Klinische studie van mesenchymale stamcellen die worden gebruikt bij de reconstructiechirurgie van de supraspinatus-spierlaesies

Het prospectief gerandomiseerde onderzoek wordt uitgevoerd op de afdelingen orthopedie en traumatologie, hematologie en radiologie. 50 patiënten namen deel aan de studie. Van de 25 patiënten in beide groepen bestond groep I (kreeg tijdens de operatie het concentraat van merg-MSC's in het pees-botcontactpunt op de plaats van de hechting) uit 7 vrouwen en 18 mannen (gemiddelde leeftijd 51,2 jaar). II (zonder gebruik van MSC's) bestond uit 15 vrouwen en 10 mannen (gemiddelde leeftijd 50,5 jaar). Selectie van patiënten in beide groepen werd uitgevoerd met behulp van permutatieblok randomisatie computersoftware Random Number Generator Software 7.0. Alle röntgenfoto's/MRI/CT-resultaten werden geëvalueerd door een ervaren radioloog gespecialiseerd in musculoskeletale pathologieën, die blind was voor beide patiëntengroepen. Alvorens aan het onderzoek deel te nemen, tekenden de patiënten een geïnformeerde toestemming opgesteld door de ethische commissie van het plaatselijke ziekenhuis en werden ze willekeurig toegewezen aan een van de behandelingsmogelijkheden met behulp van de Random Number Generator Software 7.0 volgens de methode 1:1.

Voorafgaand aan de chirurgische behandeling vulden patiënten een vragenlijst in met VAS-score, ASES-score (American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form) en de Constant-score. Verdere klinische controle met het invullen van deze vragenlijsten is 6 maanden na de operatie, 1 jaar na de operatieve behandeling, 2, 5 en tien jaar postoperatief. Twee jaar na de operatie wordt een MRI-onderzoek van het schoudergewricht uitgevoerd. Alle poliklinische klinische evaluaties tijdens het onderzoek werden uitgevoerd door de orthopedisch chirurg die blind was voor beide patiëntengroepen.

De eigenlijke therapie was als volgt: open chirurgie werd voorafgegaan door een standaard diagnostische artroscopie, die werd uitgevoerd vanaf het achterste portaal voor optica en het voorste portaal voor arthroscopische instrumenten. De pezen van de rotator cuff werden van beide kanten beoordeeld - intra-articulair en subacromiaal. Om cuff peesletsel perioperatief te evalueren en de ruptuurbreedte te meten, werd een speciale arthroscopische haak gebruikt, gekalibreerd in 1 mm. Om de vorm van de breuk te evalueren, werd de classificatie van Ellman - Gartsman gebruikt. Chirurgische behandeling van gewonde pezen van de rotator cuff werd uitgevoerd in de strandstoelpositie van de patiënt, door middel van de deltaspier-spleetbenadering. Na evaluatie van de omvang en locatie van de cuff peeslaesie werd 10 ml beenmergbloed geaspireerd (uit de humeruskop via dezelfde chirurgische benadering) in een injectiespuit van 20 ml die voorgevuld was met 0,5 ml heparine met de Yamshidi-naald. Aspiratie van het beenmerg werd uitgevoerd door een chirurg. Uit één botpunctie werd maximaal 3 ml mergbloed afgezogen. Vervolgens werd het aspiraat gecentrifugeerd in een met citraat gevuld reageerbuisje van 10 ml Monovette. Geselecteerd centrifugatieregime bestond uit centrifugatie met een gradiënt van 15 minuten bij 200 g RCF (relatieve centrifugale kracht). Na zo'n centrifugatie wordt de buisinhoud in drie delen verdeeld. De bovenste laag bestaat uit het bloedplaatjesrijke plasma (PRP), de middelste laag van de buffy coat met het dominante aandeel leukocyten en de onderste laag wordt gevormd door gesedimenteerde erytrocyten. Met behulp van een steriele laboratoriumpipet werd een collectie van de buffy coat uitgevoerd. MSC's vertegenwoordigden 0,01 tot 0,02 % van alle nucleaire elementen van de buffy coat, dat is ongeveer 10 x 106/l. Het MSC-concentraat (vergelijkbaar met gewrichtsvloeistof in consistentie en kleur) werd geïmpregneerd in de collageenpleister Hypro-Sorb F (Otrokovice, Tsjechië) met afmetingen van 1x2 cm. De collageenpleister als drager van het MSC-concentraat werd gebruikt om ervoor te zorgen dat het op de gewenste plaats wordt vastgehouden. Dit materiaal werd vervolgens tussen de pees en het bot ingebracht, op de plaats waar de pezen van de rotatorcuff (voetafdruk) opnieuw werden vastgezet, voordat de schroefdraad van de ankers werd vastgedraaid. Fixatie van de pees aan het bot vond plaats door middel van een dubbele rijmethode met behulp van resorbeerbare fixatieankers BioComposite Corkscrew (Arthrex, München, Duitsland). In al deze behandelde gevallen werd de pees gefixeerd op de plaats van de oorspronkelijke aanhechting zonder enige spanning en zonder de noodzaak van abductie van de arm boven 60 graden. Alle patiënten ondergingen Neer acromioplastiek voor een vergroting van de subacromiale ruimte. Deze procedure werd gevolgd door de standaard chirurgische wondsluiting in alle anatomische lagen, steriel wondverband en het aanbrengen van de abductieorthese. Alle patiënten werden geopereerd door dezelfde orthopedisch chirurg met dezelfde chirurgische techniek. Er werd gekozen voor open chirurgie in plaats van artroscopie vanwege de veiligere fixatie van de MSCs-drager onder de opnieuw ingebrachte pees en om het risico te verkleinen dat het MSCs-concentraat tijdens de artroscopie uit de drager wegspoelt.

Chirurgische behandeling van patiënten in Groep II was identiek aan die in Groep I, met uitzondering van het opzuigen van beenmerg uit de humeruskop en het daaropvolgend aanbrengen van het met MSC's doordrenkte scaffold in het grensvlak tussen pees en bot.

Abductiefixatie duurde 4 weken. De eerste postoperatieve dag werd begonnen met passief bewegen over de horizontale lijn onder begeleiding van een fysiotherapeut. Na het verwijderen van de fixatie begon een actieve revalidatie, dat wil zeggen een volledig scala aan bewegingsoefeningen die 6 weken na de operatie actief worden gedaan. Volledige belasting was toegestaan ​​12 weken na de operatie.

De poliklinische follow-up vond plaats volgens bovenstaand schema. Om de integriteit van de pees op het punt van insertie in de tuberositas major van de humerus te controleren, werd 2 jaar postoperatief een MRI van het schoudergewricht uitgevoerd. Zowel preoperatieve als postoperatieve MRI-onderzoeken werden uitgevoerd met een 1,5T high-field scanner, in sagittale, coronale en axiale vlakken, in T1- en T2-gewogen vetverzadigde sequenties (MRI-artrografie met gadollinium als contrastmiddel). Alle MRI-resultaten werden geëvalueerd door een ervaren radioloog die gespecialiseerd is in musculoskeletale pathologieën. Hij evalueerde peesintegriteit, aanwezigheid en lokalisatie van volledige retraor, pees- en spiergrenzen, en aanwezigheid van abnormale artefacten.

De primaire hypothese van deze studie is dat het gebruik van mesenchymale stamcellen bij de supraspinatus peesreconstructiechirurgie een positief effect zal hebben bij de beoordeling van zowel subjectieve als objectieve scoresystemen, en ook wat betreft het verminderen van het aantal peesrerupturen in vergelijking met de patiëntenpopulatie waarin geen mesenchymale stamcellen werden gebruikt. Alle gegevens werden statistisch geanalyseerd met het programma STATISTICA 9.0. Om de resultaten van de VAS-score, de Constant-score en de ASES-score preoperatief en een jaar na de operatie te vergelijken. Student's t-test werd gebruikt om de incidentie van rerupturen tussen beide groepen patiënten 2 jaar postoperatief te vergelijken Chi -kwadraattoets werd gebruikt. Het significantieniveau werd bepaald op p