Perfil de expressão gênica em PBMCs como uma ferramenta para prever a capacidade de resposta do infliximabe na artrite reumatoide

O objetivo do estudo é identificar e validar marcadores preditivos de responsividade ao infliximabe em pacientes com AR por 2 abordagens: i) medição de marcadores bioquímicos, imunológicos e ósseos no soro devido ao seu envolvimento em mecanismos patogênicos; ii) identificação de assinaturas de expressão gênica em PBMCs pela análise transcriptômica.

Os pacientes com AR ativa (critérios ACR) receberam injeção i.v. 3 mg/kg de infliximabe associado a metotrexato nas semanas 0, 2, 6 e a cada 8 semanas. A eficácia do infliximabe foi avaliada na semana 14, usando os critérios de resposta EULAR.

1. Imediatamente antes do início do tratamento com infliximabe, os seguintes parâmetros foram medidos no soro: i) testes imunológicos: fator reumatóide (IgA, IgG, IgM), anti-CCP, autoAb reconhecendo o fragmento 27 C-terminal (ACAST-C27) e domínio I (ACAST-DI) da calpastatina, anti-G6PI, anti-α-enolase, anti-queratina e anti-fator perinuclear; ii) marcadores bioquímicos: PCR, MMP-1, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2; marcadores de reabsorção óssea: piridinolina, deoxipiridinolina, osteoprotegerina, sRANKL, COMP. O valor preditivo de cada parâmetro para resposta/não-resposta ao infliximabe foi analisado por meio dos testes exato de Fischer, Mann-Whitney e Chi2.
2. Uma amostra de sangue foi coletada imediatamente antes do início do tratamento com infliximabe e os RNAs totais foram extraídos das células mononucleares do sangue periférico. Os mRNAs radiomarcados com [33P] foram hibridados (duplicado ou triplicado) sobre um conjunto de 10.000 sondas de cDNA humano localizadas em alta densidade em membranas de nylon. Os dados foram normalizados e filtrados para permitir a comparação entre amostras de RNA. As análises estatísticas foram realizadas com o software R e o agrupamento hierárquico foi realizado com os softwares Cluster e Tree View.