Genexpressieprofilering in PBMC's als een hulpmiddel voor het voorspellen van de responsiviteit van Infliximab bij reumatoïde artritis

Het doel van de studie is het identificeren en valideren van voorspellende markers van infliximab-responsiviteit bij RA-patiënten door middel van twee benaderingen: i) het meten van biochemische, immunologische en botmarkers in sera vanwege hun betrokkenheid bij pathogene mechanismen; ii) het identificeren van handtekeningen voor genexpressie in PBMC's door de transcriptomische analyse.

Patiënten met actieve RA (ACR-criteria) kregen i.v. 3 mg/kg infliximab geassocieerd met metotrexaat in week 0, 2, 6 en elke 8e week. De werkzaamheid van infliximab werd in week 14 beoordeeld aan de hand van de EULAR-responscriteria.

1. Vlak voor aanvang van de behandeling met infliximab werden de volgende parameters in de sera gemeten: i) immunologische testen: reumafactor (IgA, IgG, IgM), anti-CCP, autoAb herkent het 27 C-terminale fragment (ACAST-C27) en domein I (ACAST-DI) van calpastatine, anti-G6PI, anti-a-enolase, anti-keratine en anti-perinucleaire factor; ii) biochemische markers: CRP, MMP-1, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2; markers van botresorptie: pyridinolin, deoxypyridinolin, osteoprotegerin, sRANKL, COMP. De voorspellende waarde van elke parameter voor een respons/non-respons op infliximab werd geanalyseerd met Fischer's exact, Mann-Whitney en Chi2-tests.
2. Vlak voor het begin van de behandeling met infliximab werd een bloedmonster genomen en werden totale RNA's geëxtraheerd uit de perifere mononucleaire bloedcellen. De [33P] radioactief gemerkte mRNA's werden gehybridiseerd (duplicaat of triplo) over een set van 10.000 humane cDNA-probes die met een hoge dichtheid op nylonmembranen werden gespot. Gegevens werden genormaliseerd en gefilterd om de vergelijking tussen RNA-monsters mogelijk te maken. Statistische analyses werden uitgevoerd met de R-software en hiërarchische clustering werd uitgevoerd met de Cluster- en Tree View-software.