Karakteriserande humoristiskt immunsvar på myggbett (SG6)
Karakterisering av det humorala immunsvaret mot salivantigener från sydostasien myggvektorer av malaria och dengue med en mänsklig utmaningsmodell
Egenskaperna för det humorala svaret riktat mot myggsalivantigener är inte kända exakt. Detta är en stor begränsning för att använda immunologiska markörer som ett resultat i epidemiologiska prövningar och som en indikator för operativt utplacering av interventioner. De senaste framstegen i sammansättningen av genomet hos vissa Anopheles och Aedes myggvektorarter har underlättat identifieringen av nya kandidatpeptider i silico, med hjälp av sekvenserna av ortologa spottkörtelproteiner och B-cellsprediktionsalgoritmer. Syftet med denna studie är att bedöma det humorala immunsvaret riktat mot kandidatpeptider efter kontrollerad exponering för laboratorieanpassade kolonier av An. minimus, An. maculatus och An. dirus, Ae. aegypti och Ae. albopictus.
Denna forskning kommer att ge viktig information för att identifiera och validera immunologiska markörer för mänsklig exponering för malaria- och denguemyggvektorer i Sydostasien. Immunologiska markörer skulle vara användbara för att förstå överföringsdynamiken och förutsäga risken för överföring som en del av ett övervakningssystem, och för att bedöma effektiviteten av vektorkontrollinterventioner i entomologiska prövningar eller under operationell utplacering av interventioner i regionen.
Studieöversikt
Detaljerad beskrivning
Denna studie är en mänsklig utmaningsmodell med fem armar som motsvarar kontrollerad exponering för bett av oinfekterade laboratorieanpassade kolonier av Anopheles minimus, An. maculatus, An. dirus, Aedes. aegypti eller Ae. albopictus. Efter screening och behörighetsbedömning kommer 150 deltagare att registreras i studien med en blockrandomiserad design stratifierad på myggarter och antal bett (35 eller 305 bett totalt) så att de utgör 10 grupper om 15 individer för var och en av studietillstånd. Deltagarna kommer att vara med i studien i 112 dagar. Baslinjen kommer att bestå av 2 besök under 2 veckor (dag 0 och dag 7).
I lågexponeringsgrupperna kommer deltagarna att exponeras för 5 myggbett med veckointervall från dag 14 till dag 56 (sju utmaningar med 5 myggbett/utmaning under sex veckor, vilket ger totalt 35 myggbett). I gruppen med hög exponering kommer deltagarna att exponeras för 5 myggbett dag 14 och sedan för 50 myggbett med veckovisa intervall från dag 21 till dag 56 (en utmaning med 5 myggbett och sex utmaningar med 50 myggbett/utmaning över 6 veckor, vilket ger totalt 305 myggbett).
Antalet bett och metoder för uppföljningen som användes i denna studie valdes baserat på tidigare entomologisk undersökning utförd inom detta område, publicerade rapporter om mänsklig utmaning med myggbett och aktuell kunskap om egenskaperna hos det humorala svaret mot salivantigener. Både omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras efter utmaningar dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och dag 22. Deltagare med överkänslighet mot myggbett kommer att dras ur studien. Både kapillära och venösa blodprover kommer att samlas in varje vecka från varje studiedeltagare. Arton venösa blodprover kommer att samlas in, inklusive ett prov på 2 mL som tagits under screeningbesöket, 14 prover på 8,6 mL under besök 2, 3, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18 och 19, och 3 prover på 18,6 mL under besök 4, 13 och 20 (178,2 mL venöst blod per deltagare totalt). Sjutton prover av torra blodfläckar (DBS) kommer att göras av 300 μL kapillärblod som samlats in under besök 2, 3, 4, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 , 19 och 20 (5,1 ml kapillärblod per deltagare totalt).
Kandidatpeptider kommer att identifieras i silico med hjälp av allmänt tillgängliga genomsekvenser och B-cellsepitopprediktionsalgoritmer. Kinetiken för antikroppstitrar mot kandidatbiomarkörer kommer att bedömas genom enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) och screening i mesoskala utförd med serum- och DBS-prover. I korthet kommer analysens positivitetströskel att bestämmas med hjälp av referensseraprover från individer som inte exponerats för myggbett, som beskrivits tidigare. ELISA-signalen mätt i 60 referenssera erhållna från oexponerade individer (30 thailändska sera erhållna från Thai Röda Korset och 30 australiska sera erhållna från Burnet Institute) kommer att användas för att definiera positivitetströskeln för analysen. Positivitetströskeln för analysen kommer att definieras som tre standardavvikelser (SD) över den genomsnittliga optiska densiteten (ΔOD) uppmätt för den oexponerade kontrollpopulationen. Ett test i studiepopulationen med en ΔOD över denna cut-off kommer att betraktas som positivt (d.v.s. ett immunsvar). Den specifika antikroppstitern för studieprover kommer att bestämmas genom att utföra serieutspädningsexperiment. Seriell spädning kommer att göras från studieprover och ΔOD kommer att bestämmas för varje spädning. Antikroppstitern kommer att definieras som den högsta utspädningen som ger en positiv signal. Resultat som erhållits med DBS- och serumprover kommer att jämföras för att bedöma möjligheten att använda DBS-prover för att övervaka exponering för myggbett under epidemiologiska studier. Serumprover som tagits under besök 4 (baslinje), 13 (tidigt efter exponeringens slut) och 20 (efter exponeringen) kommer också att analyseras med immunoproteomisk metod (2D-gelelektrofores av salivkörtelproteinextrakt, Western blot och masspektrometri ) ger ytterligare information om de antigena egenskaperna hos mygga salivkörtelproteom.
Planerad provstorlek: 150 deltagare följdes upp under 16 veckor
Deltagaridentifikation:
Studiedeltagare definieras som friska deltagare i åldern mellan 18 och 60 år och villiga att delta i studien. Denna studie kommer att äga rum vid Shoklo Malaria Research Unit (SMRU) forskningscentrum i Mae Sot.
Studietyp
Inskrivning (Faktisk)
Fas
- Inte tillämpbar
Kontakter och platser
Studieorter
-
-
Changwat Tak
-
Mae Sot, Changwat Tak, Thailand, 63110
- Shoklo Malaria Research Unit (SMRU)
-
-
Deltagandekriterier
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
Tar emot friska volontärer
Beskrivning
Inklusionskriterier:
- Frisk manlig eller kvinnlig deltagare bedömd av en ansvarig läkare utan någon avvikelse identifierad vid en medicinsk utvärdering;
- thailändsk, burmesisk eller karenisk etnicitet;
- Ålder ≥ 18 till <60 år gammal;
- Har bott i staden Mae Sot de senaste 12 månaderna;
- Villig att delta i aktiviteten och kunna ge informerat samtycke för att delta i studien;
- Kan tolerera direkt myggexponering.
Exklusions kriterier:
- Historik av resor i malaria som är endemisk är (landsbygdsby) under de senaste 12 månaderna, eller planerar att göra det under studien;
- Läkemedel eller tillstånd som anses störa resultatmåttet av en ansvarig läkare;
- Måttlig och svår anemi (hemoglobinkoncentration mindre än 110 g/L blod);
- Överkänslighet eller anafylaxi mot myggbett;
- Gravid kvinna
Studieplan
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
- Primärt syfte: Grundläggande vetenskap
- Tilldelning: Randomiserad
- Interventionsmodell: Parallellt uppdrag
- Maskning: Ingen (Open Label)
Vapen och interventioner
Deltagargrupp / Arm |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Experimentell: Ett. minimus
Denna arm kommer att delas in i 2 grupper; lågexponeringsgrupperna och högexponeringsgruppen. I gruppen med låg exponering kommer deltagarna att exponeras för 5 myggbett med veckointervall från dag 14 till dag 56 (sju utmaningar med 5 myggbett/utmaning under sex veckor, vilket ger totalt 35 myggbett). I gruppen med hög exponering kommer deltagarna att exponeras för 5 myggbett dag 14 och sedan för 50 myggbett med veckovisa intervall från dag 21 till dag 56 (en utmaning med 5 myggbett och sex utmaningar med 50 myggbett/utmaning över 6 veckor, vilket ger totalt 305 myggbett). |
Deltagarna kommer att utsättas för myggbett. För utmaningen med låg dos kommer fem 5 till 7 dagar gamla nollparösa kvinnliga bilder (dvs. som aldrig har matats med blod tidigare) att införas individuellt i 50 ml plaströr täckt med nätmaterial. För högdosutmaning kommer 47 myggor att delas upp i fyra plastmuggar med 10 cm i diameter täckta med nätmaterial (tre koppar med 12 myggor och en kopp med 11 myggor), och 3 myggor kommer att introduceras individuellt i 50 ml plaströr . Myggbett som administreras på deltagarens arm kommer att användas för att bedöma omedelbara och fördröjda hudreaktioner. Omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras 20-30 minuter respektive 24-36 timmar efter utmaningen dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och 22. |
|
Experimentell: Ett. maculatus
Samma som ovan
|
Deltagarna kommer att utsättas för myggbett. För utmaningen med låg dos kommer fem 5 till 7 dagar gamla nollparösa kvinnliga bilder (dvs. som aldrig har matats med blod tidigare) att införas individuellt i 50 ml plaströr täckt med nätmaterial. För högdosutmaning kommer 47 myggor att delas upp i fyra plastmuggar med 10 cm i diameter täckta med nätmaterial (tre koppar med 12 myggor och en kopp med 11 myggor), och 3 myggor kommer att introduceras individuellt i 50 ml plaströr . Myggbett som administreras på deltagarens arm kommer att användas för att bedöma omedelbara och fördröjda hudreaktioner. Omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras 20-30 minuter respektive 24-36 timmar efter utmaningen dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och 22. |
|
Experimentell: Ett. dirus
Samma som ovan
|
Deltagarna kommer att utsättas för myggbett. För utmaningen med låg dos kommer fem 5 till 7 dagar gamla nollparösa kvinnliga bilder (dvs. som aldrig har matats med blod tidigare) att införas individuellt i 50 ml plaströr täckt med nätmaterial. För högdosutmaning kommer 47 myggor att delas upp i fyra plastmuggar med 10 cm i diameter täckta med nätmaterial (tre koppar med 12 myggor och en kopp med 11 myggor), och 3 myggor kommer att introduceras individuellt i 50 ml plaströr . Myggbett som administreras på deltagarens arm kommer att användas för att bedöma omedelbara och fördröjda hudreaktioner. Omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras 20-30 minuter respektive 24-36 timmar efter utmaningen dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och 22. |
|
Experimentell: Ae. aegypti
Samma som ovan
|
Deltagarna kommer att utsättas för myggbett. För utmaningen med låg dos kommer fem 5 till 7 dagar gamla nollparösa kvinnliga bilder (dvs. som aldrig har matats med blod tidigare) att införas individuellt i 50 ml plaströr täckt med nätmaterial. För högdosutmaning kommer 47 myggor att delas upp i fyra plastmuggar med 10 cm i diameter täckta med nätmaterial (tre koppar med 12 myggor och en kopp med 11 myggor), och 3 myggor kommer att introduceras individuellt i 50 ml plaströr . Myggbett som administreras på deltagarens arm kommer att användas för att bedöma omedelbara och fördröjda hudreaktioner. Omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras 20-30 minuter respektive 24-36 timmar efter utmaningen dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och 22. |
|
Experimentell: Ae. albopictus
Samma som ovan
|
Deltagarna kommer att utsättas för myggbett. För utmaningen med låg dos kommer fem 5 till 7 dagar gamla nollparösa kvinnliga bilder (dvs. som aldrig har matats med blod tidigare) att införas individuellt i 50 ml plaströr täckt med nätmaterial. För högdosutmaning kommer 47 myggor att delas upp i fyra plastmuggar med 10 cm i diameter täckta med nätmaterial (tre koppar med 12 myggor och en kopp med 11 myggor), och 3 myggor kommer att introduceras individuellt i 50 ml plaströr . Myggbett som administreras på deltagarens arm kommer att användas för att bedöma omedelbara och fördröjda hudreaktioner. Omedelbara och fördröjda hudreaktioner kommer att registreras 20-30 minuter respektive 24-36 timmar efter utmaningen dag 14 och dag 21, vilket kräver ytterligare besök på dag 15 och 22. |
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Tidsram |
|---|---|
|
Nivåer av specifika antikroppstitrar mot kandidatpeptider före och under upprepad exponering för laboratorieuppfödda myggbett bestämda genom ELISA och screening i mesoskala.
Tidsram: baslinje till och med dag 112
|
baslinje till och med dag 112
|
|
Kinetik för specifika antikroppstitrar mot kandidatpeptider före och under upprepad exponering för laboratorieuppfödda myggbett bestämt genom ELISA och screening i mesoskala.
Tidsram: baslinje till och med dag 112
|
baslinje till och med dag 112
|
|
Sekvens av salivantigener bestämd med en immuno-proteomisk metod (2D gelelektrofores av salivkörtelproteinextrakt, Western blot och masspektrometri).
Tidsram: Dag 14 till och med dag 112
|
Dag 14 till och med dag 112
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Tidsram |
|---|---|
|
Jämförelse av antikroppstitrarna bestämda i undergrupper som motsvarar olika exponeringsnivåer.
Tidsram: Dag 0, 7 (baslinje), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (exponeringsperiod), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 och 112 (period efter exponering).
|
Dag 0, 7 (baslinje), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (exponeringsperiod), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 och 112 (period efter exponering).
|
|
Jämförelse av antikroppstitrarna bestämda i DBS och venösa blodprover.
Tidsram: Dag 0, 7 (baslinje), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (exponeringsperiod), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 och 112 (period efter exponering).
|
Dag 0, 7 (baslinje), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (exponeringsperiod), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 och 112 (period efter exponering).
|
Samarbetspartners och utredare
Sponsor
Samarbetspartners
Utredare
- Huvudutredare: François Nosten, Shoklo Malaria Research Unit
Publikationer och användbara länkar
Studieavstämningsdatum
Studera stora datum
Studiestart (Faktisk)
Primärt slutförande (Faktisk)
Avslutad studie (Faktisk)
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
Första postat (Faktisk)
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (Faktisk)
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
Senast verifierad
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Nyckelord
Ytterligare relevanta MeSH-villkor
Andra studie-ID-nummer
- MAL19009
Plan för individuella deltagardata (IPD)
Planerar du att dela individuella deltagardata (IPD)?
Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument
Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt
Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .