Estudo Clínico de Células Tronco Mesenquimais Utilizadas na Cirurgia de Reconstrução das Lesões do Músculo Supraespinal

O estudo prospectivo randomizado é realizado nos departamentos de ortopedia e traumatologia, hematologia e radiologia. 50 pacientes foram incluídos no estudo. Dos 25 pacientes em ambos os grupos, o Grupo I (recebeu o concentrado de medula MSCs no ponto de contato tendão-osso no local da sutura durante a cirurgia) consistiu de 7 mulheres e 18 homens (média de idade 51,2 anos), Grupo II (sem uso de MSCs) foi composto por 15 mulheres e 10 homens (média de idade 50,5 anos). A seleção de pacientes em ambos os grupos foi realizada usando o software de computador Random Number Generator Software 7.0. Todos os resultados de radiografias/RM/TC foram avaliados por um radiologista experiente e especializado em patologias musculoesqueléticas, que desconhecia os dois grupos de pacientes. Antes de entrar no estudo, os pacientes assinaram um termo de consentimento informado criado pelo Comitê de Ética do hospital local e foram aleatoriamente designados para uma das possibilidades de tratamento com o uso do Random Number Generator Software 7.0 pelo método 1:1.

Antes do tratamento cirúrgico, os pacientes preencheram um questionário com escore VAS, escore ASES (American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form) e escore de Constant. O controle clínico adicional com o preenchimento desses questionários é de 6 meses após a cirurgia, 1 ano após o tratamento cirúrgico, 2, 5 e 10 anos após a cirurgia. Dois anos após a cirurgia, é realizado o exame de ressonância magnética da articulação do ombro. Todas as avaliações clínicas ambulatoriais durante o estudo foram realizadas pelo cirurgião ortopédico cego para os dois grupos de pacientes.

A terapia real foi a seguinte: a cirurgia aberta foi precedida por uma artroscopia diagnóstica padrão, que foi realizada a partir do portal posterior para ótica e portal anterior para instrumentos artroscópicos. Os tendões do manguito rotador foram avaliados de ambos os lados - intra-articular e subacromial. Para avaliar a lesão do tendão do manguito no perioperatório e para medir a largura da ruptura, foi utilizado um gancho artroscópico especial calibrado em 1 mm. Para avaliar a forma da ruptura, foi utilizada a classificação de Ellman - Gartsman. O tratamento cirúrgico dos tendões lesados ​​do manguito rotador foi realizado na posição de cadeira de praia do paciente, pela abordagem da divisão do músculo deltóide. Após avaliação da extensão e localização da lesão do tendão do manguito, foi feita a aspiração de 10 ml de sangue da medula óssea (da cabeça umeral pela mesma via cirúrgica) para uma seringa de 20 ml pré-preenchida com 0,5 ml de heparina com a agulha Yamshidi. A aspiração da medula óssea foi realizada pelo cirurgião. De uma punção óssea foram aspirados no máximo 3 ml de sangue da medula. Seguiu-se a centrifugação do aspirado em tubo de ensaio Monovette de 10 ml preenchido com citrato. O regime de centrifugação selecionado consistiu em centrifugação gradiente de 15 minutos a 200 g RCF (força centrífuga relativa). Após tal centrifugação, o conteúdo do tubo é dividido em três partes. A camada superior é constituída pelo plasma rico em plaquetas (PRP), a camada intermediária pela buffy coat com proporção dominante de leucócitos, e a camada inferior é formada por eritrócitos sedimentados. Utilizando uma pipeta de laboratório estéril, foi realizada a coleta do buffy coat. As MSCs representaram 0,01 a 0,02 % de todos os elementos nucleares do buffy coat, ou seja, cerca de 10 x 106 / l. O concentrado de MSCs (semelhante ao líquido sinovial em consistência e cor) foi impregnado no adesivo de colágeno Hypro-Sorb F (Otrokovice, República Tcheca) de dimensões 1x2 cm. O patch de colágeno como carreador do concentrado de MSCs foi utilizado para garantir sua retenção no local desejado. Esse material era então inserido entre o tendão e o osso, no local de refixação dos tendões do manguito rotador (footprint) antes de apertar os fios das âncoras. A fixação do tendão ao osso foi feita pelo método de fileira dupla com uso de âncoras de fixação absorvíveis BioComposite Corkscrew ( Arthrex, Munique, Alemanha ). Em todos os casos tratados, o tendão foi fixado no local de fixação original sem nenhum estresse e sem a necessidade de abdução do braço acima de 60 graus. Todos os pacientes foram submetidos à acromioplastia de Neer para aumento do espaço subacromial. Este procedimento foi seguido pelo fechamento padrão da ferida cirúrgica em todas as camadas anatômicas, curativo estéril da ferida e aplicação de órtese de abdução. Todos os pacientes foram operados pelo mesmo cirurgião ortopédico com a mesma técnica cirúrgica. Optou-se por cirurgia aberta em vez de artroscopia devido à fixação mais segura do portador de MSCs sob o tendão reinserido e para reduzir o risco de lavagem do concentrado de MSCs do portador durante a artroscopia.

O tratamento cirúrgico dos pacientes do Grupo II foi idêntico ao do Grupo I, exceto a aspiração da medula óssea da cabeça umeral e posterior aplicação do scaffold saturado com MSCs na interface tendão/osso.

A fixação da abdução durou 4 semanas. O movimento passivo sobre a linha horizontal sob a orientação de um fisioterapeuta foi iniciado no primeiro dia de pós-operatório. Após a remoção da fixação, iniciou-se uma reabilitação ativa, ou seja, uma amplitude completa de exercícios de movimento feitos ativamente 6 semanas após a cirurgia. A carga total foi permitida 12 semanas após a cirurgia.

O acompanhamento ambulatorial ocorreu de acordo com o cronograma mencionado acima. Para verificar a integridade do tendão no ponto de inserção na tuberosidade maior do úmero, a ressonância magnética da articulação do ombro foi realizada 2 anos após a cirurgia. Ambos os exames de ressonância magnética pré e pós-operatórios foram realizados com um scanner de alto campo de 1,5T, nos planos sagital, coronal e axial, em sequências T1 e T2 saturadas de gordura (artrografia de ressonância magnética usando gadolínio como meio de contraste). Todos os resultados de ressonância magnética foram avaliados por um radiologista experiente e especializado em patologias musculoesqueléticas. Ele avaliou a integridade do tendão, presença e localização de ruptura completa, bordas tendinosas e musculares e presença de artefatos anormais.

A hipótese primária deste estudo é que o uso de células-tronco mesenquimais na cirurgia de reconstrução do tendão do supraespinal terá um efeito positivo na avaliação de sistemas de pontuação tanto subjetivos quanto objetivos, e também em termos de redução do número de rerrupturas do tendão em comparação com o população de pacientes em que não foram utilizadas células-tronco mesenquimais. Todos os dados foram analisados ​​estatisticamente com o programa STATISTICA 9.0. Para comparar os resultados do escore VAS, escore Constant e escore ASES no pré-operatório e um ano após a cirurgia, foi utilizado o teste t de Student, para comparar a incidência de rerrupturas entre os dois grupos de pacientes 2 anos após a cirurgia Chi - teste do quadrado foi usado. O nível de significância foi determinado em p