Klinisk studie på mesenkymala stamceller som används vid rekonstruktionskirurgi av Supraspinatus muskelskador

Den prospektiva randomiserade studien genomförs vid ortopediska och traumatologiska, hematologiska och röntgenavdelningar. 50 patienter ingick i studien. Av de 25 patienterna i båda grupperna bestod grupp I (fick koncentratet av märg-MSC in i senan-benskontaktpunkten vid suturstället under operationen) av 7 kvinnor och 18 män (medelålder 51,2 år), grupp II (utan användning av MSCs) bestod av 15 kvinnor och 10 män (medelålder 50,5 år). Urval av patienter i båda grupperna utfördes med användning av permutationsblocksrandomiseringsdatorprogramvara Random Number Generator Software 7.0. Alla röntgenbilder/MRI/CT-resultat utvärderades av en erfaren radiolog specialiserad på muskuloskeletala patologier, som var blind för båda grupperna av patienter. Innan de gick in i studien undertecknade patienterna ett informerat samtycke skapat av den etiska kommittén på det lokala sjukhuset och tilldelades slumpmässigt en av behandlingsmöjligheterna med användning av Random Number Generator Software 7.0 enligt metoden 1:1.

Före den kirurgiska behandlingen fyllde patienterna i ett frågeformulär med VAS-poäng, ASES-poäng (American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form) och Constant-poäng. Ytterligare klinisk kontroll med att fylla i dessa enkäter är 6 månader efter operation, 1 år efter kirurgisk behandling, 2, 5 och tio år postoperativt. Två år efter operationen görs MR-undersökning av axelleden. Alla polikliniska utvärderingar under studien utfördes av ortopeden som var blind för båda grupperna av patienter.

Själva terapin var följande: öppen kirurgi föregicks av en standarddiagnostisk artroskopi, som utfördes från den bakre portalen för optik och främre portalen för artroskopiska instrument. Senorna i rotatorkuffen bedömdes från båda sidor - intraartikulär och subakromiell. För att utvärdera manschettens senaskada perioperativt och för att mäta bristningsbredden användes en speciell artroskopisk krok kalibrerad i 1 mm. För att utvärdera formen på bristningen användes klassificeringen Ellman - Gartsman. Kirurgisk behandling av skadade senor i rotatorkuffen utfördes i patientens strandstolsposition genom deltoideusmuskelsplittring. Efter utvärdering av omfattningen och placeringen av manschettens senaskada aspirerades 10 ml benmärgsblod (från humerushuvudet genom samma kirurgiska tillvägagångssätt) i en 20 ml spruta förfylld med 0,5 ml heparin med Yamshidi-nålen. Aspiration av benmärgen utfördes av kirurg. Från en benpunktion aspirerades maximalt 3 ml märgblod. Centrifugering av aspiratet i 10 ml provrör Monovette fyllt med citrat följde. Vald centrifugeringsregim bestod av gradient 15 minuters centrifugering vid 200 g RCF (relativ centrifugalkraft). Efter en sådan centrifugering delas rörets innehåll i tre delar. Det övre skiktet består av den blodplättsrika plasman (PRP), mellanskiktet av buffy coat med den dominerande andelen leukocyter, och det undre skiktet bildas av sedimenterade erytrocyter. Med hjälp av en steril laboratoriepipett utfördes en uppsamling av buffy coat. MSC representerade 0,01 till 0,02 % av alla kärnelement i buffy coaten, det vill säga cirka 10 x 106/l. MSCs koncentrat (liknande ledvätska i konsistens och färg) impregnerades i kollagenplåstret Hypro-Sorb F (Otrokovice, Tjeckien) med dimensionerna 1x2 cm. Kollagenplåstret som en bärare av MSCs-koncentratet användes för att säkerställa dess kvarhållning på önskad plats. Detta material fördes sedan in mellan senan och benet, på platsen för återfixering av rotatorkuffens senor (footprint) innan ankarnas gängor dras åt. Fixering av senan vid benet gjordes med en dubbelradsmetod med användning av absorberbara fixeringsankare BioComposite Corkscrew (Arthrex, München, Tyskland). I alla sådana behandlade fall fixerades senan i stället för originalfästet utan någon påfrestning och utan behov av abduktion av armen över 60 grader. Alla patienter genomgick Neer-akromioplastik för att öka det subakromiala utrymmet. Denna procedur följdes av standard kirurgisk sårförslutning i alla anatomiska skikt, steril förband av såret och applicering av abduktionsortosen. Alla patienter opererades av samma ortoped med samma kirurgiska teknik. Öppen kirurgi istället för artroskopi valdes på grund av den säkrare fixeringen av MSC-bäraren under den återinsatta senan och för att minska risken för utspolning av MSC-koncentratet från bäraren under artroskopin.

Kirurgisk behandling av patienter i grupp II var identisk som i grupp I, förutom aspiration av benmärg från humerushuvudet och efterföljande applicering av ställningen mättad med MSCs i gränsytan mellan sena och ben.

Abduktionsfixeringen varade i 4 veckor. Passiv rörelse över den horisontella linjen under ledning av en sjukgymnast påbörjades den första postoperativa dagen. Efter att fixeringen tagits bort började en aktiv rehabilitering, det vill säga ett komplett utbud av rörelseövningar gjorda aktivt 6 veckor efter operationen. Full belastning tilläts 12 veckor efter operationen.

Poliklinisk uppföljning skedde enligt ovan nämnda schema. För att kontrollera integriteten av senan vid insättningspunkten i överarmsbenets större tuberositet, utfördes MRT av axelleden 2 år postoperativt. Både preoperativa och postoperativa MR-undersökningar utfördes med en 1,5T högfältsskanner, i sagittala, koronala och axiella plan, i T1- och T2-vägda fettmättade sekvenser (MR-artrografi med gadolinium som kontrastmedel). Alla MRT-resultat utvärderades av en erfaren radiolog specialiserad på muskuloskeletala patologier. Han utvärderade senors integritet, närvaro och lokalisering av fullständig retear, senor och muskelgränser och förekomsten av onormala artefakter.

Den primära hypotesen för denna studie är att användningen av mesenkymala stamceller i supraspinatus-senrekonstruktionskirurgin kommer att ha en positiv effekt i bedömningen av både subjektiva och objektiva poängsystem, och även när det gäller att minska antalet senrerupturer jämfört med patientpopulation där mesenkymala stamceller inte användes. Alla data analyserades statistiskt med STATISTICA 9.0-programmet. För att jämföra resultaten av VAS-poängen, Constant-poängen och ASES-poängen preoperativt och ett år efter operationen användes Students t-test för att jämföra förekomsten av rerupturer mellan båda grupperna av patienter 2 år postoperativt Chi -kvadrattest användes. Signifikansnivån bestämdes på sid