Účinnost léčby fekální mikrobiální transplantací u dospělých s atopickou dermatitidou

Toto je prospektivní, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná studie, jejímž cílem je posoudit bezpečnost a klinickou účinnost FMT pro léčbu mírné až středně těžké AD a posoudit změnu fekální mikroflóry po FMT ve studované populaci. Studie bude zahrnovat 2 skupiny. V první skupině všichni pacienti dostanou 4 fekální mikrobiální transplantace (FMT) od zdravých dárců každé 2 týdny od sebe. Ve druhé skupině všichni pacienti dostanou 4 transplantace placeba každé 2 týdny od sebe. Pacientům bude umožněno pokračovat ve své základní lékařské topické léčbě, včetně zvlhčovačů a glukokortikoidů, během období studie, ale neměla by být zahájena žádná nová terapie. Pacienti z druhé skupiny, kteří dostávali placebo, budou mít možnost vstoupit do otevřené fáze, ve které dostanou 4 fekální mikrobiální transplantace (FMT) od zdravých dárců každé 2 týdny. Klinická aktivita AD, nežádoucí účinky a profil fekálního mikrobiomu budou hodnoceny na začátku studie, před každým FMT a 1–6 měsíců po posledním FMT, pomocí skóre SCORAD, hodnotící škály IGA a týdenního použití topických kortikosteroidů.

Během období studie bude pacientům povoleno používat pouze lokální terapii zahrnující změkčovadla a glukokortikoidy nebo inhibitory kalcineurinu.

Příprava a dodání FMT:

Dobrovolnými dárci budou zdraví, netěhotní dospělí ve věku 18 až 50 let s normálním indexem tělesné hmotnosti. Budou vyloučeni z důvodu jakékoli významné anamnézy nebo jakéhokoli užívání antibiotik v předchozích 3 měsících. Kandidáti by měli být způsobilí podle pokynů izraelského ministerstva zdravotnictví, které zahrnují fyzikální vyšetření a laboratorní screeningové testy včetně fekálních střevních patogenů, sérových protilátek proti hepatitidě A, B a C; virus lidské imunodeficience; HTLV a Treponema pallidum a také celiakie, CBC (a další testy, které jsou v souladu s pokyny izraelského ministerstva zdravotnictví). Stolice bude dodána během několika minut po defekaci v čisté uzavřené plastové nádobě a bude zpracována v zařízení banky stolice Tel Aviv Medical Center za účelem přípravy zapouzdřené FMT. Stručně, fekální materiál se zředí normálním fyziologickým roztokem (600 ml/100 g fekálního materiálu), filtruje a koncentruje přípravek v odstředivce. Peleta bude suspendována ve sterilním fyziologickém roztoku a glycerolu (20%), který bude přidán jako bakteriální kryoprotektant. Tento materiál bude následně pipetován do kyselinovzdorných kapslí, které budou uzavřeny a následně sekundárně uzavřeny další sadou kapslí. Kapsle budou skladovány zmrazené při -80°C. Placebo tobolky budou vizuálně identické a budou obsahovat pouze zředěný glycerol.

Postup FMT v kapsli:

FMT budou podávány dvě dávky po 15 tobolkách FMT ve dvou po sobě jdoucích dnech (celkem 30 tobolek) na klinice bakterioterapie lékařského centra v Tel Avivu (TLVMC). V den podání budou kapsle zmrazené na -80°C vyjmuty z mrazáku a přepraveny na kliniku na ledu. Patnáct tobolek se podá jednotlivě pacientovi a pacient tobolky okamžitě spolkne s trochou vody. Pacienti budou požádáni, aby se před užitím kapslí přes noc nalačnili.

Fekální mikrobiální analýza:

Abychom prozkoumali, zda může být klinický účinek zprostředkován kolonizací nových bakteriálních kmenů, vyvinuli jsme robustní a citlivou metodu pro výpočet párové odlišnosti sekvence DNA mezi bakteriálními kmeny stejného druhu napříč různými metagenomickými vzorky. Vzorky stolice dárců, které budou použity pro kapsle FMT, a vzorky stolice, které budou odebrány pacientům během období studie, budou sekvenovány do metagenomických čtení. Údaje, které budou mapovány, budou nahromaděny, aby se získaly informace o variantách polohy pro každý detekovaný druh. Rozdíl ve variantě konkrétního druhu v dané poloze mezi dvěma vzorky bude definován jako bez průniku mezi sadou detekovaných alel ve dvou srovnávaných vzorcích. Odhadovaná druhová odlišnost sekvence DNA pro pár vzorků je pak počet různých pozic dělený celkovým počtem srovnávaných pozic.