HYPOCHOL: una estrategia basada en la genética para identificar nuevos objetivos en el metabolismo del colesterol (HYPOCHOL)

El objetivo es reclutar 400 sujetos: 200 sujetos adultos con hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL) (casos índice) más 200 sujetos relacionados adicionales en al menos 10 grandes familias informativas de FHBL, en las que no se conoce ninguna mutación en los genes FHBL.

La atención al paciente se modifica: el paciente tendrá un cuestionario de Ansiedad y Depresión Hospitalaria (HAD) (enfoque en el síndrome depresivo), un diario de alimentos y algunos análisis de sangre adicionales (incluido el análisis genético).

Uno de los principales problemas para reclutar pacientes con FHBL es el hecho de que son asintomáticos y que sus médicos generales no identifican a FHBL como una enfermedad grave.

Paso 1. Exclusión de mutaciones en genes candidatos seleccionados Como primer enfoque para examinar genes candidatos y excluir pacientes con mutaciones conocidas, los investigadores desarrollaron un diseño personalizado basado en la tecnología Haloplex™ (Agilent® Technologies) para realizar una secuenciación de alto rendimiento de las regiones codificantes de 10 genes, incluidos los descritos previamente en FHBL (apolipoproteína B (APOB), proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9)), proteína microsomal de transferencia de triglicéridos (MTP o ABL), enfermedad de retención de quilomicrones (CMRD), secreción asociada, GTPasa relacionada con Ras (gen SARA2), así como 6 genes candidatos adicionales en el metabolismo del colesterol (receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDLR), sortilina (SORT1), degradador inducible del receptor de LDL (IDOL), proteína de transferencia de éster de colesterol (CETP), apolipoproteína E ( ApoE) y la proteína 3 similar a la angiopoyetina (ANGTPL3)). Todos los casos índice reclutados (n=200) serán genotipados para seleccionar solo aquellos sin mutaciones en los genes descritos previamente, siendo aproximadamente el 50% de nuestra cohorte de casos índice.

Paso 2. Identificación de familias informativas y secuenciación del exoma En pacientes sin mutaciones identificadas, los investigadores realizarán un cribado familiar para identificar otros casos de FHBL entre los familiares probandos. Se realizará un análisis de los parámetros de lípidos plasmáticos en ayunas (colesterol total (CT), colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-C), lipoproteínas de baja densidad (LDL-C) y triglicéridos (TG)) para cada relacionado. Los sujetos afectados estarán determinados por un LDL-C espontáneo < 80 mg/dl y/o apoB < 50 mg/dl. Por el contrario, los sujetos no afectados mostrarán LDL-C > 80 mg/dl y/o apoB > 50 mg/dl.

Para las familias numerosas, los investigadores combinarán la secuenciación del exoma completo y el análisis de ligamiento para identificar cualquier variante genética novedosa que probablemente explique la FHBL. Dependiendo del pedigrí familiar, la secuenciación del exoma completo (WES) se realizará en 2 a 5 pacientes por familia. Todos los parientes serán genotipados para el análisis de ligamiento.

Paralelamente a este enfoque genético, se realizará un análisis epidemiológico regional para identificar algunos conglomerados geográficos con una alta prevalencia de la enfermedad, como se desarrolla en el proyecto denominado VaCaRMe (para enfermedades vasculares y cardíacas, respiratorias y metabólicas superadas)

Un objetivo adicional, basado en un fenotipado exhaustivo de pacientes con FHBL, es investigar la seguridad del LDL-C muy bajo y realizar algunas correlaciones genotipo-fenotipo en pacientes con población FHBL".