Immuun- en micro-omgeving Proteogenomics-profilering voor het classificeren van longkankerpatiënten

De overmatige ophoping van vocht tussen de membranen rond de long, een klinische aandoening die gewoonlijk "pleura-effusie" wordt genoemd, wordt veroorzaakt door een van de volgende drie factoren: verhoogde productie van pleuravocht, verminderd vermogen om pleuravocht te herabsorberen of een combinatie van beide.

De basis van pleurale effusieaccumulatie kan afkomstig zijn van meerdere pathologieën: van goedaardige en extrapulmonale aandoeningen tot intrinsieke pleurale pathologie (inflammatoir of neoplastisch primair of metastatisch) waarbij de ophoping van vocht in de pleurale ruimte voornamelijk te wijten is aan veranderingen in de structuur van de pleurale ruimte. membraan (verlies van integriteit en/of infiltratie door neoplastische cellen).

Een voorbeeld van extrapulmonale aandoeningen is de pleurale effusie die wordt waargenomen bij patiënten met congestief hartfalen waarbij de hydrostatische capillaire druk toeneemt als gevolg van het falen van de cardiocirculatiepomp.

Het onderscheid tussen goedaardige en kwaadaardige oorzaken is momenteel een diagnostische uitdaging die meestal het verzamelen van materiaal vereist (cellen ondergedompeld in het pleuravocht of zelfs een histologisch monster).

De eerste stap van dit onderzoek is momenteel de cytologische evaluatie van het pleuravocht, dat wil zeggen de observatie van cellen, van een eerste monster van het pleuravocht. Deze procedure gaat gepaard met een gemiddelde gevoeligheid van 62%, terwijl een tweede monster door middel van thoracentese de gevoeligheid van de diagnose met 10% verbetert. In bepaalde gevallen is het echter niet mogelijk om een ​​diagnose te stellen door het pleuravocht te analyseren en wordt in de regel een meer invasieve diagnostische methode aanbevolen, zoals pleurale biopsie (verzameld door punctie met een "blinde" naald, echogeleid of computergestuurd tomografie geleid of verkregen door middel van directe visualisatie van de pleuraholte door middel van pleuroscopie).

De diagnostische opbrengst van deze aanpak kan oplopen tot 97% (in het geval van pleurale biopsie verkregen door medische thoracoscopie). Het impliceert echter een grotere morbiditeit en een groter verbruik van hulpbronnen (materieel en menselijk). De ontwikkeling van een meer sensitieve en specifiekere en tegelijkertijd minder invasieve diagnostische methode voor pleuravocht kan bijdragen aan een effectievere screening van patiënten, waardoor het gebruik van meer invasieve methoden wordt beperkt, alleen voor patiënten met een hoger risico op maligne pathologie.

Studie Doelstellingen:

Dit project bestaat uit een preklinische studie waarin we nieuwe methodologieën voor klinische evaluatie zullen onderzoeken, gebaseerd op proteomische analyse van de immunologische kenmerken en de micro-omgeving van de tumor in het pleuravocht van patiënten bij wie de diagnose niet bevestigd is. De verkregen resultaten zullen worden gebruikt bij de implementatie van een algoritme voor de classificatie van pleuravocht in de volgende groepen: a) laag risico of goedaardig; b) hoog risico of kwaadaardig. Als het algoritme een goede sensitiviteit en specificiteit heeft voor kwaadaardige diagnoses, kan het nuttig zijn om patiënten te onderscheiden in de volgende groepen: a) stel de invasieve test uit en voer actieve beeldvorming uit; b) overgaan tot invasieve testen.

Voordeel-/risicobeoordeling:

Het verzamelen van het pleuravocht zal worden uitgevoerd volgens procedures die worden gebruikt in de standaardzorg en diagnose van de ziekte, en vormt dus geen extra risico's voor de deelnemers. De resultaten van dit onderzoek brengen geen klinische effecten met zich mee die direct van toepassing zijn op de betrokken deelnemers. In de toekomst kunnen de verkregen resultaten echter ten goede komen aan andere gebruikers door een beter begrip van de micro-omgeving van de tumor.

Modaliteiten van werving:

Door een gesprek met de onderzoekend arts wordt de deelnemer aan dit onderzoek op de hoogte gebracht van de voorwaarden voor de behandeling van zijn persoonsgegevens in het kader van het onderzoeksproject. Daarnaast ondertekenen betrokkenen geïnformeerde toestemming voor deelname aan het onderzoek. De melding bevat een toelichting op de bij het onderzoek betrokken procedures en de rol van de in het kader van het onderzoek verzamelde persoonsgegevens. In een gesprek met de onderzoekend arts en door ondertekening van de geïnformeerde toestemming voor deelname aan het onderzoek wordt de betrokkene bewust van zijn recht om zich terug te trekken uit het onderzoek en/of zijn geïnformeerde toestemming in te trekken.

De verzameling van biologische monsters voor de vergelijkende prospectieve cohortstudie zal in een periode van twee tot drie jaar worden uitgevoerd in alle samenwerkende ziekenhuizen in dit project. Op basis van de variantie en het statistische vermogen die werden waargenomen in een eerdere studie van het exosoomproteoom van de longvloeistof, werden 200 monsters geschat als het minimumaantal voor de classificatie van biologische monsters. De analyse van statistisch vermogen is gebaseerd op de variantie die is waargenomen in 10 monsters waarin ongeveer 3500 eiwitten werden geïdentificeerd en gekwantificeerd in longvloeistoffen. De statistische poweranalyse houdt rekening met de correctie voor meerdere tests op basis van het aantal geïdentificeerde en gekwantificeerde eiwitten.

Specificaties gegevensverzameling:

Tijdens het consult zal een klinisch interview worden afgenomen, waardoor persoonlijke gegevens kunnen worden verzameld, namelijk genetische gegevens, gegevens met betrekking tot gezondheid en raciale of etnische afkomst. Er zal ook een objectief onderzoek worden uitgevoerd om gewicht, lengte, bloeddruk en hartslag te beoordelen. Er worden gegevens verzameld met betrekking tot de resultaten van aanvullend diagnostisch onderzoek, te weten: 1. X-thorax (locatie, omvang en kenmerken van de pleurale effusie); 2. echografie van de thorax (locatie, omvang, karakterisering van de ecostructuur - homogeen / heterogeen; met / zonder zichtbare septaties); 3. Thoracale computertomografie (locatie, omvang, morfologisch aspect van het borstvlies - diktetoename, knobbeltjes, enz.); 4. Cytologische evaluatie van het pleuravocht; 5. Serum biochemisch onderzoek: bloedglucosespiegel; analyse van totale eiwitten en serumalbumine; lactaat dehydrogenase niveau.

De diagnostische referentiemethode zal gebaseerd zijn op histologische evaluatie van het weefsel. De resultaten van de proteomics-analyse verkregen in dit project zullen niet in aanmerking worden genomen voor de definitieve diagnose van de deelnemers.

Specificatie van verzameling en eindbestemming van biologische monsters:

Volgens de beslissing van de clinicus zal pleuraal vocht worden verkregen voor diagnose (door middel van thoracentese of tijdens pleurale biopsie of pleuroscopie). Het verkregen staal zal het gebruikelijke traject van klinisch onderzoek volgen (cytologische en/of histopathologische evaluatie, biochemische evaluatie, microbiologische evaluatie) zoals geregistreerd in elke instelling. Voor patiënten die ermee instemmen om aan de studie deel te nemen, wordt alleen een extra monster van pleuravocht opgestuurd voor de studie die we voorstellen uit te voeren. Deze laatste monsters worden bij CEDOC opgeslagen.

Tekst van informatie die aan vrijwilligers moet worden verstrekt:

De studie waarvoor we uw toestemming vragen, heeft tot doel een diagnostische methode te ontwikkelen met een grotere specificiteit en gevoeligheid voor het identificeren van verschillende pathologieën die verband houden met overmatige ophoping van pleuravocht (een aandoening die algemeen bekend staat als pleurale effusie). Momenteel heeft de cytologische evaluatie, dat wil zeggen de observatie van cellen, van een eerste monster van het borstvliesvocht een gemiddelde gevoeligheid van 62%, terwijl een tweede monstername door middel van thoracentese (bestaat uit aspiratie van de vloeistof uit het borstvlies door de punctie van de borstwand) verbetert de gevoeligheid van de diagnose met 10%. In bepaalde gevallen is het niet mogelijk een diagnose te stellen door het pleuravocht te analyseren en wordt in de regel een meer invasieve diagnostische methode aanbevolen, zoals pleurale biopsie of pleuroscopie (chirurgische techniek waarbij je direct de binnenkant van de ribbenkast kunt bekijken) met pleurale biopsie (gevoeligheid 98%). De ontwikkeling van een diagnostische methode met een grotere specificiteit en gevoeligheid van het pleuravocht, waardoor invasieve methoden worden vermeden, kan de efficiëntie bij het screenen van patiënten met pleurale effusie verbeteren, waardoor het invasieve onderzoek wordt beperkt tot een geselecteerd deel van de patiënten met een effectief hoger risico op maligne pathologie . Uw deelname aan dit onderzoek brengt geen aanvullende procedures met zich mee naast die welke uw arts nodig acht voor de diagnose van de ziekte of het voorschrijven van specifieke medicijnen voor het onderzoek in kwestie. De verzamelde monsters worden geanonimiseerd met een code, dat wil zeggen dat het voor de onderzoekers niet mogelijk is om de monsters te matchen met de persoonlijke gegevens van de respectievelijke patiënten. Alle verzamelde gegevens zullen vertrouwelijk zijn, in overeenstemming met de nieuwe Algemene Verordening Gegevensbescherming (AVG) die afgelopen mei 2018 van kracht is geworden (Verordening (EU) nr. 2016/679).

GEÏNFORMEERDE TOESTEMMING VAN DE PATIËNT:

(NAAM) _______________________________________________________, Ik stem er vrijwillig mee in om deel te nemen aan het onderzoeksproject getiteld "Klinische studie in het kader van de diagnose van patiënten met pleurale effusie".

Ik verklaar dat ik ben geïnformeerd over de doelstellingen en methodologie van deze studie, evenals over de voorwaarden voor deelname, nadat ik mondelinge en schriftelijke informatie heb ontvangen, die ik heb gehoord, gelezen en begrepen.

Dit document werd ondertekend nadat alle twijfels waren opgehelderd met de onderzoekend arts en na bezinning op dit voorstel tot deelname met onbeperkte tijd.

De monsters en gegevens worden versleuteld om mijn identiteit te beschermen. Ik ben vrij om te weigeren mijn monsters te doneren en, zelfs nadat ik mijn toestemming heb gegeven, kan ik deze op elk moment intrekken als ik dat wil. Mijn beslissing zal op geen enkele manier invloed hebben op de kwaliteit van mijn klinische follow-up, noch zal het mijn rechten veranderen als patiënt van de ____________________________________________________________________ (ziekenhuisafdeling).

Ik kan op elk moment generieke informatie opvragen over het onderzoek waarvoor monsters worden gebruikt. Ik zal echter niet op de hoogte worden gebracht van de concrete resultaten die in mijn stalen zijn verkregen, aangezien deze gegevens niet relevant zijn voor mijn klinische follow-up.

Ik geef ook toestemming voor het gebruik van biologische monsters en verzamelde gegevens, anoniem en vertrouwelijk, in volgende onderzoeksprojecten, op voorwaarde dat ze zijn goedgekeurd door de bevoegde ethische commissie.

Handtekening deelnemer: ______________________________________

Datum: __ / __ / _____

Handtekening onderzoeker: ________________________________________

Datum: __ / __ / _____

Eigendom en gegevensbescherming van deelnemers / vertrouwelijkheid:

De beveiligingsmaatregelen bij de bescherming van persoonsgegevens die zullen worden geïmplementeerd zijn onder meer: ​​1. Pseudonimisering en versleuteling van persoonsgegevens; 2. Mogelijkheid om de beschikbaarheid van en toegang tot persoonsgegevens tijdig te herstellen in geval van een incident; 3. Proces voor het testen, beoordelen en regelmatig evalueren van de effectiviteit van technische en organisatorische maatregelen om de beveiliging van gegevensverwerking te waarborgen.