Efficacia del trattamento del trapianto microbico fecale negli adulti con dermatite atopica

Si tratta di uno studio prospettico, in doppio cieco, controllato con placebo, volto a valutare la sicurezza e l'efficacia clinica dell'FMT per il trattamento dell'AD lieve-moderata e a valutare il cambiamento nel microbiota fecale in seguito all'FMT nella popolazione dello studio. Lo studio comprenderà 2 gruppi. Nel primo gruppo tutti i pazienti riceveranno 4 trapianti microbici fecali (FMT) da donatori sani ogni 2 settimane di distanza. Nel secondo gruppo tutti i pazienti riceveranno 4 trapianti di placebo ciascuno a distanza di 2 settimane. I pazienti potranno continuare con il loro trattamento topico medico di base, inclusi creme idratanti e glucocorticoidi, durante il periodo di studio, ma non dovrebbe essere iniziata una nuova terapia. I pazienti del secondo gruppo, che hanno ricevuto il trattamento con placebo, avranno la possibilità di entrare in una fase in aperto in cui riceveranno 4 trapianti microbici fecali (FMT) da donatori sani ogni 2 settimane di distanza. L'attività clinica dell'AD, gli eventi avversi e il profilo del microbioma fecale saranno valutati all'inizio dello studio, prima di ogni FMT e 1-6 mesi dopo l'ultimo FMT, utilizzando il punteggio SCORAD, la scala di valutazione IGA e il settimanale uso di corticosteroidi topici.

Durante il periodo di studio, i pazienti potranno utilizzare solo terapia topica inclusi emollienti e glucocorticoidi o inibitori della calcineurina.

Preparazione e consegna FMT:

I donatori volontari saranno adulti sani, non gravidi, di età compresa tra 18 e 50 anni, con un normale indice di massa corporea. Saranno esclusi per qualsiasi storia medica significativa o per qualsiasi uso di antibiotici nei 3 mesi precedenti. I candidati devono essere idonei secondo le linee guida del Ministero della Salute israeliano che includono un esame fisico e test di screening di laboratorio tra cui agenti patogeni enterici fecali, anticorpi sierici contro l'epatite A, B e C; virus dell'immunodeficienza umana; HTLV e Treponema pallidum così come celiachia, emocromo (e test aggiuntivi conformi alle linee guida del Ministero della Salute israeliano). Le feci verranno consegnate entro pochi minuti dopo la defecazione in un contenitore di plastica pulito e chiuso e saranno processate presso la banca delle feci del Tel Aviv Medical Center per preparare FMT capsulato. In breve, il materiale fecale sarà diluito con normale soluzione fisiologica (600ml/100g di materiale fecale), filtrato e concentrato il preparato in una centrifuga. Il pellet sarà sospeso in soluzione fisiologica sterile e glicerolo (20%) che verrà aggiunto come crioprotettore batterico. Questo materiale verrà quindi pipettato in capsule resistenti agli acidi, che verranno chiuse e successivamente sigillate con un set aggiuntivo di capsule. Le capsule saranno conservate congelate a -80°C. Le capsule di placebo saranno visivamente identiche e conterranno solo glicerolo diluito.

Procedura FMT capsulata:

A FMT verranno somministrate due dosi di 15 capsule FMT in due giorni consecutivi (per un totale di 30 capsule), presso la clinica di batterioterapia del centro medico di Tel Aviv (TLVMC). Il giorno della somministrazione, le capsule congelate a -80°C saranno estratte dal congelatore e trasportate in clinica in ghiaccio. Quindici capsule verranno consegnate individualmente al paziente e il paziente ingerirà immediatamente le capsule con un po' d'acqua. Ai pazienti verrà chiesto di digiunare durante la notte prima dell'assunzione della capsula.

Analisi microbica fecale:

Al fine di esaminare se l'effetto clinico può essere mediato dalla colonizzazione di nuovi ceppi batterici, abbiamo sviluppato un metodo robusto e sensibile per calcolare la dissomiglianza della sequenza del DNA a coppie tra ceppi batterici della stessa specie attraverso distinti campioni di metagenomica. I campioni di feci dei donatori che verranno utilizzati per le capsule FMT e i campioni di feci che verranno raccolti dai pazienti durante il periodo di studio saranno sequenziati in letture metagenomiche. Le letture che verranno mappate verranno accumulate per ottenere informazioni sulle varianti per posizione per ogni specie rilevata. La differenza nella variante di una particolare specie in una data posizione tra due campioni sarà definita come assenza di intersezione tra l'insieme di alleli rilevati nei due campioni confrontati. La dissomiglianza della sequenza del DNA delle specie stimata per una coppia di campioni è quindi il numero di posizioni diverse diviso per il numero totale di posizioni confrontate.