Wirksamkeit der fäkalen mikrobiellen Transplantationsbehandlung bei Erwachsenen mit atopischer Dermatitis

Dies ist eine prospektive, doppelblinde, placebokontrollierte Studie, die darauf abzielt, die Sicherheit und klinische Wirksamkeit von FMT für die Behandlung von leichter bis mittelschwerer AD zu bewerten und die Veränderung der fäkalen Mikrobiota nach FMT in der Studienpopulation zu bewerten. Die Studie umfasst 2 Gruppen. In der ersten Gruppe erhalten alle Patienten 4 fäkale mikrobielle Transplantationen (FMTs) von gesunden Spendern im Abstand von jeweils 2 Wochen. In der zweiten Gruppe erhalten alle Patienten 4 Placebo-Transplantationen im Abstand von 2 Wochen. Die Patienten dürfen während des Studienzeitraums ihre medikamentöse topische Grundbehandlung, einschließlich Feuchtigkeitscremes und Glukokortikoiden, fortsetzen, es sollte jedoch keine neue Therapie begonnen werden. Die Patienten der zweiten Gruppe, die die Placebo-Behandlung erhalten haben, haben die Möglichkeit, in eine Open-Label-Phase einzutreten, in der sie alle 2 Wochen 4 fäkale mikrobielle Transplantationen (FMTs) von gesunden Spendern erhalten. Die klinische Aktivität von AD, unerwünschte Ereignisse und das Profil des fäkalen Mikrobioms werden zu Beginn der Studie, vor jedem FMT und 1-6 Monate nach dem letzten FMT anhand des SCORAD-Scores, der IGA-Bewertungsskala und der Woche bewertet Verwendung von topischen Kortikosteroiden.

Während des Studienzeitraums dürfen die Patienten nur topische Therapien einschließlich Weichmachern und Glucocorticoiden oder Calcineurin-Inhibitoren anwenden.

FMT-Vorbereitung und -Lieferung:

Freiwillige Spender sind gesunde, nicht schwangere Erwachsene im Alter von 18 bis 50 Jahren mit einem normalen Body-Mass-Index. Sie werden aufgrund einer signifikanten medizinischen Vorgeschichte oder einer Verwendung von Antibiotika in den vorangegangenen 3 Monaten ausgeschlossen. Kandidaten sollten gemäß den Richtlinien des israelischen Gesundheitsministeriums geeignet sein, die eine körperliche Untersuchung und Labor-Screening-Tests umfassen, einschließlich fäkaler enterischer Krankheitserreger, Serumantikörper gegen Hepatitis A, B und C; menschlicher Immunschwächevirus; HTLV und Treponema pallidum sowie Zöliakie, CBC (und zusätzliche Tests, die den Richtlinien des israelischen Gesundheitsministeriums entsprechen). Der Stuhl wird innerhalb von Minuten nach dem Stuhlgang in einem sauberen, verschlossenen Kunststoffbehälter geliefert und in der Stuhlbank des Tel Aviv Medical Center verarbeitet, um gekapseltes FMT vorzubereiten. Kurz gesagt, Fäkalmaterial wird mit normaler Kochsalzlösung (600 ml/100 g Fäkalienmaterial) verdünnt, filtriert und das Präparat in einer Zentrifuge konzentriert. Das Pellet wird in steriler Kochsalzlösung und Glycerin (20 %) suspendiert, das als bakterielles Kälteschutzmittel hinzugefügt wird. Dieses Material wird dann in säurebeständige Kapseln pipettiert, die verschlossen und dann sekundär mit einem zusätzlichen Kapselsatz verschlossen werden. Die Kapseln werden gefroren bei -80 °C gelagert. Placebo-Kapseln sind optisch identisch und enthalten nur verdünntes Glycerin.

Gekapseltes FMT-Verfahren:

FMT werden an zwei aufeinanderfolgenden Tagen zwei Dosen von 15 FMT-Kapseln (insgesamt 30 Kapseln) in der Bacteriotherapy-Klinik des medizinischen Zentrums von Tel Aviv (TLVMC) verabreicht. Am Tag der Verabreichung werden die bei -80 °C gefrorenen Kapseln aus dem Gefrierschrank genommen und auf Eis in die Klinik transportiert. Fünfzehn Kapseln werden dem Patienten einzeln ausgehändigt und der Patient nimmt die Kapseln sofort mit etwas Wasser ein. Die Patienten werden gebeten, vor der Kapseleinnahme über Nacht zu fasten.

Fäkale mikrobielle Analyse:

Um zu untersuchen, ob die klinische Wirkung möglicherweise durch die Besiedelung neuer Bakterienstämme vermittelt wird, haben wir eine robuste und empfindliche Methode entwickelt, um die paarweise DNA-Sequenzunähnlichkeit zwischen Bakterienstämmen derselben Art über verschiedene metagenomische Proben hinweg zu berechnen. Stuhlproben von Spendern, die für FMT-Kapseln verwendet werden, und Stuhlproben, die während des Studienzeitraums von den Patienten gesammelt werden, werden in Metagenomik-Reads sequenziert. Die zu kartierenden Reads werden gestapelt, um für jede erkannte Art Varianteninformationen pro Position zu erhalten. Der Unterschied in der Variante einer bestimmten Art an einer gegebenen Position zwischen zwei Proben wird als keine Überschneidung zwischen dem Satz detektierter Allele in den zwei verglichenen Proben definiert. Die geschätzte Arten-DNA-Sequenz-Unähnlichkeit für ein Probenpaar ist dann die Anzahl unterschiedlicher Positionen dividiert durch die Gesamtzahl der verglichenen Positionen.