Caracterización de la respuesta inmune humoral a las picaduras de mosquitos (SG6)
Caracterización de la respuesta inmune humoral contra antígenos salivales de mosquitos vectores de malaria y dengue del sudeste asiático con un modelo de desafío humano
Las características de la respuesta humoral dirigida contra los antígenos de la saliva del mosquito no se conocen con precisión. Esta es una limitación importante para el uso de marcadores inmunológicos como resultado en ensayos epidemiológicos y como indicador para el despliegue operativo de las intervenciones. Los avances recientes en el ensamblaje del genoma de algunas especies de mosquitos vectores Anopheles y Aedes han facilitado la identificación de nuevos péptidos candidatos in silico, utilizando las secuencias de proteínas ortólogas de las glándulas salivales y algoritmos de predicción de células B. El objetivo de este estudio es evaluar la respuesta inmune humoral dirigida contra los péptidos candidatos después de la exposición controlada a colonias de An. mínimo, An. maculatus y An. dirus, Ae. aegypti y Ae. albopictus.
Esta investigación proporcionará información esencial para identificar y validar los marcadores inmunológicos de la exposición humana a los mosquitos vectores de la malaria y el dengue en el sudeste asiático. Los marcadores inmunológicos serían útiles para comprender la dinámica de transmisión y predecir el riesgo de transmisión como parte de un sistema de vigilancia, y para evaluar la eficacia de las intervenciones de control de vectores en ensayos entomológicos o durante el despliegue operativo de intervenciones en la región.
Descripción general del estudio
Estado
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Este estudio es un modelo de desafío humano con cinco brazos correspondientes a la exposición controlada a mordeduras de colonias no infectadas adaptadas en laboratorio de Anopheles minimus, An. maculatus, An. Diro, Aedes. aegypti o Ae. albopictus. Después de la selección y la evaluación de elegibilidad, 150 participantes se inscribirán en el estudio mediante un diseño aleatorizado en bloque estratificado según la especie de mosquito y el número de picaduras (35 o 305 picaduras en total) para constituir 10 grupos de 15 individuos para cada uno de los condición de estudio. Los participantes estarán en el estudio durante 112 días. La línea de base consistirá en 2 visitas durante 2 semanas (día 0 y día 7).
En los grupos de baja exposición, los participantes estarán expuestos a 5 picaduras de mosquitos a intervalos semanales desde el día 14 hasta el día 56 (siete desafíos con 5 picaduras de mosquitos/desafío durante seis semanas, lo que da un total de 35 picaduras de mosquitos). En el grupo de alta exposición, los participantes estarán expuestos a 5 picaduras de mosquitos el día 14 y luego a 50 picaduras de mosquitos a intervalos semanales desde el día 21 hasta el día 56 (un desafío con 5 picaduras de mosquitos y seis desafíos con 50 picaduras de mosquitos/desafío sobre 6 semanas, arrojando un total de 305 picaduras de mosquitos).
El número de picaduras y las modalidades de seguimiento utilizadas en este estudio se eligieron en base a investigaciones entomológicas previas realizadas en esta área, informes publicados de desafío humano con picaduras de mosquitos y conocimiento actual sobre las características de la respuesta humoral contra antígenos de saliva. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales el día 15 y el día 22. Los participantes con hipersensibilidad a las picaduras de mosquitos serán retirados del estudio. Se recolectarán muestras de sangre tanto capilar como venosa semanalmente de cada participante del estudio. Se recolectarán dieciocho muestras de sangre venosa, incluida una muestra de 2 ml extraída durante la visita de selección, 14 muestras de 8,6 ml durante las visitas 2, 3, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18 y 19, y 3 muestras de 18,6 mL durante las visitas 4, 13 y 20 (178,2 mL de sangre venosa por participante en total). Se tomarán diecisiete muestras de sangre seca (DBS) a partir de 300 μL de sangre capilar recolectada durante las visitas 2, 3, 4, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 , 19 and 20 (5,1 mL de sangre capilar por participante en total).
Los péptidos candidatos se identificarán in silico utilizando secuencias de genomas disponibles públicamente y algoritmos de predicción de epítopos de células B. La cinética de los títulos de anticuerpos contra los biomarcadores candidatos se evaluará mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y un examen de mesoescala realizado con muestras de suero y DBS. Brevemente, el umbral de positividad del ensayo se determinará utilizando especímenes de suero de referencia de individuos no expuestos a picaduras de mosquitos, como se describió anteriormente. La señal ELISA medida en 60 sueros de referencia obtenidos de individuos no expuestos (30 sueros tailandeses obtenidos de la Cruz Roja Tailandesa y 30 sueros australianos obtenidos del Instituto Burnet) se utilizará para definir el umbral de positividad del ensayo. El umbral de positividad del ensayo se definirá como tres desviaciones estándar (SD) por encima de la densidad óptica media (ΔOD) medida para la población de control no expuesta. Una prueba en la población de estudio con un ΔOD por encima de este límite se considerará positiva (es decir, una respuesta inmunitaria). El título de anticuerpos específicos de las muestras de estudio se determinará realizando experimentos de dilución en serie. Se realizarán diluciones en serie a partir de muestras de estudio y se determinará el ΔOD para cada dilución. El título de anticuerpos se definirá como la dilución más alta que dé una señal positiva. Los resultados obtenidos con DBS y muestras de suero se compararán para evaluar la viabilidad de usar muestras de DBS para monitorear la exposición a las picaduras de mosquitos durante los estudios epidemiológicos. Las muestras de suero recolectadas durante las visitas 4 (línea de base), 13 (poco después del final de la exposición) y 20 (postexposición) también se analizarán con un enfoque inmunoproteómico (electroforesis en gel 2D de extractos de proteínas de glándulas salivales, Western blot y espectrometría de masas). ) que proporciona información adicional sobre las propiedades antigénicas del proteoma de las glándulas salivales del mosquito.
Tamaño de muestra planificado: 150 participantes seguidos durante 16 semanas
Identificación del participante:
Los participantes del estudio se definen como participantes sanos con edades comprendidas entre los 18 y los 60 años y que desean participar en el estudio. Este estudio se llevará a cabo en el centro de investigación de la Unidad de Investigación de la Malaria Shoklo (SMRU) en Mae Sot.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Changwat Tak
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Mae Sot, Changwat Tak, Tailandia, 63110
- Shoklo Malaria Research Unit (SMRU)
-
-
Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Participante masculino o femenino sano juzgado por un médico responsable sin anomalías identificadas en una evaluación médica;
- etnia tailandesa, birmana o karen;
- Edad ≥ 18 a < 60 años;
- Vivir en la ciudad de Mae Sot durante los últimos 12 meses;
- Dispuesto a participar en la actividad y capaz de dar su consentimiento informado para participar en el estudio;
- Capaz de tolerar la exposición directa a los mosquitos.
Criterio de exclusión:
- Historial de viaje en un área endémica de malaria (pueblo rural) en los últimos 12 meses, o planee hacerlo durante el estudio;
- Medicamento o condición que un médico responsable considere que interfiere con la medida del resultado;
- Anemia moderada y severa (concentración de hemoglobina inferior a 110 g/L de sangre);
- Hipersensibilidad o anafilaxia a las picaduras de mosquitos;
- Mujeres embarazadas
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Ciencia básica
- Asignación: Aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: Un. mínimo
Este brazo se dividirá en 2 grupos; los grupos de baja exposición y el grupo de alta exposición. En el grupo de baja exposición, los participantes estarán expuestos a 5 picaduras de mosquitos a intervalos semanales desde el día 14 hasta el día 56 (siete desafíos con 5 picaduras de mosquitos/desafío durante seis semanas, lo que da un total de 35 picaduras de mosquitos). En el grupo de alta exposición, los participantes estarán expuestos a 5 picaduras de mosquitos el día 14 y luego a 50 picaduras de mosquitos a intervalos semanales desde el día 21 hasta el día 56 (un desafío con 5 picaduras de mosquitos y seis desafíos con 50 picaduras de mosquitos/desafío sobre 6 semanas, arrojando un total de 305 picaduras de mosquitos). |
Los participantes estarán expuestos a las picaduras de mosquitos. Para el desafío de dosis baja, cinco imagos hembras nulíparas de 5 a 7 días de edad (es decir, que nunca antes se han alimentado con sangre) se introducirán individualmente en un tubo de plástico de 50 ml cubierto con material de red. Para el desafío de dosis alta, 47 mosquitos se dividirán en cuatro vasos de plástico de 10 cm de diámetro cubiertos con material de malla (tres vasos con 12 mosquitos y un vaso con 11 mosquitos), y 3 mosquitos se introducirán individualmente en tubos de plástico de 50 ml. . Las picaduras de mosquito administradas en el brazo del participante se utilizarán para evaluar las reacciones cutáneas inmediatas y tardías. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán respectivamente 20-30 min y 24-36 horas después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales los días 15 y 22. |
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Experimental: Un. maculatus
Lo mismo que arriba
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Los participantes estarán expuestos a las picaduras de mosquitos. Para el desafío de dosis baja, cinco imagos hembras nulíparas de 5 a 7 días de edad (es decir, que nunca antes se han alimentado con sangre) se introducirán individualmente en un tubo de plástico de 50 ml cubierto con material de red. Para el desafío de dosis alta, 47 mosquitos se dividirán en cuatro vasos de plástico de 10 cm de diámetro cubiertos con material de malla (tres vasos con 12 mosquitos y un vaso con 11 mosquitos), y 3 mosquitos se introducirán individualmente en tubos de plástico de 50 ml. . Las picaduras de mosquito administradas en el brazo del participante se utilizarán para evaluar las reacciones cutáneas inmediatas y tardías. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán respectivamente 20-30 min y 24-36 horas después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales los días 15 y 22. |
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Experimental: Un. diro
Lo mismo que arriba
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Los participantes estarán expuestos a las picaduras de mosquitos. Para el desafío de dosis baja, cinco imagos hembras nulíparas de 5 a 7 días de edad (es decir, que nunca antes se han alimentado con sangre) se introducirán individualmente en un tubo de plástico de 50 ml cubierto con material de red. Para el desafío de dosis alta, 47 mosquitos se dividirán en cuatro vasos de plástico de 10 cm de diámetro cubiertos con material de malla (tres vasos con 12 mosquitos y un vaso con 11 mosquitos), y 3 mosquitos se introducirán individualmente en tubos de plástico de 50 ml. . Las picaduras de mosquito administradas en el brazo del participante se utilizarán para evaluar las reacciones cutáneas inmediatas y tardías. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán respectivamente 20-30 min y 24-36 horas después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales los días 15 y 22. |
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Experimental: Ae. Egipto
Lo mismo que arriba
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Los participantes estarán expuestos a las picaduras de mosquitos. Para el desafío de dosis baja, cinco imagos hembras nulíparas de 5 a 7 días de edad (es decir, que nunca antes se han alimentado con sangre) se introducirán individualmente en un tubo de plástico de 50 ml cubierto con material de red. Para el desafío de dosis alta, 47 mosquitos se dividirán en cuatro vasos de plástico de 10 cm de diámetro cubiertos con material de malla (tres vasos con 12 mosquitos y un vaso con 11 mosquitos), y 3 mosquitos se introducirán individualmente en tubos de plástico de 50 ml. . Las picaduras de mosquito administradas en el brazo del participante se utilizarán para evaluar las reacciones cutáneas inmediatas y tardías. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán respectivamente 20-30 min y 24-36 horas después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales los días 15 y 22. |
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Experimental: Ae. albopicto
Lo mismo que arriba
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Los participantes estarán expuestos a las picaduras de mosquitos. Para el desafío de dosis baja, cinco imagos hembras nulíparas de 5 a 7 días de edad (es decir, que nunca antes se han alimentado con sangre) se introducirán individualmente en un tubo de plástico de 50 ml cubierto con material de red. Para el desafío de dosis alta, 47 mosquitos se dividirán en cuatro vasos de plástico de 10 cm de diámetro cubiertos con material de malla (tres vasos con 12 mosquitos y un vaso con 11 mosquitos), y 3 mosquitos se introducirán individualmente en tubos de plástico de 50 ml. . Las picaduras de mosquito administradas en el brazo del participante se utilizarán para evaluar las reacciones cutáneas inmediatas y tardías. Las reacciones cutáneas inmediatas y tardías se registrarán respectivamente 20-30 min y 24-36 horas después de los desafíos del día 14 y el día 21, lo que requerirá visitas adicionales los días 15 y 22. |
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Periodo de tiempo |
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Niveles de títulos de anticuerpos específicos contra péptidos candidatos antes y durante la exposición repetida a picaduras de mosquitos criados en laboratorio determinados por ELISA y cribado de mesoescala.
Periodo de tiempo: línea de base hasta el día 112
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línea de base hasta el día 112
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Cinética de títulos de anticuerpos específicos contra péptidos candidatos antes y durante la exposición repetida a picaduras de mosquitos criados en laboratorio determinada por ELISA y cribado de mesoescala.
Periodo de tiempo: línea de base hasta el día 112
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línea de base hasta el día 112
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Secuencia de antígenos salivales determinada con método inmunoproteómico (electroforesis en gel 2D de extractos proteicos de glándulas salivales, Western blot y espectrometría de masas).
Periodo de tiempo: Del día 14 al día 112
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Del día 14 al día 112
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Periodo de tiempo |
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Comparación de los títulos de anticuerpos determinados en subgrupos correspondientes a diferentes niveles de exposición.
Periodo de tiempo: Día 0, 7 (línea base), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (período de exposición), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 y 112 (período post-exposición).
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Día 0, 7 (línea base), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (período de exposición), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 y 112 (período post-exposición).
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Comparación de los títulos de anticuerpos determinados en DBS y muestras de sangre venosa.
Periodo de tiempo: Día 0, 7 (línea base), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (período de exposición), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 y 112 (período post-exposición).
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Día 0, 7 (línea base), 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 (período de exposición), 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105 y 112 (período post-exposición).
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: François Nosten, Shoklo Malaria Research Unit
Publicaciones y enlaces útiles
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
- Enfermedades transmitidas por vectores
- Enfermedades transmitidas por mosquitos
- Infecciones
- Infecciones por virus de ARN
- Enfermedades virales
- Infecciones por protozoos
- Enfermedades parasitarias
- Infecciones por arbovirus
- Infecciones por Flavivirus
- Infecciones por Flaviviridae
- Fiebres Hemorrágicas Virales
- Malaria
- Dengue
Otros números de identificación del estudio
- MAL19009
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
Esta información se obtuvo directamente del sitio web clinicaltrials.gov sin cambios. Si tiene alguna solicitud para cambiar, eliminar o actualizar los detalles de su estudio, comuníquese con register@clinicaltrials.gov. Tan pronto como se implemente un cambio en clinicaltrials.gov, también se actualizará automáticamente en nuestro sitio web. .
Ensayos clínicos sobre Picadura de mosquito
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