Genexpressionsprofilierung in PBMCs als Instrument zur Vorhersage der Infliximab-Reaktion bei rheumatoider Arthritis

Das Ziel der Studie besteht darin, prädiktive Marker für das Ansprechen auf Infliximab bei RA-Patienten durch zwei Ansätze zu identifizieren und zu validieren: i) Messung biochemischer, immunologischer und Knochenmarker in Seren aufgrund ihrer Beteiligung an pathogenen Mechanismen; ii) Identifizierung von Genexpressionssignaturen in PBMCs durch die transkriptomische Analyse.

Patienten mit aktiver RA (ACR-Kriterien) erhielten i.v. 3 mg/kg Infliximab in Kombination mit Metotrexat in den Wochen 0, 2, 6 und alle 8 Wochen. Die Wirksamkeit von Infliximab wurde in Woche 14 anhand der EULAR-Antwortkriterien bewertet.

1. Kurz vor Beginn der Infliximab-Behandlung wurden folgende Parameter in den Seren gemessen: i) immunologische Tests: Rheumafaktor (IgA, IgG, IgM), Anti-CCP, AutoAb, das das 27 C-terminale Fragment erkennt (ACAST-C27) und Domäne I (ACAST-DI) von Calpastatin, Anti-G6PI, Anti-a-Enolase, Anti-Keratin und Anti-perinukleärer Faktor; ii) biochemische Marker: CRP, MMP-1, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2; Marker der Knochenresorption: Pyridinolin, Desoxypyridinolin, Osteoprotegerin, sRANKL, COMP. Der Vorhersagewert jedes Parameters für ein Ansprechen/Nichtansprechen auf Infliximab wurde mithilfe der exakten Fischer-, Mann-Whitney- und Chi2-Tests analysiert.
2. Kurz vor Beginn der Infliximab-Behandlung wurde eine Blutprobe entnommen und Gesamt-RNAs aus den mononukleären Zellen des peripheren Blutes extrahiert. Die mit [33P] radioaktiv markierten mRNAs wurden (doppelt oder dreifach) über einen Satz von 10.000 menschlichen cDNA-Sonden hybridisiert, die in hoher Dichte auf Nylonmembranen aufgetragen wurden. Die Daten wurden normalisiert und gefiltert, um den Vergleich zwischen RNA-Proben zu ermöglichen. Statistische Analysen wurden mit der R-Software durchgeführt und hierarchisches Clustering wurde mit den Softwares Cluster und Tree View durchgeführt.