Klinische Studie zu mesenchymalen Stammzellen, die in der Rekonstruktionschirurgie von Läsionen des Supraspinatus-Muskels verwendet werden

Die prospektive randomisierte Studie wird an orthopädischen und traumatologischen, hämatologischen und radiologischen Abteilungen durchgeführt. 50 Patienten wurden in die Studie eingeschlossen. Von den 25 Patienten in beiden Gruppen bestand Gruppe I (erhielt das Konzentrat von Mark-MSCs in den Sehnen-Knochen-Kontaktpunkt an der Stelle der Naht während der Operation) aus 7 Frauen und 18 Männern (Durchschnittsalter 51,2 Jahre), Gruppe II (ohne Einsatz von MSCs) bestand aus 15 Frauen und 10 Männern (Durchschnittsalter 50,5 Jahre). Die Auswahl der Patienten in beiden Gruppen wurde unter Verwendung der Computersoftware Random Number Generator Software 7.0 für die Permutationsblock-Randomisierung durchgeführt. Alle Röntgenbilder/MRT/CT-Ergebnisse wurden von einem erfahrenen Radiologen ausgewertet, der auf Muskel-Skelett-Pathologien spezialisiert ist und für beide Patientengruppen verblindet war. Vor Eintritt in die Studie unterzeichneten die Patienten eine von der Ethikkommission des örtlichen Krankenhauses erstellte Einverständniserklärung und wurden unter Verwendung der Random Number Generator Software 7.0 nach der Methode 1:1 zufällig einer der Behandlungsmöglichkeiten zugewiesen.

Vor der chirurgischen Behandlung füllten die Patienten einen Fragebogen mit VAS-Score, ASES-Score (American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form) und dem Constant-Score aus. Weitere klinische Kontrollen mit Ausfüllen dieser Fragebögen erfolgen 6 Monate nach der Operation, 1 Jahr nach der chirurgischen Behandlung, 2, 5 und 10 Jahre postoperativ. Zwei Jahre nach der Operation wird eine MRT-Untersuchung des Schultergelenks durchgeführt. Alle ambulanten klinischen Untersuchungen während der Studie wurden vom orthopädischen Chirurgen durchgeführt, der für beide Patientengruppen verblindet war.

Die eigentliche Therapie sah wie folgt aus: Der offenen Operation ging eine standardmäßige diagnostische Arthroskopie voraus, die vom hinteren Portal für die Optik und vom vorderen Portal für arthroskopische Instrumente durchgeführt wurde. Die Sehnen der Rotatorenmanschette wurden von beiden Seiten – intraartikulär und subakromial – beurteilt. Zur perioperativen Beurteilung der Cuff-Sehnenverletzung und zur Messung der Rupturbreite wurde ein spezieller, auf 1 mm kalibrierter Arthroskophaken verwendet. Zur Beurteilung der Rupturform wurde die Klassifikation nach Ellman-Gartsman verwendet. Die operative Versorgung verletzter Sehnen der Rotatorenmanschette erfolgte in Beach-Chair-Position des Patienten über den Deltoideus-Split-Zugang. Nach Beurteilung des Ausmaßes und der Lokalisation der Cuff-Sehnenläsion erfolgte die Aspiration von 10 ml Knochenmarkblut (aus dem Humeruskopf über denselben chirurgischen Zugang) in eine 20-ml-Spritze, die mit 0,5 ml Heparin mit der Yamshidi-Nadel vorgefüllt war. Die Aspiration des Knochenmarks wurde vom Chirurgen durchgeführt. Aus einer Knochenpunktion wurden maximal 3 ml Markblut abgesaugt. Es folgte eine Zentrifugation des Aspirats in einer mit Citrat gefüllten 10-ml-Reagenzglas-Monovette. Das ausgewählte Zentrifugationsregime bestand aus einer 15-minütigen Gradientenzentrifugation bei 200 g RCF (relative Zentrifugalkraft). Nach einer solchen Zentrifugation wird der Röhrcheninhalt in drei Teile geteilt. Die obere Schicht besteht aus dem plättchenreichen Plasma (PRP), die mittlere Schicht aus dem Buffy Coat mit dem dominierenden Anteil an Leukozyten und die untere Schicht aus sedimentierten Erythrozyten. Unter Verwendung einer sterilen Laborpipette wurde eine Sammlung des Buffy-Coats durchgeführt. MSCs repräsentierten 0,01 bis 0,02 % aller nuklearen Elemente des Buffy Coat, das sind etwa 10 x 106 / l. Das MSC-Konzentrat (ähnlich Synovialflüssigkeit in Konsistenz und Farbe) wurde in das Kollagenpflaster Hypro-Sorb F (Otrokovice, Tschechische Republik) mit den Abmessungen 1 x 2 cm imprägniert. Das Kollagenpflaster als Träger des MSC-Konzentrats wurde verwendet, um sicherzustellen, dass es an der gewünschten Stelle verbleibt. Dieses Material wurde dann zwischen Sehne und Knochen an der Stelle der erneuten Fixierung der Sehnen der Rotatorenmanschette ( Fußabdruck ) eingeführt, bevor die Fäden der Anker festgezogen wurden. Die Fixierung der Sehne am Knochen erfolgte durch ein Doppelreihenverfahren unter Verwendung von resorbierbaren Fixierungsankern BioComposite Corkscrew (Arthrex, München, Deutschland). In allen derartig behandelten Fällen wurde die Sehne ohne Belastung und ohne die Notwendigkeit einer Abduktion des Arms über 60 Grad an der Stelle der ursprünglichen Befestigung fixiert. Alle Patienten erhielten eine Neer-Akromioplastik zur Vergrößerung des subakromialen Raums. Anschließend erfolgte der übliche chirurgische Wundverschluss in allen anatomischen Schichten, die sterile Wundversorgung und das Anlegen der Abduktionsorthese. Alle Patienten wurden von demselben Orthopäden mit derselben Operationstechnik operiert. Anstelle einer Arthroskopie wurde ein offener chirurgischer Eingriff gewählt, da der MSC-Träger sicherer unter der reinserierten Sehne fixiert werden kann und um das Risiko einer Auswaschung des MSC-Konzentrats aus dem Träger während der Arthroskopie zu verringern.

Die chirurgische Behandlung der Patienten in Gruppe II war identisch wie in Gruppe I, mit Ausnahme der Aspiration von Knochenmark aus dem Humeruskopf und der anschließenden Applikation des mit MSCs gesättigten Scaffolds in die Sehne/Knochen-Grenzfläche.

Die Abduktionsfixierung dauerte 4 Wochen. Die passive Bewegung über die horizontale Linie unter Anleitung eines Physiotherapeuten wurde am ersten postoperativen Tag eingeleitet. Nach dem Entfernen der Fixierung begann eine aktive Rehabilitation, d. h. eine vollständige Palette von Bewegungsübungen, die 6 Wochen nach der Operation aktiv durchgeführt wurden. Vollbelastung war 12 Wochen nach der Operation erlaubt.

Die ambulante Nachsorge erfolgte nach dem oben genannten Schema. Um die Integrität der Sehne am Ansatzpunkt in das Tuberculum majus zu überprüfen, wurde 2 Jahre postoperativ eine MRT des Schultergelenks durchgeführt. Sowohl prä- als auch postoperative MRT-Untersuchungen wurden mit einem 1,5-T-Hochfeldscanner in sagittaler, koronarer und axialer Ebene in T1- und T2-gewichteten fettgesättigten Sequenzen durchgeführt (MRT-Arthrographie mit Gadollinium als Kontrastmittel). Alle MRT-Ergebnisse wurden von einem erfahrenen Radiologen ausgewertet, der auf Erkrankungen des Bewegungsapparates spezialisiert ist. Er bewertete die Sehnenintegrität, das Vorhandensein und die Lokalisation eines vollständigen Retars, Sehnen- und Muskelränder und das Vorhandensein abnormaler Artefakte.

Die primäre Hypothese dieser Studie ist, dass die Verwendung mesenchymaler Stammzellen bei der Rekonstruktion der Supraspinatus-Sehne einen positiven Effekt bei der Bewertung sowohl subjektiver als auch objektiver Scoring-Systeme und auch im Hinblick auf die Verringerung der Anzahl von Sehnenrissen im Vergleich zu haben wird Patientenpopulation, in der keine mesenchymalen Stammzellen verwendet wurden. Alle Daten wurden mit dem Programm STATISTICA 9.0 statistisch analysiert. Um die Ergebnisse des VAS-Scores, des Constant-Scores und des ASES-Scores präoperativ und ein Jahr nach der Operation zu vergleichen, wurde der Student-t-Test verwendet, um die Inzidenz von Rerupturen zwischen beiden Patientengruppen 2 Jahre postoperativ zu vergleichen Chi -Quadrattest verwendet. Das Signifikanzniveau wurde auf p bestimmt