알레르기성 천식 환자의 항바이러스 면역에 대한 알레르겐 면역요법의 효과 (VITAL)

1.1 배경 호흡기 바이러스 감염은 천식의 급성 악화의 주요 원인입니다. 중요한 것은 이러한 감염이 세균 감염에 취약할 수도 있다는 것입니다. 알레르기성 천식 환자는 건강한 대조군에 비해 하기도 감염이 더 빈번하고, 하기도 증상이 더 심하고 오래 지속됩니다. 따라서 항생제 사용의 필요성은 알레르기성 천식에서 바이러스 감염에 대한 감수성 증가를 부분적으로 반영할 수 있습니다. 연구원들은 최근 알레르기성 천식 환자가 비알레르기성 천식 환자에 비해 호흡기 감염에 대한 항생제 처방 위험이 증가한다는 사실을 입증했습니다. 다른 연구에서는 알레르기 감작 및 호흡기 바이러스 감염이 천식 악화의 상승적 위험 요인으로 확인되었습니다. 이러한 발견은 알레르기 감작, 천식 및 호흡기 감염에 대한 손상된 면역 반응 사이의 가능한 연관성을 시사합니다. 또한 연구자들은 알레르겐 특이 면역요법(AIT)이 알레르기성 천식 환자의 호흡기 감염에 대한 항생제 처방 위험을 감소시킨다는 사실을 발견했습니다. 이러한 새로운 관찰은 AIT를 받은 표적 세포의 기계적 경로를 조사하는 것을 흥미롭게 만듭니다.

최근 연구에서 알레르겐과 바이러스 감염 사이의 상호 작용에 관련된 잠재적 메커니즘을 조사한 연구자들은 집 먼지 진드기(HDM)가 천식 환자의 기관지 상피 세포에서 바이러스 자극(TLR3)에 의해 유발된 유형 I 및 유형 III 인터페론을 손상시키는 것을 발견했습니다. 천식 악화의 생체 내 마우스 모델에서. 이 새로운 발견은 TLR3 글리코실화 감소에 대한 HDM의 직접적인 효과를 동반했습니다. 따라서 알레르기성 천식 환자의 HDM 노출은 TLR3와 같은 항바이러스 신호 전달에 중요한 구성 요소를 방해하여 항바이러스 반응 결함에 기여할 수도 있습니다. 또한 연구자들은 HDM이 천식 악화에 기여할 수 있는 IL-33과 같은 상류 Th2 사이토카인의 과발현을 유도하는 능력이 있음을 관찰했습니다. 우리의 연구에서 HDM은 염증 유발 손상 관련 대사 패턴의 방출과 손상된 인터페론 반응 모두를 유발하는 여러 알레르겐 중에서 두드러집니다.

추론적으로, 이 연구에서 조사자들은 바이러스에 대한 반응으로 Th1/및 Th2 염증 사이의 균형뿐만 아니라 유형 I 및 유형 III 인터페론의 기관지 상피 세포 생산에 대한 인간 생체 내 HDM-AIT의 효과를 조사할 수 있는 독특한 기회를 갖게 될 것입니다. 및 박테리아 트리거. 연구자들은 HDM-알레르겐에 대한 노출이 Th1/및 Th2 염증뿐만 아니라 항바이러스 인터페론 시스템의 조절 장애를 유발하여 천식 악화에 소인이 될 수 있으며 HDM-민감성 알레르기 천식(AA) 환자의 탈감작이 선천적 인터페론을 증가시킬 수 있다고 추측합니다. 응답.

1.2 가설

1. Acarizax 24주 후 HDM에 감작된 알레르기성 천식 환자의 HBECS에서 바이러스로 유도된 I형 및 III형 IFN이 증가했습니다.
2. Acarizax 24주 전에 HDM에 감작된 알레르기성 천식 환자의 HBEC에서 바이러스로 유도된 I형 및 III형 IFN 반응이 손상됩니다.

1.3 시험용 의약품(IMP): ACARIZAX Acarizax는 HDM 알레르기성 비염(AR) 및 알레르기성 천식(AA) 치료를 위한 설하 알레르겐 면역요법(SLIT)입니다. Acarizax는 HDM의 Dermatophagoides pteronyssinus 및 Dermatophagoides farina의 표준화된 알레르겐 추출물로 구성되어 있습니다.

Acarizax의 효능은 AR 및 AA에 대한 최상의 유지 치료를 위한 추가 치료로서 무작위, 이중 맹검, 위약 대조 시험에서 테스트되었습니다. Acarizax의 임상 효과는 치료 시작 후 8-14주 후에 입증되었으며 임상 효과에 대한 데이터는 치료 18개월까지 사용할 수 있습니다. Acarizax는 AA 환자에서 첫 번째 악화까지의 시간(위험비 0.7)을 줄이는 것으로 밝혀졌습니다. Acarizax는 1일 평균 흡입 코르티코스테로이드(부데소니드)를 81마이크로그램/일(95% CI: 27-136마이크로그램/일) 감소시키는 것으로 나타났습니다. AR에서 Acarizax는 TCRS(Total Combined Rhinitis Score)를 감소시키는 것으로 나타났습니다. 아토피 피부염에 대한 AIT의 효능에 대한 메타분석에서는 중간 정도의 효능을 보였다. 따라서 우리는 탐색적 결과로서 면역학적 표현형의 잠재적인 변화를 연구할 것입니다.

AIT는 100년 이상 동안 알레르기 질환에 대한 잠재적인 치료 및 특정 치료법으로 알려져 왔습니다. AIT가 작동하는 메커니즘은 제대로 이해되지 않았지만 핵심 목표는 아마도 면역병리학의 조절일 것입니다. 면역 체계의 조절 장애는 아토피 질환에서 필수적인 역할을 하는 것으로 생각되며 여러 복잡한 조절 메커니즘의 영향을 받습니다. AIT의 잘 확립된 면역 조절 효과는 다음 유형의 사건으로 분류됩니다.

1 번 테이블. AIT의 메커니즘 이벤트 순서 이벤트 변경 초기 변경까지의 시간

1. 호염기구 및 비만 세포 활성 및 IgE 매개 히스타민 방출의 탈과립 즉시 감소
2. 알레르겐 특이적 Treg 및 Breg 세포의 유도 및 알레르겐 특이적 Th1 및 Th2 세포의 억제 수일에서 수주로 증가
3. 특정 IgE 조기 증가 후 기준선으로 만성 감소 주에서 년
4. 특정 IgG4 치료 기간 내내 지속적으로 증가 주
5. 조직 상주 호산구, 호염기구 및 비만 세포와 이들 매개체의 방출 개월 수 감소
6. 1형 피부 반응성 감소 개월

1.4 근거

항바이러스 면역 인터페론(IFN)은 항바이러스 방어에 필수적인 사이토카인입니다. IFN은 인간 기관지 상피 세포(HBEC) 및 형질세포양 수지상 세포(pDC)가 주요 생산자인 폐의 많은 세포 유형에 의해 생산됩니다. IFN의 주요 효과는 바이러스 핵산을 절단하고 바이러스 복제를 억제하고 감염된 세포에서 세포사멸을 유도하여 이웃 세포로의 바이러스 침입을 차단하는 것입니다. HBEC는 바이러스 감염에 대한 충분한 선천적 면역 반응의 발달에 중요합니다. 증가하는 증거는 천식 및 알레르기성 천식 환자의 HBECS가 바이러스 감염 시 유형 I(IFN-베타) 및 III(IFN-람다) 인터페론을 분비하는 손상된 능력을 나타낸다는 것을 시사합니다. 또한, IFN-베타 및 IFN-람다는 기도 상피의 제2형 염증 수준과 반비례 관계가 있을 수 있습니다.

pDC는 바이러스 감염에 대한 1차 선천 면역 방어의 필수 이펙터로, 많은 양의 IFN-알파를 방출하고 CD4 림프구의 Th1 분극화를 유도합니다. 그러나 pDC는 Th2 분극화를 유도하여 B 세포에서 IgE 생산을 증가시키고 FcepsilonR1-alpha 수용체의 잠재적인 가교결합을 유도할 수 있는 항원 제시 세포로서 중요한 역할을 합니다. 흥미롭게도, 최근 바이러스 유도 IFN-알파 방출이 알레르겐 노출에 의해 pDC에서 FcepsilonR1-알파 수용체의 활성화에 의해 감소되었다는 것이 입증되었으며, 이는 알레르기와 감소된 바이러스 방어 사이의 잠재적 연결을 제안합니다. 알레르기성 천식 환자에서 바이러스 유도 IFN-알파 방출은 기관지 감염에 대한 반응으로 보다 전신적인 영향을 나타내는 PBMC에서 손상되었습니다.

AIT: 알레르기성 염증의 억제로 이어지는 메커니즘 일반적으로 Th2/Treg 세포 내성이 알레르기성 염증의 발생 또는 억제에 결정적인 것으로 인정됩니다. Treg 세포는 다량의 필수 억제 사이토카인 IL-10 및 TGF-베타를 분비합니다. 이러한 사이토카인은 다양한 방식으로 Th2 매개 알레르기 질환의 조절에 기여합니다. Treg 세포는 경쟁적인 IgG4 및 IgA 반응을 유도하여 IgE를 억제함으로써 B 세포를 조절합니다. 또한, Treg 세포는 비만 세포, 호염기구 및 호산구의 활성화 및 탈과립을 억제할 수 있습니다. 마지막으로 Treg 세포는 조직 및 상피 세포 활성화 및 전염증성 사이토카인 생성을 유도하는 Th2 세포를 억제합니다. Breg 세포는 IL-10 분비를 통해 과도한 염증 반응을 조절하고 Treg 세포의 분화를 지원하며 IgG4의 합성을 유도합니다. 이러한 효과는 AIT에 대한 반응과 연관될 수 있으며 임상 개선과 관련이 있습니다. 따라서 AIT는 기관지, 비강 및 결막의 과민성을 감소시킬 수 있으며, 이는 근본적인 점막 염증의 감소를 반영합니다. Anti-IgE 치료는 바이러스 감염과 관련된 천식 악화의 계절적 변화를 완화하며, 이는 바이러스 감염에 대한 초기 인터페론 반응의 증가와 관련이 있을 수 있습니다. 따라서 우리는 항생제 처방의 위험을 낮추는 AIT의 잠재적 면역 조절 효과가 바이러스 감염에 대한 일차 IFN 방어 반응의 증가에 의해 매개되는 알레르겐 유발 점막 Th-2 염증의 변화의 순 결과라고 추측합니다.

6.6 연구 관리 및 감독

6.6.1 연구 장소 Bispebjerg 병원, Dep. of Respiratory Medicine Bispebjerg Bakke 23, 입구 66 DK - 2400 Copenhagen NV 덴마크 전화: (+45) 35 31 35 69 팩스: (+45) 35 31 21 79

6.6.12 추가 분석 사이트

• 코펜하겐 대학교 면역학 및 미생물학과
• 룬드대학교 호흡기면역약리학과
• ALK-Abelló A/S, Boege Allé 6-8, 2970 Hoersholm

6.6.13 연구 등록 및 권한 연구 코드: VITAL EudraCT: 2019-003261-18 윤리 위원회 저널 번호: H-19052148 덴마크 의약품 기구: 2019-003261-18 ClinicalTrial.gov: NCT04100902

6.6.14 운영 위원회 Christian Uggerhoej Woehlk, M.D., Ph.D.-학생 Asger Sverrild, M.D., Ph.D. Charlotte Menné Bonefeld, 교수 Lena Uller Ass. Steen Roenborg 교수, M.D. Ph.D. Celeste Porsbjerg, 교수, M.D.

6.6.15 참가자 및 협력자

1. 약국: 지역 Hovedstadens Apotek, Marielundvej 25, 2730 Herlev, 덴마크.
2. Peter Arvidsson, M.D., PhD.: ALK-Abelló Nordic A/S, Kungbacke 스웨덴
3. Peter Sejer Andersen: ALK-Abelló A/S, Boege Allé 6-8, Bygn. 9, 2970 Hoersholm
4. Peter Adler Würtzen, 수석 전문가, 박사: ALK-Abelló A/S, Boege Allé 6-8, Bygn. 9, 2970 Hoersholm

8. 통계 분석 8.1 샘플 크기 추정 샘플 크기 계산은 G-Power 소프트웨어를 사용하여 수행되었습니다(Behaviour Research Methods 2007 Faul et al).

8.1.1 주요 결과:

우리가 아는 한, HBECS에서 AIT 치료와 IFN 반응의 변화 사이의 관계를 조사한 선행 연구는 없습니다. 연구자들은 이전에 아지스로마이신으로 시험관 내 인간 기도 상피를 치료하면 바이러스 감염 유사체에 대한 IFN-반응이 용량 의존 방식으로 증가한다는 것을 보여주었습니다. 주어진 농도에서 INF-β의 배수 변화는 1.55(SD 0.555)였습니다. 0주에서 24주까지의 IFN-β의 상당한 변화가 SD 0.555, 알파는 0.05, 검정력은 0.80으로 1.55배 변화로 설정되어 양면 테스트 설계에서 계산은 다음과 같습니다.

평균(INF-β 변화 배수) 그룹 1(위약): 1 평균(INF-β 변화 배수) 그룹 2(Acarizax): 1.55 SD: 0.55 16명의 피험자가 각 연구 부문에 필요합니다. 탈락률이 20%라고 가정하면 총 최소 40명의 피험자가 무작위 배정되어야 합니다.

8.2 분석 세트의 정의 1) 분석을 위한 모집단:

1. Intention-to-treat 모집단: Acarizax 또는 위약을 1회 이상 투여받은 모든 무작위 피험자. 치료 그룹의 비교가 수행됩니다.

2) 치료 순응도가 80% 이상인 분석 대상 모집단.

1. Intention-to-treat 모집단: Acarizax 요법 또는 위약에 대한 순응도가 80% 이상인 모든 무작위 피험자. 치료 그룹의 비교가 수행됩니다.

8.2.1 효능 분석 세트 치료 의향 모집단(8.2에서 정의됨).

8.2.2 안전성 분석 세트 Acarizax/위약을 1회 이상 투여받은 모든 환자.

8.3 통계 분석 방법 1차 및 주요 2차 결과로 제한된 모든 데이터는 SPSS v. 14 이상을 사용하여 분석됩니다. 모든 데이터는 사분위수 범위의 중앙값으로 보고되고 비모수 테스트를 사용하여 분석되었습니다. 각 그룹(Acarizax 및 위약) 내의 데이터는 선형 혼합 모델 또는 ANCOVA를 사용하여 분석됩니다. Acarizax 그룹과 위약 그룹 간의 통계적 차이는 관련 없는 샘플에 대한 Mann - Whitney U 테스트를 사용하여 결정됩니다. 편향된 데이터는 분석 전에 로그 변환되고 중앙값 및 25/75% 백분위수를 사용하여 보고됩니다. 파라메트릭 데이터는 위에서 언급한 방법을 사용하여 분석됩니다. 범주 데이터는 χ²-테스트를 ​​사용하여 분석됩니다. 통계적 유의성은 p로 정의됩니다.

8.3.1 1차 변수 분석 IFN-β 및 IFN-λ의 배수 변화는 RV 감염 및/또는 V3에서 V12로의 폴리(I:C) 자극 전과 후에 분석되며 개입 사이에 비교됩니다. 및 플라시보 치료. 조사관은 데이터의 매개변수 분포를 기대합니다.

계산은 다음과 같습니다.

1. deltaIFN-β: IFN-β V12 - IFN-βV3
2. 평균 배수 변화 IFN-β: 개별 변화의 합 / N

중재 및 위약 치료 그룹 간에 보조적인 기본 목표가 계산됩니다.

1. ρg/ml(ELISA)로 측정되고 배수 변화 평균 ± SD로 보고되는 IFN-λ의 발현 변화
2. 배수 변화 평균 ± SD로 보고된 바이러스 부하/TCID50 분석 측정의 변화

8.3.2 2차 변수 분석

• IFN 반응의 변화는 1차 결과 분석과 동일한 절차를 사용하여 분석됩니다.
• 사이토카인은 8.3.1에 설명된 방법에 따라 분석되고 ρm/ml(또는 유사한 정량적 방법)로 보고되고 배수 변화 평균 ± SEM으로 보고됩니다.
• IFN-β/TSLP 비율의 변화 및 %로 보고됨.
• 점막 생검 및 V2에서 상피 솔질의 현미경 평가에 의해 결정된 mm2당 기도 점막하층, 근육 및 상피 비만 세포, 호산구, 호중구, NK 세포(MCT, MCTC 및 MCCPA3) 수의 비율로 표현된 변화 V7.

8.3.3 중간 분석 중간 분석은 계획되어 있지 않습니다.

8.3.4 데이터베이스 REDCap의 사용은 온라인 CRF 데이터 관리에 사용됩니다.

9. 연구 및 데이터 관리 9.1 경제

프로토콜의 과학적 아이디어는 전적으로 운영위원회 구성원의 작업을 기반으로 합니다. 운영위원회 위원 중 누구도 본 연구 결과에 대해 어떠한 상업적 이해관계도 갖고 있지 않습니다. 01.08.19에 따라 프로젝트는 다음을 받았습니다.

1. (900.000dkk)의 ALK-Abelló Nordic의 무제한 보조금
2. 제재소 소유주 Jeppe Juhl과 아내 Ovita Juhls 기념 기금의 무제한 보조금(250.000 dkk).
3. 하르보에폰덴: DKK 200.000
4. Pharmaxis: Osmohale 만니톨 챌린지 테스트

9.2. 피험자 상환 연구를 완료한 각 피험자는 약 5.500dkk에 해당하는 Acarizax 치료를 총 6개월 동안 받게 됩니다. Acarizax 팔에 무작위 배정된 대상은 더 이상 보상되지 않습니다.

9.2.1 소스 데이터는 덴마크 데이터 보호국 법률에 따라 덴마크 Bispebjerg 병원(연구 기관)에 보관됩니다. 원본 데이터는 (01.09.2019)부터 최대 20년간 보관됩니다. 이 시점에서 모든 소스 데이터가 삭제됩니다.

9.2.2 연구 계약 연구와 관련된 모든 계약은 시험 마스터 파일(TMF)에서 사용할 수 있습니다.

9.2.3 연구 문서 보관 문서는 GCP 및 덴마크 데이터 보호 기관 법률에 따라 덴마크 Bispebjerg 병원(연구 장소)에 보관됩니다.

9.3 연구 모니터링

이 연구는 코펜하겐의 GCP 단위에서 모니터링됩니다.

코펜하겐 대학병원 GCP-unit Bispebjerg Hospital, Building 51, 3.fl Bispebjerg Bakke 23 DK - 2400 København NV Denmark 전화: (+45) 3531 3887 이메일: gcp-enheden.bispebjerg-frederiksberg-hospitaler@regionh.dk www.gcp-enhed.dk.