Eficácia do tratamento de transplante microbiano fecal em adultos com dermatite atópica

Este é um estudo prospectivo, duplo-cego, controlado por placebo, com o objetivo de avaliar a segurança e a eficácia clínica do FMT para o tratamento da DA leve a moderada e avaliar a mudança na microbiota fecal após o FMT na população do estudo. O estudo incluirá 2 grupos. No primeiro grupo, todos os pacientes receberão 4 transplantes microbianos fecais (FMTs) de doadores saudáveis ​​a cada 2 semanas de intervalo. No segundo grupo, todos os pacientes receberão 4 transplantes de placebo com intervalo de 2 semanas. Os pacientes poderão continuar com seu tratamento tópico médico de base, incluindo hidratantes e glicocorticóides, durante o período do estudo, mas nenhuma nova terapia deve ser iniciada. Os pacientes do segundo grupo, que receberam o tratamento com placebo, terão a possibilidade de entrar em uma fase aberta na qual receberão 4 transplantes microbianos fecais (FMTs) de doadores saudáveis ​​a cada 2 semanas. A atividade clínica da DA, os eventos adversos e o perfil do microbioma fecal serão avaliados no início do estudo, antes de cada FMT e 1-6 meses após o último FMT, usando o escore SCORAD, a escala de avaliação IGA e a avaliação semanal uso de corticosteroides tópicos.

Durante o período do estudo, os pacientes poderão usar apenas terapia tópica, incluindo emolientes e glicocorticóides ou inibidores de calcineurina.

Preparação e entrega do FMT:

Os doadores voluntários serão adultos saudáveis, não grávidas, com idade entre 18 e 50 anos, com índice de massa corporal normal. Eles serão excluídos por qualquer histórico médico significativo ou por qualquer uso de antibióticos nos 3 meses anteriores. Os candidatos devem ser elegíveis de acordo com as diretrizes do Ministério da Saúde de Israel, que incluem um exame físico e testes de triagem de laboratório, incluindo patógenos entéricos fecais, anticorpos séricos para hepatite A, B e C; vírus da imunodeficiência humana; HTLV e Treponema pallidum, bem como celíacos, hemograma completo (e testes adicionais que cumpram as diretrizes do Ministério da Saúde de Israel). As fezes serão entregues minutos após a defecação em um recipiente plástico limpo e fechado e serão processadas nas instalações do banco de fezes do Tel Aviv Medical Center para preparar o FMT capsulizado. Resumidamente, o material fecal será diluído com solução salina normal (600ml/100g de material fecal), filtrado e concentrado a preparação em uma centrífuga. O pellet será suspenso em soro fisiológico estéril e glicerol (20%) que será adicionado como crioprotetor bacteriano. Este material será então pipetado em cápsulas resistentes a ácidos, que serão fechadas e secundariamente seladas com um conjunto adicional de cápsulas. As cápsulas serão armazenadas congeladas a -80°C. As cápsulas de placebo terão visualmente idêntico e conterão apenas glicerol diluído.

Procedimento FMT capsulizado:

O FMT será administrado em duas doses de 15 cápsulas de FMT em dois dias consecutivos (um total de 30 cápsulas), na clínica de bacterioterapia do centro médico de Tel Aviv (TLVMC). No dia da administração, as cápsulas congeladas a -80°C serão retiradas do congelador e transportadas para a clínica em gelo. Quinze cápsulas serão entregues individualmente ao paciente e o paciente ingerirá as cápsulas imediatamente com um pouco de água. Os pacientes serão solicitados a jejuar durante a noite antes da ingestão da cápsula.

Análise microbiana fecal:

A fim de examinar se o efeito clínico pode ser mediado pela colonização de novas cepas bacterianas, desenvolvemos um método robusto e sensível para calcular a dissimilaridade da sequência de DNA pairwise entre cepas bacterianas da mesma espécie em amostras metagenômicas distintas. Amostras de fezes de doadores que serão usadas para cápsulas de FMT e amostras de fezes que serão coletadas dos pacientes durante o período do estudo serão sequenciadas em leituras metagenômicas. As leituras que serão mapeadas serão empilhadas para obter informações de variantes por posição para cada espécie detectada. A diferença na variante de uma determinada espécie em uma determinada posição entre duas amostras será definida como não havendo interseção entre o conjunto de alelos detectados nas duas amostras sendo comparadas. A dissimilaridade estimada da sequência de DNA da espécie para um par de amostras é então o número de posições diferentes dividido pelo número total de posições que estão sendo comparadas.