Oxidatieve stress, lichte ontsteking, weefselafbraak en biomarkers in cerebrospinale vloeistof van A-T

Ataxia telangiectasia (A-T) is een verwoestende menselijke recessieve aandoening die wordt gekenmerkt door progressieve cerebellaire ataxie, immunodeficiëntie, chromosomale instabiliteit en vatbaarheid voor kanker. Voor clinici en wetenschappers is het onderliggende mechanisme en proces van neurodegeneratie dat leidt tot verlies van cerebellaire neuronen en neurologische functie grotendeels onbekend. Bovendien bestaat er geen surrogaatmarker van neurologische degeneratie en ziekteprogressie.

Drie belangrijke factoren kunnen verantwoordelijk zijn voor de progressie van neurodegeneratie:

1. AT-patiënten vertonen verhoogde niveaus van reactieve zuurstofspecies (ROS) en verminderde anti-oxidatieve capaciteit. Er is voorgesteld dat ROS verantwoordelijk is voor de vernietiging van de purkinjecellen in het cerebellum.
2. Aanhoudende laaggradige ontsteking als gevolg van immunodeficiëntie. Verhoogde seruminterleukine-8 (IL-8)-spiegels bij patiënten met AT worden verondersteld dat systemische ontsteking kan bijdragen aan het fenotype van de ziekte. Hoe ontsteking en neurodegeneratie op elkaar inwerken, is echter een kwestie van voortdurende discussie.
3. Lage niveaus van groeihormonen (GH). Extracerebellaire MRI - laesies in A-T gaan gepaard met een tekort aan de GH-as, hoge Ataxia-scores en gevorderde leeftijd.

Het doel van het voorstel is het onderzoeken van oxidatieve stress, laaggradige ontsteking, weefselafbraak en biomarkers in cerebrospinale vloeistof (CSF), een vloeistof die in direct contact staat met het centrale zenuwstelsel (CZS), van AT-patiënten.

• Functionele genexpressie van oxidatieve stress en laaggradige ontsteking analyseren door middel van reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) en cytometrische bead array.
• Om de veranderingen in eiwitexpressie gerelateerd aan AT te karakteriseren, een op LC/MS gebaseerde kwantitatieve proteomische analyse van CSF van controle- en AT-patiënten
• Veranderingen in eiwitexpressieniveaus in CSF vergelijken met MRI-bevindingen in verschillende leeftijdsgroepen van klassieke AT.
• Kandidaat-eiwitten bepalen waarvan de relatieve expressieniveaus kunnen worden gebruikt als surrogaatmarker voor ziekteprogressie?
• Opzetten van een analysesysteem op basis van multiplex ELISA-techniek om potentiële kandidaten/surrogaatmarkers voor ziekteprogressie in een groter cohort patiënten te evalueren.