Immun- és mikrokörnyezet-proteogenomikai profilalkotás a tüdőrákos betegek osztályozására

A tüdőt körülvevő membránok közötti túlzott folyadékfelhalmozódást, ezt a klinikai állapotot általában "pleurális effúziónak" nevezik, a három tényező egyike okozza: a pleurális folyadék fokozott termelése, a pleurális folyadék visszaszívási képességének csökkenése vagy a kettő keveréke.

A pleurális folyadékgyülem felhalmozódásának hátterében többféle kórkép állhat: a jóindulatú és extrapulmonalis állapotoktól az intrinsic pleurális patológiákig (gyulladásos vagy daganatos primer vagy metasztatikus), amelyben a folyadék felhalmozódása a pleurális térben főként a pleurális struktúrában bekövetkezett változások következménye. membrán (integritás elvesztése és/vagy neoplasztikus sejtek beszivárgása).

Az extrapulmonális állapotok egyik példája a pangásos szívelégtelenségben szenvedő betegeknél megfigyelt pleurális folyadékgyülem, amelynél a szív keringési pumpa meghibásodása miatt megnövekszik a hidrosztatikus kapilláris nyomás.

A jóindulatú és rosszindulatú okok megkülönböztetése jelenleg olyan diagnosztikai kihívás, amely rendszerint anyaggyűjtést igényel (pleurális folyadékba merített sejtek vagy akár szövettani minta).

A vizsgálat első lépése jelenleg a pleurális folyadék citológiai értékelése, azaz a sejtek megfigyelése, a pleurális folyadék kezdeti mintájából. Ez az eljárás átlagosan 62%-os szenzitivitással jár, míg a második minta thoracentézis révén 10%-kal javítja a diagnózis érzékenységét. Bizonyos esetekben azonban a pleurális folyadék elemzésével nem lehet diagnosztizálni, és általában egy invazívabb diagnosztikai módszer javasolt, például pleurális biopszia ("vak" tűvel történő szúrással, visszhangvezérelt vagy számítógépes tomográfia irányított vagy a pleurális üreg pleuroszkópiával történő közvetlen vizualizálásával nyert).

Ennek a megközelítésnek a diagnosztikus hozama akár a 97%-ot is elérheti (orvosi thoracoscopiával nyert pleurális biopszia esetén). Ez azonban nagyobb morbiditást és nagyobb erőforrás-felhasználást (anyagi és emberi) jelent. A pleurális folyadék érzékenyebb és specifikusabb, ugyanakkor kevésbé invazív diagnosztikai módszerének kidolgozása hozzájárulhat a betegek hatékonyabb szűréséhez, korlátozva az invazívabb módszerek alkalmazását, csak a nagyobb malignus patológia kockázatával rendelkező betegek esetében.

Tanulmányi célok:

Ez a projekt egy preklinikai vizsgálatból áll, amelyben új klinikai értékelési módszereket fogunk feltárni, olyan betegek immunológiai jellemzőinek és mikrokörnyezetének proteomikai elemzésén alapulva, akiknek a diagnózisát nem erősítették meg a pleurális folyadékban. A kapott eredményeket a pleurális folyadék következő csoportokba való besorolására szolgáló algoritmus végrehajtásában fogják felhasználni: a) alacsony kockázatú vagy jóindulatú; b) magas kockázatú vagy rosszindulatú. Ha az algoritmus jó szenzitivitással és specificitással rendelkezik a rosszindulatú diagnózisok tekintetében, hasznos lehet a betegek csoportokba sorolása: a) elhalasztja az invazív vizsgálatot és aktív képalkotó megfigyelést végez; b) folytassa az invazív vizsgálatot.

Előny/kockázatértékelés:

A pleurális folyadék gyűjtése a szokásos ellátásban és a betegség diagnosztizálásában alkalmazott eljárásokkal történik, így nem jelent további kockázatot a résztvevők számára. A vizsgálat eredményei nem hoznak klinikai hatásokat közvetlenül az érintett résztvevőkre. A jövőben azonban a kapott eredmények más felhasználók javára is válhatnak a tumor mikrokörnyezetének jobb megértése révén.

A toborzás módjai:

A vizsgálatban résztvevő a vizsgáló orvossal folytatott interjú során megismeri személyes adatainak a kutatási projekt keretében történő kezelésének feltételeit. Ezenkívül az érintettek tájékozott beleegyezését írják alá a vizsgálatban való részvételhez. Az értesítés tartalmazza a nyomozással kapcsolatos eljárások magyarázatát és a nyomozás során gyűjtött személyes adatok szerepét. A vizsgáló orvossal folytatott interjú során, valamint a vizsgálatban való részvételhez való tájékozott hozzájárulás aláírásával az érintett tudomást szerez a vizsgálattól való visszalépéshez és/vagy a tájékozott hozzájárulásának visszavonásához való jogáról.

A biológiai minták gyűjtése az összehasonlító prospektív kohorsz vizsgálathoz a projektben részt vevő összes együttműködő kórházban két-három éven belül megtörténik. A tüdőfolyadék exoszóma proteomjának korábbi vizsgálatában megfigyelt variancia és statisztikai erő alapján 200 mintát becsültek a biológiai minták osztályozásának minimális számának. A statisztikai teljesítmény elemzése a 10 mintában megfigyelt variancia alapján történik, amelyekben körülbelül 3500 fehérjét azonosítottak és mennyiségileg meghatároztak a tüdőfolyadékokban. A statisztikai teljesítményelemzés több teszt korrekcióját veszi figyelembe az azonosított és számszerűsített fehérjék száma szerint.

Adatgyűjtési előírások:

A konzultáció során klinikai interjút készítenek, amely lehetővé teszi személyes adatok, nevezetesen genetikai adatok, egészséggel, faji vagy etnikai származással kapcsolatos adatok gyűjtését. Objektív vizsgálatot is végeznek a súly, magasság, vérnyomás és pulzusszám felmérésére. A kiegészítő diagnosztikai vizsgálatok eredményeire vonatkozó adatokat gyűjtik, nevezetesen: 1. Mellkasröntgen (a pleurális folyadékgyülem helye, kiterjedése és jellemzői); 2. mellkasi ultrahang (az ökostruktúra elhelyezkedése, kiterjedése, jellemzése - homogén / heterogén; látható szepciókkal / anélkül); 3. Mellkasi komputertomográfia (a mellhártya elhelyezkedése, kiterjedése, morfológiai vonatkozásai - vastagság növekedés, csomók stb.); 4. A pleurális folyadék citológiai értékelése; 5. Szérum biokémiai vizsgálat: vércukorszint; összfehérje és szérumalbumin vizsgálata; laktát-dehidrogenáz szint.

A referencia diagnosztikai módszer a szövet szövettani értékelésén alapul. A projekt során kapott proteomikai elemzés eredményeit nem veszik figyelembe a résztvevők végső diagnózisa során.

A biológiai minták gyűjtésének és végső rendeltetési helyének meghatározása:

A klinikus döntése szerint pleurális folyadékot vesznek a diagnózishoz (thoracentézissel vagy pleurális biopszia vagy pleuroszkópia során). A kapott minta a szokásos klinikai vizsgálati utat (citológiai és/vagy kórszövettani kiértékelés, biokémiai értékelés, mikrobiológiai értékelés) követi, az egyes intézményekben regisztrált módon. Azon betegek számára, akik hozzájárulnak a vizsgálatban való részvételhez, csak egy további pleurális folyadékmintát küldenek az általunk elvégzendő vizsgálathoz. Ezeket az utolsó mintákat a CEDOC tárolja.

Az önkénteseknek átadandó információ szövege:

A vizsgálat, amelyhez hozzájárulását kérjük, egy olyan diagnosztikai módszer kifejlesztésére irányul, amely nagyobb specifikussággal és érzékenységgel azonosítja a pleurális folyadék túlzott felhalmozódásával kapcsolatos különböző patológiákat (ez az állapot pleurális folyadékgyülemként ismert). Jelenleg a pleurális folyadék egy kezdeti mintájának citológiai értékelése, vagyis a sejtek megfigyelése átlagosan 62%-os érzékenységgel rendelkezik, míg a második mintavétel thoracentesis útján (amely a folyadék mellhártyából történő leszívásából áll a mellhártya punkcióján keresztül). mellkasfal) 10%-kal javítja a diagnózis érzékenységét. Bizonyos esetekben nem lehet diagnosztizálni a pleurális folyadék elemzésével, és általában egy invazívabb diagnosztikai módszer javasolt, mint pl. pleurális biopszia vagy pleuroszkópia (sebészeti technika, amely lehetővé teszi a bordaív belső oldalának közvetlen megtekintését) mellhártyával. biopszia (érzékenység 98%). A pleurális folyadék nagyobb specifitását és érzékenységét biztosító diagnosztikai módszer kidolgozása, így elkerülve az invazív módszereket, javíthatja a pleurális folyadékgyülemben szenvedő betegek szűrésének hatékonyságát, korlátozva az invazív vizsgálatot olyan betegek kiválasztott részére, akiknél ténylegesen magasabb a rosszindulatú patológia kockázata. . Az Ön részvétele ebben a vizsgálatban nem foglal magában további eljárásokat azon túlmenően, amelyeket orvosa szükségesnek tart a betegség diagnosztizálásához vagy a kérdéses vizsgálathoz speciális gyógyszerek felírásához. A begyűjtött mintákat kóddal anonimizálják, vagyis a kutatók nem tudják a mintákat az adott betegek személyes adataival egyeztetni. A 2018 májusában hatályba lépett új általános adatvédelmi rendelet (GDPR) (2016/679/EU rendelet) értelmében az összegyűjtött adatok bármelyike ​​bizalmas lesz.

A BETEG TÁJÉKOZTATÁSA:

(Név) _________________________________________________, önként vállalom, hogy részt veszek a "Klinikai vizsgálat a pleurális effúzióban szenvedő betegek diagnosztizálásával összefüggésben" című kutatási projektben.

Kijelentem, hogy jelen tanulmány céljairól, módszertanáról, valamint a részvétel feltételeiről szóbeli és írásbeli tájékoztatást kaptam, amelyet hallottam, elolvastam és megértettem.

Ezt a dokumentumot a vizsgáló orvossal való minden kétség tisztázása és a részvételi javaslat korlátlan időre történő elgondolása után írták alá.

A minták és az adatok titkosítva lesznek a személyazonosságom védelme érdekében. Szabadon megtagadhatom a mintáim adományozását, és a hozzájárulásom megadása után is bármikor visszavonhatom, ha úgy kívánom. Döntésem semmilyen módon nem befolyásolja klinikai követésem minőségét, és nem változtatja meg a ______________________________________________________________________ (kórházi részleg) betegeként való jogaimat sem.

Bármikor kérhetek általános információkat arról a vizsgálatról, amelyhez mintákat használnak. A mintáimban kapott konkrét eredményekről azonban nem kapok tájékoztatást, mivel ezek az adatok nem relevánsak a klinikai követésem szempontjából.

Engedélyezem továbbá a biológiai minták és az összegyűjtött adatok anonim és bizalmas felhasználását a későbbi kutatási projektekben, feltéve, hogy ezeket a megfelelő Etikai Bizottság engedélyezi.

A résztvevő aláírása: ______________________________________________

Dátum: __ / __ / _____

A nyomozó aláírása: ______________________________________________

Dátum: __ / __ / _____

A résztvevők tulajdonjoga és adatvédelme / titoktartás:

A személyes adatok védelmében végrehajtandó biztonsági intézkedések a következők: 1. A személyes adatok álnevesítése és titkosítása; 2. Képes a személyes adatok elérhetőségének és hozzáférésének időben történő helyreállítására incidens esetén; 3. Az adatfeldolgozás biztonságát biztosító technikai és szervezési intézkedések tesztelésének, értékelésének és hatékonyságának rendszeres értékelésének folyamata.