HYPOCHOL: een genetisch gebaseerde strategie om nieuwe doelen in het cholesterolmetabolisme te identificeren (HYPOCHOL)

Het doel is om 400 proefpersonen te rekruteren: 200 volwassen proefpersonen met familiale hypobetalipoproteïnemie (FHBL) (indexgevallen) plus 200 aanvullende verwante proefpersonen in ten minste 10 grote informatieve FHBL-families, waarin geen mutatie in FHBL-genen bekend is.

De patiëntenzorg wordt aangepast: de patiënt krijgt een Hospital Anxiety and Depression (HAD) vragenlijst (focus op depressief syndroom), een voedingsdagboek en wat extra bloedanalyse (inclusief genetische analyse).

Een van de belangrijkste problemen bij het rekruteren van FHBL-patiënten is het feit dat ze asymptomatisch zijn en dat FHBL door hun huisarts niet als een ernstige ziekte wordt aangemerkt.

Stap 1. Uitsluiten van mutaties in geselecteerde kandidaatgenen Als eerste benadering om kandidaatgenen te screenen en patiënten met bekende mutaties uit te sluiten, ontwikkelden de onderzoekers een aangepast ontwerp op basis van de Haloplex™-technologie (Agilent® Technologies) om high-throughput sequencing uit te voeren van de coderende regio's van 10 genen, waaronder die eerder beschreven in FHBL (apolipoproteïne B (APOB), Proproteïne convertase subtilisine/kexine type 9 (PCSK9)), Microsomaal triglyceride-overdrachtseiwit (MTP of ABL), chylomicron-retentieziekte (CMRD), Secretie-geassocieerd, Ras-gerelateerd GTPase (SARA2-gen), evenals 6 extra kandidaatgenen in het cholesterolmetabolisme (low density lipoprotein receptor (LDLR), Sortilin (SORT1), Inducible Degrader of the LDL receptor (IDOL), Cholesteryl ester transfer protein (CETP), Apolipoprotein E ( ApoE) en angiopoëtine-achtige proteïne 3 (ANGTPL3)). Alle gerekruteerde indexgevallen (n=200) zullen worden gegenotypeerd om alleen die te selecteren zonder mutaties in eerder beschreven genen, zijnde ongeveer 50% van ons indexgevalcohort.

Stap 2. Identificatie van informatieve families en exome-sequencing Bij patiënten zonder geïdentificeerde mutaties zullen de onderzoekers een familiale screening uitvoeren om andere gevallen van FHBL onder proband-verwanten te identificeren. Een analyse van nuchtere plasmalipidenparameters (totaal cholesterol (TC), High-density-lipoproteïne-cholesterol (HDL-C), Low-Density-lipoproteïnen (LDL-C) en triglyceriden (TG)) zal voor elke verwant worden uitgevoerd. Betrokken personen zullen worden bepaald door een spontaan LDL-C < 80 mg/dl en/of apoB < 50 mg/dl. Niet-aangedane proefpersonen daarentegen zullen LDL-C > 80 mg/dl en/of apoB > 50 mg/dl vertonen.

Voor grote families zullen de onderzoekers dan hele-exome-sequencing en koppelingsanalyse combineren om elke nieuwe genetische variant te identificeren die waarschijnlijk FHBL verklaart. Afhankelijk van de stamboom van de familie zal whole-exome sequencing (WES) worden uitgevoerd bij 2 tot 5 patiënten per familie. Alle verwanten zullen gegenotypeerd worden voor koppelingsanalyse.

Parallel aan deze genetische benadering zal een regionale epidemiologische analyse worden uitgevoerd om enkele geografische clusters met een hoge prevalentie van de ziekte te identificeren, zoals ontwikkeld in het project genaamd VaCaRMe (voor vasculaire en cardiale, respiratoire en metabolische overwonnen ziekten).

Een bijkomend doel, gebaseerd op een uitputtende fenotypering van FHBL-patiënten, is het onderzoeken van de veiligheid van een zeer laag LDL-C en het uitvoeren van enkele genotype-fenotype-correlaties bij patiënten met een FHBL-populatie."