HYPOCHOL: Uma estratégia baseada em genes para identificar novos alvos no metabolismo do colesterol (HYPOCHOL)

O objetivo é recrutar 400 indivíduos: 200 indivíduos adultos com hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL) (casos índices) mais 200 indivíduos relacionados adicionais em pelo menos 10 grandes famílias informativas de FHBL, nas quais não há mutação conhecida nos genes FHBL.

O atendimento ao paciente é modificado: o paciente terá um questionário Hospitalar de Ansiedade e Depressão (HAD) (foco na síndrome depressiva), um diário alimentar e algumas análises de sangue adicionais (incluindo análise genética).

Uma das principais questões para recrutar pacientes com FHBL é o fato de serem assintomáticos e que o FHBL não seja identificado como uma doença grave por seus médicos gerais.

Passo 1. Excluindo mutações em genes candidatos selecionados Como uma primeira abordagem para rastrear genes candidatos e excluir pacientes com mutações conhecidas, os pesquisadores desenvolveram um design personalizado baseado na tecnologia Haloplex™ (Agilent® Technologies) para realizar o sequenciamento de alto rendimento das regiões codificantes de 10 genes, incluindo aqueles previamente descritos em FHBL (apolipoproteína B (APOB), Proproteína convertase subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9)), proteína de transferência microssomal de triglicerídeos (MTP ou ABL), doença de retenção de quilomícrons (CMRD), secreção associada, GTPase relacionada a Ras (gene SARA2), bem como 6 genes candidatos adicionais no metabolismo do colesterol (receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDLR), Sortilin (SORT1), Degradador induzível do receptor de LDL (IDOL), Proteína de transferência de éster de colesterol (CETP), Apolipoproteína E ( ApoE) e proteína semelhante à angiopoietina 3 (ANGTPL3)). Todos os casos índice recrutados (n=200) serão genotipados para selecionar apenas aqueles sem mutações nos genes previamente descritos, sendo aproximadamente 50% de nossa coorte de casos índice.

Passo 2. Identificação de famílias informativas e sequenciamento do exoma Em pacientes sem mutações identificadas, os investigadores realizarão uma triagem familiar para identificar outros casos de FHBL entre parentes probandos. Uma análise dos parâmetros lipídicos plasmáticos em jejum (colesterol total (CT), colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL-C), lipoproteínas de baixa densidade (LDL-C) e triglicerídeos (TG)) será realizada para cada relacionado. Os indivíduos afetados serão determinados por um LDL-C espontâneo < 80 mg/dl e/ou apoB < 50 mg/dl. Em contraste, indivíduos não afetados apresentarão LDL-C > 80 mg/dl e/ou apoB > 50 mg/dl.

Para famílias grandes, os investigadores combinarão o sequenciamento completo do exoma e a análise de ligação para identificar qualquer nova variante genética que provavelmente explique o FHBL. Dependendo do heredograma da família, o sequenciamento completo do exoma (WES) será realizado em 2 a 5 pacientes por família. Todos os parentes serão genotipados para análise de ligação.

Paralelamente a esta abordagem genética, será realizada uma análise epidemiológica regional para identificar alguns agrupamentos geográficos com alta prevalência da doença, conforme desenvolvido no projeto denominado VaCaRMe (para doenças vasculares e cardíacas, respiratórias e metabólicas superadas)

Um objetivo adicional, baseado em uma fenotipagem exaustiva de pacientes com FHBL, é investigar a segurança do LDL-C muito baixo e realizar algumas correlações genótipo-fenótipo em pacientes com população de FHBL."