Клиническое исследование мезенхимальных стволовых клеток, используемых в реконструктивной хирургии поражений надостной мышцы

Проспективное рандомизированное исследование проводится в отделениях ортопедии и травматологии, гематологии и радиологии. В исследование было включено 50 пациентов. Из 25 пациентов обеих групп в I группу (получавшие концентрат МСК костного мозга в костно-сухожильный контакт в месте наложения шва во время операции) вошли 7 женщин и 18 мужчин (средний возраст 51,2 года), группу II (без применения МСК) составили 15 женщин и 10 мужчин (средний возраст 50,5 лет). Отбор пациентов в обе группы осуществлялся с помощью компьютерной программы рандомизации блоков перестановок Random Number Generator Software 7.0. Все результаты рентгенограмм/МРТ/КТ были оценены опытным врачом-рентгенологом, специализирующимся на патологии опорно-двигательного аппарата, который был ослеплен для обеих групп пациентов. Перед включением в исследование пациенты подписали информированное согласие, созданное Этическим комитетом местной больницы, и были случайным образом распределены на одну из возможностей лечения с использованием программного обеспечения генератора случайных чисел 7.0 по методу 1:1.

Перед хирургическим лечением пациенты заполняли анкету с оценкой по ВАШ, оценкой по шкале ASES (Американская стандартизированная форма оценки плечевого сустава и локтевых хирургов) и постоянной оценкой. Дальнейший клинический контроль с заполнением данных опросников осуществляется через 6 месяцев после операции, через 1 год после оперативного лечения, через 2, 5 и 10 лет после операции. Через два года после операции проводится МРТ-обследование плечевого сустава. Все амбулаторные клинические оценки во время исследования были выполнены хирургом-ортопедом вслепую для обеих групп пациентов.

Собственно терапия заключалась в следующем: открытой операции предшествовала стандартная диагностическая артроскопия, которую проводили из заднего порта для оптики и переднего порта для артроскопических инструментов. Сухожилия вращательной манжеты плеча оценивали с обеих сторон - внутрисуставно и субакромиально. Для периоперационной оценки повреждения сухожилия манжеты и измерения ширины разрыва использовали специальный артроскопический крючок, калиброванный в 1 мм. Для оценки формы разрыва использовали классификацию Эллмана - Гартсмана. Хирургическое лечение поврежденных сухожилий вращательной манжеты плеча выполняли в положении больного на шезлонге, доступом с расщеплением дельтовидной мышцы. После оценки степени и локализации поражения сухожилия манжетки выполнена аспирация 10 мл костномозговой крови (из головки плечевой кости через тот же хирургический доступ) в шприц объемом 20 мл, предварительно наполненный 0,5 мл гепарина, с иглой Ямшиди. Хирург выполнил аспирацию костного мозга. Из одной костной пункции аспирировано максимально 3 мл костномозговой крови. Далее следует центрифугирование аспирата в пробирке Monovette объемом 10 мл, заполненной цитратом. Выбранный режим центрифугирования состоял из 15-минутного градиентного центрифугирования при 200 g RCF (относительная центробежная сила). После такого центрифугирования содержимое пробирки делят на три части. Верхний слой состоит из богатой тромбоцитами плазмы (БТП), средний слой лейкоцитарной пленки с преобладающей долей лейкоцитов, нижний слой образован осаждающимися эритроцитами. С помощью стерильной лабораторной пипетки собирали лейкоцитарную пленку. МСК составляли от 0,01 до 0,02 % всех ядерных элементов лейкоцитарной пленки, что составляет около 10 х 106/л. Концентратом МСК (аналогичным по консистенции и цвету синовиальной жидкости) импрегнировали коллагеновую заплату Hypro-Sorb F (Отроковице, Чехия) размером 1х2 см. Коллагеновый пластырь как носитель концентрата МСК использовали для обеспечения его удержания в желаемом месте. Затем этот материал вставляли между сухожилием и костью, в место повторной фиксации сухожилий ротаторной манжеты (след) до затягивания резьбы анкеров. Фиксацию сухожилия к кости осуществляли двухрядным методом с использованием рассасывающихся анкеров BioComposite Corkscrew (Arthrex, Мюнхен, Германия). Во всех таких пролеченных случаях сухожилие фиксировалось в месте первоначального прикрепления без какой-либо нагрузки и без необходимости отведения руки выше 60 градусов. Всем пациентам выполнена акромиопластика по Нееру для увеличения субакромиального пространства. После этой процедуры выполняли стандартное хирургическое ушивание раны во всех анатомических слоях, стерильную перевязку раны и наложение отводящего ортеза. Всех пациентов оперировал один и тот же хирург-ортопед с применением одинаковой хирургической техники. Открытая операция вместо артроскопии была выбрана из-за более надежной фиксации носителя МСК под повторно введенным сухожилием и снижения риска вымывания концентрата МСК из носителя во время артроскопии.

Хирургическое лечение больных 2-й группы было таким же, как и в 1-й, за исключением аспирации костного мозга из головки плечевой кости и последующего наложения скаффолда, насыщенного МСК, на границе сухожилие/кость.

Фиксация похищения длилась 4 недели. Пассивные движения по горизонтальной линии под руководством физиотерапевта начаты в первые послеоперационные сутки. После снятия фиксации началась активная реабилитация, то есть активное выполнение полного комплекса двигательных упражнений через 6 недель после операции. Полная нагрузка была разрешена через 12 недель после операции.

Амбулаторное наблюдение осуществлялось в соответствии с графиком, указанным выше. Для проверки целостности сухожилия в месте прикрепления к большому бугорку плечевой кости через 2 года после операции выполнена МРТ плечевого сустава. Как предоперационные, так и послеоперационные МРТ-исследования проводились с помощью сканера с высоким полем 1,5 Тл в сагиттальной, коронарной и аксиальной плоскостях в Т1- и Т2-взвешенных жиронасыщенных последовательностях (МРТ-артрография с использованием гадолиния в качестве контрастного вещества). Все результаты МРТ оценивал опытный рентгенолог, специализирующийся на патологии опорно-двигательного аппарата. Он оценивал целостность сухожилий, наличие и локализацию полных ретар, границ сухожилий и мышц, а также наличие аномальных артефактов.

Основная гипотеза этого исследования заключается в том, что использование мезенхимальных стволовых клеток в хирургии реконструкции сухожилия надостной мышцы будет иметь положительный эффект в оценке как субъективных, так и объективных систем оценки, а также с точки зрения снижения количества повторных разрывов сухожилия по сравнению с операцией. популяции пациентов, у которых не использовались мезенхимальные стволовые клетки. Все данные были подвергнуты статистическому анализу с помощью программы STATISTICA 9.0. Для сравнения результатов по шкале ВАШ, постоянной шкале и шкале ASES до операции и через год после операции использовали t-критерий Стьюдента для сравнения частоты рецидивов между обеими группами пациентов через 2 года после операции. был использован критерий -квадрат. Уровень значимости определяли при p