Stres oksydacyjny, stany zapalne niskiego stopnia, rozpad tkanek i biomarkery w płynie mózgowo-rdzeniowym A-T

Ataxia-telangiectasia (A-T) to wyniszczająca ludzka choroba recesywna charakteryzująca się postępującą ataksją móżdżkową, niedoborem odporności, niestabilnością chromosomów i podatnością na raka. Dla klinicystów i naukowców podstawowy mechanizm i proces neurodegeneracji prowadzący do utraty neuronów móżdżku i funkcji neurologicznych jest w dużej mierze nieznany. Ponadto nie istnieje zastępczy marker degeneracji neurologicznej i progresji choroby.

Trzy główne czynniki mogą być odpowiedzialne za postęp neurodegeneracji:

1. Pacjenci z A-T wykazują podwyższony poziom reaktywnych form tlenu (ROS) i zmniejszoną zdolność antyoksydacyjną. Zaproponowano, że RFT są odpowiedzialne za niszczenie komórek Purkinjego w móżdżku.
2. Trwający stan zapalny niskiego stopnia z powodu niedoboru odporności. Podwyższone poziomy interleukiny-8 (IL-8) w surowicy u pacjentów z A-T postuluje się, że ogólnoustrojowy stan zapalny może przyczyniać się do fenotypu choroby. Jednak to, w jaki sposób stan zapalny i neurodegeneracja wchodzą w interakcje, jest przedmiotem toczącej się debaty.
3. Niski poziom hormonów wzrostu (GH). MRI pozamóżdżkowy - zmiany w A-T idą w parze z niedoborem osi GH, wysoką punktacją ataksji i zaawansowanym wiekiem.

Celem wniosku jest zbadanie stresu oksydacyjnego, stanu zapalnego niskiego stopnia, rozpadu tkanek i biomarkerów w płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF), płynie mającym bezpośredni kontakt z ośrodkowym układem nerwowym (OUN) pacjentów z A-T.

• Analiza funkcjonalnej ekspresji genów stresu oksydacyjnego i stanu zapalnego niskiego stopnia za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (RT-PCR) i cytometrycznego układu kulek.
• Aby scharakteryzować zmiany w ekspresji białek związane z AT, ilościową analizę proteomiczną płynu mózgowo-rdzeniowego opartą na LC/MS od pacjentów kontrolnych i AT
• Porównanie zmian poziomów ekspresji białek w płynie mózgowo-rdzeniowym z wynikami MRI w różnych grupach wiekowych klasycznej A-T.
• Aby określić potencjalne białka, których względne poziomy ekspresji można by wykorzystać jako zastępczy marker postępu choroby?
• Stworzenie systemu analizy na podstawie techniki multipleksowej ELISA w celu oceny potencjalnych kandydatów/zastępczych markerów progresji choroby w większej kohorcie pacjentów.