Perfiles de expresión génica en PBMC como herramienta para la predicción de la capacidad de respuesta a infliximab en la artritis reumatoide

El objetivo del estudio es identificar y validar marcadores predictivos de respuesta a infliximab en pacientes con AR mediante 2 enfoques: i) medir marcadores bioquímicos, inmunológicos y óseos en suero por su implicación en mecanismos patogénicos; ii) identificar firmas de expresión génica en PBMC mediante el análisis transcriptómico.

A los pacientes con AR activa (criterios ACR) se les administró i.v. 3 mg/kg de infliximab asociado a metotrexato en las semanas 0, 2, 6 y cada 8 semanas. La eficacia de infliximab se evaluó en la semana 14, utilizando los criterios de respuesta EULAR.

1. Justo antes de iniciar el tratamiento con infliximab, se midieron en suero los siguientes parámetros: i) pruebas inmunológicas: factor reumatoide (IgA, IgG, IgM), anti-CCP, autoAb que reconoce el fragmento 27 C-terminal (ACAST-C27) y dominio I (ACAST-DI) de calpastatina, anti-G6PI, anti-enolasa, anti-queratina y anti-factor perinuclear; ii) marcadores bioquímicos: CRP, MMP-1, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2; marcadores de resorción ósea: piridinolina, desoxipiridinolina, osteoprotegerina, sRANKL, COMP. El valor predictivo de cada parámetro para una respuesta/falta de respuesta a infliximab se analizó mediante las pruebas exacta de Fischer, Mann-Whitney y Chi2.
2. Se recogió una muestra de sangre justo antes del inicio del tratamiento con infliximab y se extrajeron los ARN totales de las células mononucleares de sangre periférica. Los ARNm radiomarcados con [33P] se hibridaron (duplicados o triplicados) sobre un conjunto de 10.000 sondas de ADNc humano colocadas a alta densidad en membranas de nailon. Los datos se normalizaron y filtraron para permitir la comparación entre muestras de ARN. Los análisis estadísticos se realizaron con el software R y el agrupamiento jerárquico se realizó con los softwares Cluster y Tree View.