattu ehdokaspeptidejä vastaan sen jälkeen, kun An. minimi, An. maculatus ja An. dirus, Ae. aegypti ja Ae. albopictus.
Tämä tutkimus tarjoaa olennaista tietoa ihmisen malaria- ja dengue-hyttysvektoreille altistumisen immunologisten merkkiaineiden tunnistamiseksi ja validoimiseksi Kaakkois-Aasiassa. Immunologiset markkerit olisivat hyödyllisiä, jotta voidaan ymmärtää tartuntadynamiikkaa ja ennustaa tartuntariskiä osana valvontajärjestelmää sekä arvioida vektorintorjuntatoimenpiteiden tehokkuutta entomologisissa kokeissa tai interventioiden operatiivisen käyttöönoton aikana alueella.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Tämä tutkimus on ihmisen altistusmalli, jossa on viisi käsivartta, jotka vastaavat hallittua altistumista Anopheles minimus, An:n infektoitumattomien laboratorioon mukautuneiden pesäkkeiden puremille. maculatus, An. dirus, Aedes. aegypti tai Ae. albopictus. Seulonnan ja kelpoisuusarvioinnin jälkeen tutkimukseen otetaan mukaan 150 osallistujaa käyttämällä lohkosatunnaistettua mallia, joka on kerrostettu hyttyslajin ja puremien lukumäärän mukaan (yhteensä 35 tai 305 puremaa) siten, että se muodostaa 10 15 yksilön ryhmää kussakin opiskelutilanne. Osallistujat ovat tutkimuksessa 112 päivää. Perustaso koostuu kahdesta käynnistä 2 viikon aikana (päivä 0 ja päivä 7).
Vähäaltistuneissa ryhmissä osallistujat altistetaan viidelle hyttysen puremalle viikoittain päivästä 14 päivään 56 (seitsemän haastetta 5 hyttysen puremalla/haaste kuuden viikon aikana, jolloin saadaan yhteensä 35 hyttysen puremaa). Korkean altistuksen ryhmässä osallistujat altistetaan 5 hyttysen puremalle päivänä 14 ja sitten 50 hyttysen puremalle viikoittain päivästä 21 päivään 56 (yksi haaste 5 hyttysen puremalla ja kuusi haastetta, joissa 50 hyttysen puremaa / haaste yli 6 viikkoa, mikä tuotti yhteensä 305 hyttysen pistoa).
Tässä tutkimuksessa käytettyjen puremien lukumäärä ja seurantamenetelmät valittiin aiempien tällä alueella suoritettujen entomologisten tutkimusten, julkaistujen raporttien perusteella, jotka koskevat ihmisen altistusta hyttysten puremille, ja nykyisen tiedon perusteella humoraalisen vasteen ominaisuuksista sylkiantigeeneja vastaan. Sekä välittömät että viivästyneet ihoreaktiot kirjataan 14. ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. Osallistujat, jotka ovat yliherkkiä hyttysten puremille, suljetaan pois tutkimuksesta. Sekä kapillaari- että laskimoverinäytteet otetaan viikoittain jokaiselta tutkimukseen osallistujalta. Otetaan 18 laskimoverinäytettä, joista yksi 2 ml:n näyte otetaan seulontakäynnin aikana, 14 8,6 ml:n näytettä käyntien 2, 3, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18 aikana. ja 19 ja 3 näytettä 18,6 ml käyntien 4, 13 ja 20 aikana (yhteensä 178,2 ml laskimoverta osallistujaa kohti). Seitsemäntoista kuivaveripistenäytettä (DBS) tehdään 300 μl:sta kapillaariverta, joka on kerätty käyntien 2, 3, 4, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 aikana. , 19 ja 20 (yhteensä 5,1 ml kapillaariverta osallistujaa kohti).
Ehdokaspeptidit tunnistetaan in silico käyttämällä julkisesti saatavilla olevia genomisekvenssiä ja B-soluepitooppien ennustusalgoritmeja. Ehdokasbiomarkkereiden vasta-ainetiitterien kinetiikkaa arvioidaan entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) ja mesoskaalaisella seulonnalla, joka suoritetaan seerumi- ja DBS-näytteillä. Lyhyesti sanottuna määrityksen positiivisuuskynnys määritetään käyttämällä vertailuseeruminäytteitä henkilöiltä, jotka eivät ole altistuneet hyttysen puremille, kuten aiemmin on kuvattu. ELISA-signaalia, joka on mitattu 60 vertailuseerumissa, jotka on saatu altistumattomilta yksilöiltä (30 Thaimaan seerumia, jotka on saatu Thaimaan Punaiselta Ristiltä ja 30 Australian seerumia, saatu Burnet Institutesta), käytetään määrittämään määrityksen positiivisuuskynnys. Määrityksen positiivisuuskynnys määritellään kolmella standardipoikkeamalla (SD) yli keskimääräisen optisen tiheyden (ΔOD), joka on mitattu valottamattomalle kontrollipopulaatiolle. Tutkimuspopulaatiossa tehtyä testiä, jonka ΔOD ylittää tämän raja-arvon, pidetään positiivisena (eli immuunivasteena). Tutkimusnäytteiden spesifinen vasta-ainetiitteri määritetään suorittamalla sarjalaimennuskokeita. Tutkimusnäytteistä tehdään sarjalaimennos ja ΔOD määritetään jokaiselle laimennokselle. Vasta-ainetiitteri määritellään suurimmaksi laimennokseksi, joka antaa positiivisen signaalin. DBS- ja seeruminäytteillä saatuja tuloksia verrataan, jotta voidaan arvioida, onko DBS-näytteitä mahdollista käyttää hyttysten puremille altistumisen seurantaan epidemiologisten tutkimusten aikana. Käyntien 4 (perustaso), 13 (aikaisin altistuksen päättymisen jälkeen) ja 20 (altistuksen jälkeen) aikana kerätyt seeruminäytteet analysoidaan myös immunoproteomisella lähestymistavalla (sylkirauhasten proteiiniuutteiden 2D-geelielektroforeesi, Western blot ja massaspektrometria ) tuottaa lisätietoa hyttysen sylkirauhasen proteomin antigeenisistä ominaisuuksista.
Suunniteltu otoskoko: 150 osallistujaa seurattiin 16 viikon ajan
Osallistujan tunniste:
Tutkimukseen osallistujiksi määritellään 18–60-vuotiaat terveet osallistujat, jotka haluavat osallistua tutkimukseen. Tämä tutkimus tehdään Shoklo Malaria Research Unit (SMRU) -tutkimuskeskuksessa Mae Sotissa.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Changwat Tak
-
Mae Sot, Changwat Tak, Thaimaa, 63110
- Shoklo Malaria Research Unit (SMRU)
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Terve mies- tai naispuolinen osallistuja, jonka on arvioinut vastuullinen lääkäri, eikä lääkärin arvioinnissa ole havaittu poikkeavuuksia;
- thaimaalainen, burmalainen tai karenilainen etnisyys;
- Ikä ≥ 18 - <60 vuotta vanha;
- Asunut Mae Sotin kaupungissa viimeiset 12 kuukautta;
- halukas osallistumaan toimintaan ja kykenevä antamaan tietoisen suostumuksen tutkimukseen osallistumiselle;
- Pystyy sietämään suoraa altistumista hyttysille.
Poissulkemiskriteerit:
- Matkustushistoria malariaendeemisessä ovat (maaseutukylässä) viimeisen 12 kuukauden aikana tai aiot tehdä niin tutkimuksen aikana;
- Lääke tai tila, jonka vastuussa oleva lääkäri on katsonut häiritsevän tulosmittausta;
- Keskivaikea ja vaikea anemia (hemoglobiinipitoisuus alle 110 g/l veressä);
- Yliherkkyys tai anafylaksia hyttysten puremille;
- Raskaana olevat naiset
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: An. minimi
Tämä käsivarsi jaetaan 2 ryhmään; matala-altistusryhmät ja korkea-altistusryhmät. Matalasti altistuneessa ryhmässä osallistujat altistetaan viidelle hyttysen puremalle viikoittain päivästä 14 päivään 56 (seitsemän haastetta 5 hyttysen puremalla/haaste kuuden viikon aikana, yhteensä 35 hyttysen puremaa). Korkean altistuksen ryhmässä osallistujat altistetaan 5 hyttysen puremalle päivänä 14 ja sitten 50 hyttysen puremalle viikoittain päivästä 21 päivään 56 (yksi haaste 5 hyttysen puremalla ja kuusi haastetta, joissa 50 hyttysen puremaa / haaste yli 6 viikkoa, mikä tuotti yhteensä 305 hyttysen pistoa). |
Osallistujat altistuvat hyttysten puremille. Pienen annoksen altistamista varten viisi 5–7 päivän ikäistä synnyttämätöntä naarasimagoa (eli jotka eivät ole koskaan aikaisemmin saaneet verta) viedään yksittäin 50 ml:n muoviputkeen, joka on peitetty verkkomateriaalilla. Suuren annoksen altistamista varten 47 hyttystä jaetaan neljään halkaisijaltaan 10 cm:n muovikuppiin, jotka on peitetty verkkomateriaalilla (kolme kuppia, joissa on 12 hyttystä ja yksi kuppi, jossa on 11 hyttystä), ja 3 hyttystä viedään yksitellen 50 ml:n muoviputkiin. . Osallistujan käsivarteen annettuja hyttysenpuremia käytetään välittömien ja viivästyneiden ihoreaktioiden arvioimiseen. Välittömät ja viivästyneet ihoreaktiot kirjataan vastaavasti 20–30 minuuttia ja 24–36 tuntia 14. päivän ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. |
|
Kokeellinen: An. maculatus
Sama kuin edellä
|
Osallistujat altistuvat hyttysten puremille. Pienen annoksen altistamista varten viisi 5–7 päivän ikäistä synnyttämätöntä naarasimagoa (eli jotka eivät ole koskaan aikaisemmin saaneet verta) viedään yksittäin 50 ml:n muoviputkeen, joka on peitetty verkkomateriaalilla. Suuren annoksen altistamista varten 47 hyttystä jaetaan neljään halkaisijaltaan 10 cm:n muovikuppiin, jotka on peitetty verkkomateriaalilla (kolme kuppia, joissa on 12 hyttystä ja yksi kuppi, jossa on 11 hyttystä), ja 3 hyttystä viedään yksitellen 50 ml:n muoviputkiin. . Osallistujan käsivarteen annettuja hyttysenpuremia käytetään välittömien ja viivästyneiden ihoreaktioiden arvioimiseen. Välittömät ja viivästyneet ihoreaktiot kirjataan vastaavasti 20–30 minuuttia ja 24–36 tuntia 14. päivän ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. |
|
Kokeellinen: An. dirus
Sama kuin edellä
|
Osallistujat altistuvat hyttysten puremille. Pienen annoksen altistamista varten viisi 5–7 päivän ikäistä synnyttämätöntä naarasimagoa (eli jotka eivät ole koskaan aikaisemmin saaneet verta) viedään yksittäin 50 ml:n muoviputkeen, joka on peitetty verkkomateriaalilla. Suuren annoksen altistamista varten 47 hyttystä jaetaan neljään halkaisijaltaan 10 cm:n muovikuppiin, jotka on peitetty verkkomateriaalilla (kolme kuppia, joissa on 12 hyttystä ja yksi kuppi, jossa on 11 hyttystä), ja 3 hyttystä viedään yksitellen 50 ml:n muoviputkiin. . Osallistujan käsivarteen annettuja hyttysenpuremia käytetään välittömien ja viivästyneiden ihoreaktioiden arvioimiseen. Välittömät ja viivästyneet ihoreaktiot kirjataan vastaavasti 20–30 minuuttia ja 24–36 tuntia 14. päivän ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. |
|
Kokeellinen: Ae. aegypti
Sama kuin edellä
|
Osallistujat altistuvat hyttysten puremille. Pienen annoksen altistamista varten viisi 5–7 päivän ikäistä synnyttämätöntä naarasimagoa (eli jotka eivät ole koskaan aikaisemmin saaneet verta) viedään yksittäin 50 ml:n muoviputkeen, joka on peitetty verkkomateriaalilla. Suuren annoksen altistamista varten 47 hyttystä jaetaan neljään halkaisijaltaan 10 cm:n muovikuppiin, jotka on peitetty verkkomateriaalilla (kolme kuppia, joissa on 12 hyttystä ja yksi kuppi, jossa on 11 hyttystä), ja 3 hyttystä viedään yksitellen 50 ml:n muoviputkiin. . Osallistujan käsivarteen annettuja hyttysenpuremia käytetään välittömien ja viivästyneiden ihoreaktioiden arvioimiseen. Välittömät ja viivästyneet ihoreaktiot kirjataan vastaavasti 20–30 minuuttia ja 24–36 tuntia 14. päivän ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. |
|
Kokeellinen: Ae. albopictus
Sama kuin edellä
|
Osallistujat altistuvat hyttysten puremille. Pienen annoksen altistamista varten viisi 5–7 päivän ikäistä synnyttämätöntä naarasimagoa (eli jotka eivät ole koskaan aikaisemmin saaneet verta) viedään yksittäin 50 ml:n muoviputkeen, joka on peitetty verkkomateriaalilla. Suuren annoksen altistamista varten 47 hyttystä jaetaan neljään halkaisijaltaan 10 cm:n muovikuppiin, jotka on peitetty verkkomateriaalilla (kolme kuppia, joissa on 12 hyttystä ja yksi kuppi, jossa on 11 hyttystä), ja 3 hyttystä viedään yksitellen 50 ml:n muoviputkiin. . Osallistujan käsivarteen annettuja hyttysenpuremia käytetään välittömien ja viivästyneiden ihoreaktioiden arvioimiseen. Välittömät ja viivästyneet ihoreaktiot kirjataan vastaavasti 20–30 minuuttia ja 24–36 tuntia 14. päivän ja 21. päivän altistuksen jälkeen, mikä vaatii lisäkäyntejä päivinä 15 ja 22. |
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Spesifisten vasta-ainetiitterien tasot kandidaattipeptidejä vastaan ennen toistuvaa altistusta laboratoriossa kasvatettujen hyttysten puremille ja sen aikana määritettynä ELISA- ja mesoskaalausseulonnalla.
Aikaikkuna: lähtötaso päivään 112 asti
|
lähtötaso päivään 112 asti
|
|
Spesifisten vasta-ainetiitterien kinetiikka ehdokaspeptidejä vastaan ennen toistuvaa altistusta laboratoriossa kasvatettujen hyttysten puremille ja sen aikana määritettynä ELISA- ja mesoskaalausseulonnalla.
Aikaikkuna: lähtötaso päivään 112 asti
|
lähtötaso päivään 112 asti
|
|
Syljen antigeenien sekvenssi määritetty immunoproteomisella menetelmällä (sylkirauhasproteiiniuutteiden 2D-geelielektroforeesi, Western blot ja massaspektrometria).
Aikaikkuna: Päivä 14 - päivä 112
|
Päivä 14 - päivä 112
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Erilaista altistustasoa vastaavissa alaryhmissä määritettyjen vasta-ainetiitterien vertailu.
Aikaikkuna: Päivät 0, 7 (perustaso), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (altistusjakso), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 ja 112 (altistuksen jälkeinen ajanjakso).
|
Päivät 0, 7 (perustaso), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (altistusjakso), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 ja 112 (altistuksen jälkeinen ajanjakso).
|
|
DBS- ja laskimoverinäytteistä määritettyjen vasta-ainetiitterien vertailu.
Aikaikkuna: Päivät 0, 7 (perustaso), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (altistusjakso), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 ja 112 (altistuksen jälkeinen ajanjakso).
|
Päivät 0, 7 (perustaso), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (altistusjakso), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 ja 112 (altistuksen jälkeinen ajanjakso).
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: François Nosten, Shoklo Malaria Research Unit
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- MAL19009
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Hyttysten puremat
-
The University of Texas Health Science Center,...Vitamix Foundation; University of Texas at Austin; Brighter Bites; Penn State...ValmisLihavuus | Mielenterveys hyvinvointi 1 | Ravitsemus, terve | Diabetes mellitusriskiYhdysvallat
-
The University of Texas Health Science Center,...Brighter BitesValmis
-
Funk It WellnessCitruslabsValmisPremenstruaalinen oireyhtymäYhdysvallat
-
SourseCitruslabsValmisMieliala | Virtalähde; Puute | B12-vitamiinin puutosYhdysvallat
-
Cornell UniversityLaidlaw Foundation; Epperson Fund; Beck Fellowship; Dan Cane FundValmisMunasarjojen monirakkulaoireyhtymä | Munasarjakystat | PCOS | Dysmenorrea | Kuukautiskivut | Premenstruaalinen dysforinen häiriö | Premenstruaalinen oireyhtymä | Kuukautiskivut | Kuukautiskierron ongelma | PMS | Kuukautisten epämukavuus | Ensisijainen dysmenorrea | Kouristukset | Epänormaali kuukautiskierto | Kahdenvälisten... ja muut ehdotYhdysvallat