Эффективность лечения фекальной микробной трансплантацией у взрослых с атопическим дерматитом

Это проспективное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, направленное на оценку безопасности и клинической эффективности ТФМ для лечения БА легкой и средней степени тяжести, а также на оценку изменений фекальной микробиоты после ТФМ в исследуемой популяции. В исследование будут включены 2 группы. В первой группе всем пациентам будет проведено 4 фекальные микробные трансплантации (ФМТ) от здоровых доноров с интервалом в 2 недели. Во второй группе все пациенты получат 4 трансплантации плацебо с интервалом в 2 недели. Пациентам будет разрешено продолжать их базовое местное лечение, включая увлажняющие средства и глюкокортикоиды, в течение периода исследования, но не следует начинать новую терапию. Пациенты второй группы, получавшие лечение плацебо, будут иметь возможность войти в фазу открытой этикетки, в которой они получат 4 фекальные микробные трансплантации (ФМТ) от здоровых доноров каждые 2 недели. Клиническая активность БА, нежелательные явления и профиль фекального микробиома будут оцениваться в начале исследования, перед каждой ТФМ и через 1-6 месяцев после последней ТФМ с использованием шкалы SCORAD, шкалы оценки IGA и еженедельного опроса. использование топических кортикостероидов.

В течение периода исследования пациентам будет разрешено использовать только местную терапию, включая смягчающие средства и глюкокортикоиды или ингибиторы кальциневрина.

Подготовка и доставка FMT:

Добровольными донорами будут здоровые небеременные взрослые в возрасте от 18 до 50 лет с нормальным индексом массы тела. Они будут исключены из-за любой значимой истории болезни или любого использования антибиотиков в предшествующие 3 месяца. Кандидаты должны соответствовать требованиям в соответствии с руководящими принципами Министерства здравоохранения Израиля, которые включают медицинский осмотр и лабораторные скрининговые тесты, включая фекальные кишечные патогены, сывороточные антитела к гепатитам A, B и C; Вирус иммунодефицита человека; HTLV и Treponema pallidum, а также целиакию, общий анализ крови (и дополнительные тесты, соответствующие рекомендациям Министерства здравоохранения Израиля). Стул будет доставлен в течение нескольких минут после дефекации в чистом закрытом пластиковом контейнере и будет обработан в банке стула Тель-Авивского медицинского центра для приготовления капсулированного ТФМ. Вкратце, фекальный материал разбавляют физиологическим раствором (600 мл/100 г фекального материала), фильтруют и концентрируют препарат в центрифуге. Осадок будет суспендирован в стерильном физиологическом растворе и глицерине (20%), который будет добавлен в качестве бактериального криопротектора. Затем этот материал будет пипетирован в кислотостойкие капсулы, которые будут закрыты, а затем вторично запечатаны дополнительным набором капсул. Капсулы будут храниться в замороженном виде при температуре -80°C. Капсулы плацебо будут иметь идентичный внешний вид и содержать только разбавленный глицерин.

Капсулированная процедура FMT:

FMT будет введено две дозы по 15 капсул FMT в течение двух дней подряд (всего 30 капсул) в клинике бактериотерапии Тель-Авивского медицинского центра (TLVMC). В день введения капсулы, замороженные при температуре -80°C, будут извлечены из морозильной камеры и доставлены в клинику на льду. Пятнадцать капсул будут переданы пациенту индивидуально, и пациент немедленно проглотит капсулы с небольшим количеством воды. Пациентов попросят голодать в течение ночи перед приемом капсул.

Микробиологический анализ кала:

Чтобы выяснить, может ли клинический эффект быть опосредован колонизацией новых бактериальных штаммов, мы разработали надежный и чувствительный метод для расчета несхожести попарных последовательностей ДНК между бактериальными штаммами одного и того же вида в различных метагеномных образцах. Образцы стула доноров, которые будут использоваться для капсул ТФМ, и образцы стула, которые будут собираться у пациентов в течение периода исследования, будут секвенированы для метагеномных считываний. Чтения, которые будут сопоставлены, будут накапливаться, чтобы получить информацию о вариантах для каждой позиции для каждого обнаруженного вида. Различие варианта конкретного вида в данной позиции между двумя выборками будет определяться как отсутствие пересечения между набором обнаруженных аллелей в двух сравниваемых выборках. Таким образом, предполагаемое несходство последовательностей ДНК видов для пары образцов равно количеству различных положений, деленному на общее количество сравниваемых положений.