Skuteczność leczenia transplantacji drobnoustrojów kałowych u osób dorosłych z atopowym zapaleniem skóry

Jest to prospektywne, podwójnie zaślepione, kontrolowane placebo badanie, którego celem jest ocena bezpieczeństwa i skuteczności klinicznej FMT w leczeniu łagodnej lub umiarkowanej AD oraz ocena zmian mikroflory kałowej po FMT w badanej populacji. Badanie obejmie 2 grupy. W pierwszej grupie wszyscy pacjenci otrzymają 4 przeszczepy drobnoustrojów kałowych (FMT) od zdrowych dawców w odstępie 2 tygodni. W drugiej grupie wszyscy pacjenci otrzymają 4 przeszczepy placebo w odstępie 2 tygodni. W okresie badania pacjenci będą mogli kontynuować podstawowe medyczne leczenie miejscowe, w tym środki nawilżające i glikokortykosteroidy, ale nie należy rozpoczynać nowej terapii. Pacjenci z drugiej grupy, którzy otrzymali placebo, będą mieli możliwość wejścia do otwartej fazy, w której otrzymają 4 przeszczepy drobnoustrojów kałowych (FMT) od zdrowych dawców w odstępie 2 tygodni. Aktywność kliniczna AZS, zdarzenia niepożądane i profil mikrobiomu kałowego będą oceniane na początku badania, przed każdym FMT i 1-6 miesięcy po ostatnim FMT, przy użyciu skali SCORAD, skali oceny IGA oraz cotygodniowej stosowanie miejscowych kortykosteroidów.

W okresie badania pacjenci będą mogli stosować wyłącznie terapię miejscową, w tym emolienty i glikokortykosteroidy lub inhibitory kalcyneuryny.

Przygotowanie i dostawa FMT:

Wolontariuszami będą zdrowe, niebędące w ciąży osoby dorosłe w wieku od 18 do 50 lat, z prawidłowym wskaźnikiem masy ciała. Zostaną wykluczeni ze względu na istotną historię medyczną lub jakiekolwiek stosowanie antybiotyków w ciągu ostatnich 3 miesięcy. Kandydaci powinni kwalifikować się zgodnie z wytycznymi izraelskiego Ministerstwa Zdrowia, które obejmują badanie fizykalne i laboratoryjne testy przesiewowe, w tym patogeny jelitowe w kale, przeciwciała w surowicy przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu A, B i C; ludzki wirus niedoboru odporności; HTLV, Treponema pallidum oraz celiakia, CBC (oraz dodatkowe badania zgodne z wytycznymi izraelskiego Ministerstwa Zdrowia). Kał zostanie dostarczony w ciągu kilku minut po wypróżnieniu w czystym, zamkniętym plastikowym pojemniku i zostanie przetworzony w banku stolca Centrum Medycznego w Tel Awiwie w celu przygotowania kapsułkowanego FMT. W skrócie, materiał kałowy zostanie rozcieńczony normalną solą fizjologiczną (600 ml/100 g materiału kałowego), przefiltrowany i zatężony preparat w wirówce. Osad zostanie zawieszony w sterylnej soli fizjologicznej i glicerolu (20%), który zostanie dodany jako krioprotektant bakteryjny. Materiał ten zostanie następnie odpipetowany do kwasoodpornych kapsułek, które zostaną zamknięte, a następnie wtórnie uszczelnione dodatkowym zestawem kapsułek. Kapsułki będą przechowywane zamrożone w temperaturze -80°C. Kapsułki placebo będą miały identyczny wygląd i będą zawierały tylko rozcieńczony glicerol.

Kapsułkowa procedura FMT:

FMT zostanie podane dwie dawki po 15 kapsułek FMT przez dwa kolejne dni (łącznie 30 kapsułek) w klinice bakterioterapii centrum medycznego w Tel Awiwie (TLVMC). W dniu podania kapsułki zamrożone w temperaturze -80°C zostaną wyjęte z zamrażarki i przetransportowane do kliniki na lodzie. Pacjentowi zostanie wręczonych pojedynczo piętnaście kapsułek, które pacjent natychmiast połknie, popijając niewielką ilością wody. Pacjenci zostaną poproszeni o poszczenie przez noc przed przyjęciem kapsułki.

Analiza mikrobiologiczna kału:

Aby zbadać, czy w efekcie klinicznym może pośredniczyć kolonizacja nowych szczepów bakteryjnych, opracowaliśmy solidną i czułą metodę obliczania parzystej odmienności sekwencji DNA między szczepami bakteryjnymi tego samego gatunku w różnych próbkach metagenomicznych. Próbki kału dawcy, które zostaną użyte do kapsułek FMT, oraz próbki kału, które zostaną pobrane od pacjentów w okresie badania, zostaną zsekwencjonowane do odczytów metagenomicznych. Odczyty, które zostaną zmapowane, zostaną ułożone w stos, aby uzyskać informacje o wariantach dla każdego wykrytego gatunku. Różnica w wariancie określonego gatunku w danej pozycji między dwiema próbkami zostanie zdefiniowana jako brak przecięcia między zestawem wykrytych alleli w dwóch porównywanych próbkach. Oszacowana odmienność sekwencji DNA gatunku dla pary próbek jest zatem liczbą różnych pozycji podzieloną przez całkowitą liczbę porównywanych pozycji.