Werkzaamheid van fecale microbiële transplantatiebehandeling bij volwassenen met atopische dermatitis

Dit is een prospectieve, dubbelblinde, placebogecontroleerde studie gericht op het beoordelen van de veiligheid en klinische werkzaamheid van FMT voor de behandeling van milde tot matige AD, en op het beoordelen van de verandering in de fecale microbiota na FMT in de onderzoekspopulatie. De studie omvat 2 groepen. In de eerste groep krijgen alle patiënten elke 2 weken 4 fecale microbiële transplantaties (FMT's) van gezonde donoren. In de tweede groep krijgen alle patiënten elke 2 weken 4 placebo-transplantaties. Patiënten mogen tijdens de onderzoeksperiode doorgaan met hun basislijn medische topische behandeling, inclusief vochtinbrengende crèmes en glucocorticoïden, maar er mag geen nieuwe therapie worden gestart. De patiënten van de tweede groep, die de placebobehandeling kregen, krijgen de mogelijkheid om een ​​open-label fase in te gaan waarin ze elke 2 weken 4 fecale microbiële transplantaties (FMT's) van gezonde donoren zullen ontvangen. De klinische activiteit van AD, bijwerkingen en het profiel van het fecale microbioom zullen aan het begin van het onderzoek, vóór elke FMT en 1-6 maanden na de laatste FMT worden geëvalueerd met behulp van de SCORAD-score, de IGA-beoordelingsschaal en de wekelijkse gebruik van lokale corticosteroïden.

Tijdens de onderzoeksperiode mogen patiënten alleen lokale therapie gebruiken, waaronder verzachtende middelen en glucocorticoïden of calcineurineremmers.

FMT voorbereiding en levering:

Vrijwillige donoren zijn gezonde, niet-zwangere volwassenen van 18 tot 50 jaar, met een normale body mass index. Ze worden uitgesloten voor elke significante medische geschiedenis of voor elk gebruik van antibiotica in de voorgaande 3 maanden. Kandidaten moeten in aanmerking komen volgens de richtlijnen van het Israëlische Ministerie van Volksgezondheid, waaronder een lichamelijk onderzoek en laboratoriumscreeningstests, waaronder fecale darmpathogenen, serumantilichamen tegen hepatitis A, B en C; humaan immunodeficiëntievirus; HTLV en Treponema pallidum, evenals coeliakie, CBC (en aanvullende tests die voldoen aan de richtlijnen van het Israëlische ministerie van Volksgezondheid). De ontlasting wordt binnen enkele minuten na de ontlasting afgeleverd in een schone, gesloten plastic container en wordt verwerkt in de ontlastingsbank van het Tel Aviv Medical Center om gecapsuleerde FMT te bereiden. In het kort wordt fecaal materiaal verdund met normale zoutoplossing (600 ml/100 g fecaal materiaal), gefilterd en geconcentreerd in een centrifuge. De pellet zal worden gesuspendeerd in steriele zoutoplossing en glycerol (20%) die zal worden toegevoegd als een bacteriële cryoprotectant. Dit materiaal wordt vervolgens gepipetteerd in zuurbestendige capsules, die worden gesloten en vervolgens secundair worden afgesloten met een extra set capsules. Capsules worden ingevroren bewaard bij -80°C. Placebo-capsules zijn visueel identiek en bevatten alleen verdunde glycerol.

Gecapsuleerde FMT-procedure:

FMT zal twee doses van 15 FMT-capsules toegediend krijgen op twee opeenvolgende dagen (in totaal 30 capsules), in de bacteriotherapiekliniek van het medisch centrum in Tel Aviv (TLVMC). Op de dag van toediening worden de bij -80°C ingevroren capsules uit de vriezer gehaald en op ijs naar de kliniek vervoerd. Vijftien capsules worden individueel aan de patiënt overhandigd en de patiënt neemt de capsules direct in met wat water. Patiënten zullen worden gevraagd om 's nachts te vasten voorafgaand aan de inname van de capsule.

Fecale microbiële analyse:

Om te onderzoeken of het klinische effect kan worden gemedieerd door kolonisatie van nieuwe bacteriestammen, hebben we een robuuste en gevoelige methode ontwikkeld om paarsgewijze verschillen in DNA-sequenties tussen bacteriestammen van dezelfde soort in verschillende metagenomics-monsters te berekenen. Donorontlastingsmonsters die zullen worden gebruikt voor FMT-capsules en ontlastingsmonsters die tijdens de onderzoeksperiode bij de patiënten zullen worden verzameld, zullen worden gesequenced in metagenomics-uitlezingen. Reads die in kaart worden gebracht, worden opgestapeld om variantinformatie per positie te verkrijgen voor elke gedetecteerde soort. Verschil in de variant van een bepaalde soort op een bepaalde positie tussen twee monsters wordt gedefinieerd als het ontbreken van een kruising tussen de set gedetecteerde allelen in de twee monsters die worden vergeleken. De geschatte soort-DNA-sequentie-ongelijkheid voor een paar monsters is dan het aantal verschillende posities gedeeld door het totale aantal posities dat wordt vergeleken.