Studio clinico sulle cellule staminali mesenchimali utilizzate nella chirurgia ricostruttiva delle lesioni del muscolo sovraspinato

Lo studio prospettico randomizzato viene svolto presso i reparti di ortopedia e traumatologia, ematologia e radiologia. 50 pazienti sono stati inclusi nello studio. Dei 25 pazienti in entrambi i gruppi, il gruppo I (ha ricevuto il concentrato di MSC midollari nel punto di contatto tendine-osso nel sito della sutura durante l'intervento chirurgico) consisteva di 7 donne e 18 uomini (età media 51,2 anni), gruppo II (senza l'uso di MSC) era composto da 15 donne e 10 uomini (età media 50,5 anni). La selezione dei pazienti in entrambi i gruppi è stata eseguita utilizzando il software per computer Random Number Generator Software 7.0 per la randomizzazione del blocco di permutazione. Tutti i risultati radiografici/MRI/TC sono stati valutati da un radiologo esperto specializzato in patologie muscoloscheletriche, che era cieco per entrambi i gruppi di pazienti. Prima di entrare nello studio, i pazienti hanno firmato un consenso informato creato dal Comitato Etico dell'ospedale locale e sono stati assegnati in modo casuale a una delle possibilità di trattamento con l'uso del software Random Number Generator 7.0 con il metodo 1:1.

Prima del trattamento chirurgico, i pazienti hanno compilato un questionario con il punteggio VAS, il punteggio ASES (American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form) e il punteggio Constant. Ulteriore controllo clinico con la compilazione di questi questionari è 6 mesi dopo l'intervento chirurgico, 1 anno dopo il trattamento chirurgico, 2, 5 e dieci anni dopo l'intervento. Due anni dopo l'intervento viene eseguito l'esame MRI dell'articolazione della spalla. Tutte le valutazioni cliniche ambulatoriali durante lo studio sono state eseguite dal chirurgo ortopedico in cieco per entrambi i gruppi di pazienti.

La terapia vera e propria è stata la seguente: la chirurgia a cielo aperto è stata preceduta da un'artroscopia diagnostica standard, che è stata eseguita dal portale posteriore per l'ottica e dal portale anteriore per gli strumenti artroscopici. I tendini della cuffia dei rotatori sono stati valutati da entrambi i lati: intraarticolare e subacromiale. Per valutare la lesione del tendine della cuffia nel perioperatorio e per misurare l'ampiezza della rottura, è stato utilizzato uno speciale uncino artroscopico calibrato in 1 mm. Per valutare la forma della rottura è stata utilizzata la classificazione di Ellman - Gartsman. Il trattamento chirurgico dei tendini danneggiati della cuffia dei rotatori è stato eseguito nella posizione della sedia a sdraio del paziente, mediante l'approccio del muscolo deltoide diviso. Dopo aver valutato l'estensione e la posizione della lesione del tendine della cuffia, è stata eseguita l'aspirazione di 10 ml di sangue del midollo osseo (dalla testa omerale attraverso lo stesso approccio chirurgico) in una siringa da 20 ml preriempita con 0,5 ml di eparina con l'ago di Yamshidi. L'aspirazione del midollo osseo è stata eseguita dal chirurgo. Da una puntura ossea sono stati aspirati al massimo 3 ml di sangue midollare. Segue centrifugazione dell'aspirato in provetta Monovette da 10 ml riempita di citrato. Il regime di centrifugazione selezionato consisteva in una centrifugazione in gradiente di 15 minuti a 200 g RCF (forza centrifuga relativa). Dopo tale centrifugazione il contenuto della provetta viene diviso in tre parti. Lo strato superiore è costituito dal plasma ricco di piastrine (PRP), lo strato intermedio del buffy coat con la proporzione dominante di leucociti e lo strato inferiore è formato da eritrociti sedimentati. Utilizzando una pipetta da laboratorio sterile, è stata eseguita una raccolta del buffy coat. Le MSC rappresentavano dallo 0,01 allo 0,02% di tutti gli elementi nucleari del buffy coat, cioè circa 10 x 106/l. Il concentrato di MSC (simile al liquido sinoviale per consistenza e colore) è stato impregnato nel cerotto di collagene Hypro-Sorb F (Otrokovice, Repubblica Ceca) di dimensioni 1x2 cm. Il cerotto di collagene come trasportatore del concentrato di MSC è stato utilizzato per assicurarne la ritenzione nel punto desiderato. Questo materiale è stato quindi inserito tra il tendine e l'osso, nel punto di rifissaggio dei tendini della cuffia dei rotatori (impronta) prima di stringere i fili degli ancoraggi. La fissazione del tendine all'osso è stata effettuata con un metodo a doppia fila con l'uso di ancoraggi di fissaggio riassorbibili BioComposite Cavatappi ( Arthrex, Monaco, Germania ). In tutti questi casi trattati il ​​tendine è stato fissato al posto dell'attaccamento originale senza alcuna sollecitazione e senza necessità di abduzione del braccio oltre i 60 gradi. Tutti i pazienti sono stati sottoposti ad acromioplastica di Neer per un aumento dello spazio subacromiale. Questa procedura è stata seguita dalla chiusura chirurgica standard della ferita in tutti gli strati anatomici, dalla medicazione sterile della ferita e dall'applicazione dell'ortesi di abduzione. Tutti i pazienti sono stati operati dallo stesso chirurgo ortopedico con la stessa tecnica chirurgica. La chirurgia a cielo aperto invece dell'artroscopia è stata scelta per la fissazione più sicura del carrier di MSC sotto il tendine reinserito e per ridurre il rischio di dilavamento del concentrato di MSC dal carrier durante l'artroscopia.

Il trattamento chirurgico dei pazienti del Gruppo II è stato identico a quello del Gruppo I, ad eccezione dell'aspirazione del midollo osseo dalla testa omerale e della successiva applicazione dello scaffold saturo di MSC nell'interfaccia tendine/osso.

La fissazione dell'abduzione è durata 4 settimane. Il movimento passivo sopra la linea orizzontale sotto la guida di un fisioterapista è stato avviato il primo giorno postoperatorio. Dopo aver rimosso la fissazione, è iniziata una riabilitazione attiva, ovvero una gamma completa di esercizi di movimento eseguiti attivamente 6 settimane dopo l'intervento. Il pieno carico è stato consentito 12 settimane dopo l'intervento.

Il follow-up ambulatoriale si è svolto secondo il programma sopra indicato. Per verificare l'integrità del tendine nel punto di inserimento nella grande tuberosità dell'omero, è stata eseguita una risonanza magnetica dell'articolazione della spalla 2 anni dopo l'intervento. Entrambi gli esami MRI preoperatori e postoperatori sono stati eseguiti con uno scanner ad alto campo da 1,5 T, nei piani sagittale, coronale e assiale, in sequenze di grassi saturi pesati in T1 e T2 (artrografia MRI utilizzando il gadollinio come mezzo di contrasto). Tutti i risultati della risonanza magnetica sono stati valutati da un radiologo esperto specializzato in patologie muscoloscheletriche. Ha valutato l'integrità del tendine, la presenza e la localizzazione di una lesione completa, i bordi tendinei e muscolari e la presenza di artefatti anomali.

L'ipotesi principale di questo studio è che l'uso di cellule staminali mesenchimali nell'intervento di ricostruzione del tendine sovraspinato avrà un effetto positivo nella valutazione dei sistemi di punteggio sia soggettivi che oggettivi, e anche in termini di riduzione del numero di rotture del tendine rispetto al popolazione di pazienti in cui non sono state utilizzate cellule staminali mesenchimali. Tutti i dati sono stati analizzati statisticamente con il programma STATISTICA 9.0. Per confrontare i risultati del punteggio VAS, del punteggio Constant e del punteggio ASES prima dell'intervento e un anno dopo l'intervento chirurgico è stato utilizzato il test t di Student, per confrontare l'incidenza di recidive tra entrambi i gruppi di pazienti 2 anni dopo l'intervento Chi è stato utilizzato il test del quadrato. Il livello di significatività è stato determinato a p