Profilazione immunitaria e microambiente-proteogenomica per la classificazione dei pazienti affetti da cancro del polmone

L'eccessivo accumulo di liquido tra le membrane che circondano il polmone, una condizione clinica comunemente indicata come "versamento pleurico", è causato da uno di questi tre fattori: aumento della produzione di liquido pleurico, ridotta capacità di riassorbimento del liquido pleurico o una combinazione di entrambi.

La base dell'accumulo di versamento pleurico può originare da molteplici patologie: da condizioni benigne ed extrapolmonari a patologie pleuriche intrinseche (infiammatorie o neoplastiche primarie o metastatiche) in cui l'accumulo di liquido nello spazio pleurico è principalmente dovuto a cambiamenti nella struttura del pleurico membrana (perdita di integrità e/o infiltrazione di cellule neoplastiche).

Un esempio di condizioni extrapolmonari è il versamento pleurico osservato in pazienti con scompenso cardiaco congestizio in cui vi è aumento della pressione capillare idrostatica, dovuto a insufficienza della pompa cardiocircolatoria.

La distinzione tra cause benigne e maligne è attualmente una sfida diagnostica che di solito richiede la raccolta di materiale (cellule immerse nel liquido pleurico o anche un campione istologico).

Il primo passo di questa indagine è attualmente la valutazione citologica del liquido pleurico, cioè l'osservazione delle cellule, di un primo prelievo del liquido pleurico. Questa procedura è associata ad una sensibilità media del 62% mentre un secondo prelievo tramite toracentesi migliora la sensibilità della diagnosi del 10%. In alcuni casi, tuttavia, non è possibile diagnosticare mediante l'analisi del liquido pleurico e, di norma, si consiglia una metodica diagnostica più invasiva, come la biopsia pleurica (prelevata mediante puntura con ago "cieco", ecoguidata o computerizzata tomografia guidata o ottenuta mediante visualizzazione diretta del cavo pleurico mediante pleuroscopia).

La resa diagnostica di questo approccio può arrivare fino al 97% (nel caso di biopsia pleurica ottenuta mediante toracoscopia medica). Tuttavia, implica una maggiore morbilità e un maggiore consumo di risorse (materiali e umane). Lo sviluppo di una metodica diagnostica più sensibile e specifica e allo stesso tempo meno invasiva per il liquido pleurico può contribuire a uno screening più efficace dei pazienti, limitando l'uso di metodiche più invasive, solo per i pazienti a più alto rischio di patologia maligna.

Obiettivi dello studio:

Questo progetto consiste in uno studio preclinico in cui esploreremo nuove metodologie per la valutazione clinica, basate sull'analisi proteomica delle caratteristiche immunologiche e del microambiente del tumore nel liquido pleurico di pazienti la cui diagnosi non è stata confermata. I risultati ottenuti saranno utilizzati nell'implementazione di un algoritmo per la classificazione del liquido pleurico nei seguenti gruppi: a) basso rischio o benigno; b) ad alto rischio o maligno. Se l'algoritmo ha una buona sensibilità e specificità per le diagnosi maligne, può essere utile distinguere i pazienti nei gruppi: a) posporre il test invasivo e fare una sorveglianza attiva per immagini; b) procedere a test invasivi.

Valutazione rischi/benefici:

La raccolta del liquido pleurico sarà effettuata con procedure utilizzate nella cura standard e nella diagnosi della malattia, non costituendo quindi rischi aggiuntivi per i partecipanti. I risultati di questa indagine non portano effetti clinici direttamente applicabili ai partecipanti coinvolti. Tuttavia, in futuro i risultati ottenuti potranno beneficiare altri utenti attraverso una migliore comprensione del microambiente tumorale.

Modalità di Assunzione:

Attraverso un colloquio con il medico sperimentatore, il partecipante a questo studio viene a conoscenza dei termini del trattamento dei suoi dati personali nell'ambito del progetto di ricerca. Inoltre, gli interessati firmano il consenso informato per la partecipazione allo studio. La notifica include una spiegazione delle procedure coinvolte nell'indagine e del ruolo dei dati personali raccolti nel contesto dell'indagine. In un colloquio con il medico sperimentatore e firmando il consenso informato per la partecipazione allo studio, l'interessato viene a conoscenza del suo diritto di ritirarsi dallo studio e/o di revocare il proprio consenso informato.

La raccolta di campioni biologici per lo studio comparativo prospettico di coorte sarà effettuata in tutti gli ospedali collaborativi di questo progetto in un periodo da due a tre anni. Sulla base della varianza e del potere statistico osservati in uno studio precedente sul proteoma dell'esosoma del fluido polmonare, 200 campioni sono stati stimati come numero minimo per la classificazione dei campioni biologici. L'analisi del potere statistico si basa sulla varianza osservata in 10 campioni in cui sono state identificate e quantificate circa 3500 proteine ​​nei fluidi polmonari. L'analisi di potenza statistica considera la correzione per test multipli in base al numero di proteine ​​identificate e quantificate.

Specifiche per la raccolta dei dati:

Durante la consultazione verrà condotto un colloquio clinico, che consentirà la raccolta di dati personali, ovvero dati genetici, dati relativi alla salute e all'origine razziale o etnica. Verrà inoltre effettuato un esame obiettivo per valutare peso, altezza, pressione arteriosa e battito cardiaco. Verranno raccolti i dati relativi agli esiti di esami diagnostici complementari, ovvero: 1. Radiografia del torace (sede, estensione e caratteristiche del versamento pleurico); 2. ecografia toracica (localizzazione, estensione, caratterizzazione dell'ecostruttura - omogenea/eterogenea; con/senza setti visibili); 3. Tomografia computerizzata toracica (sede, estensione, aspetto morfologico della pleura - aumento di spessore, noduli, ecc.); 4. Valutazione citologica del liquido pleurico; 5. Studio biochimico del siero: livello di glucosio nel sangue; dosaggio delle proteine ​​totali e dell'albumina sierica; livello di lattato deidrogenasi.

Il metodo diagnostico di riferimento sarà basato sulla valutazione istologica del tessuto. I risultati dell'analisi proteomica ottenuti in questo progetto non saranno presi in considerazione per la diagnosi finale dei partecipanti.

Specifica della raccolta e della destinazione finale dei campioni biologici:

Secondo la decisione del medico, il liquido pleurico verrà prelevato per la diagnosi (tramite toracentesi o durante il corso della biopsia pleurica o della pleuroscopia). Il campione ottenuto seguirà il consueto percorso di indagine clinica (valutazione citologica e/o istopatologica, valutazione biochimica, valutazione microbiologica) come registrato in ogni istituzione. Per i pazienti che acconsentiranno a partecipare allo studio, verrà inviato solo un ulteriore campione di liquido pleurico per lo studio che ci proponiamo di effettuare. Questi ultimi campioni saranno conservati presso il CEDOC.

Testo delle informazioni da fornire ai volontari:

Lo studio per il quale chiediamo il suo consenso mira a sviluppare una metodica diagnostica con maggiore specificità e sensibilità nell'individuare diverse patologie associate ad un eccessivo accumulo di liquido pleurico (condizione comunemente nota come versamento pleurico). Attualmente la valutazione citologica, cioè l'osservazione delle cellule, di un primo prelievo di liquido pleurico ha una sensibilità media del 62% mentre un secondo prelievo tramite toracentesi (consiste nell'aspirazione del liquido dalla pleura attraverso la puntura del parete toracica) migliora la sensibilità della diagnosi del 10%. In alcuni casi non è possibile diagnosticare analizzando il liquido pleurico e di norma si consiglia una metodica diagnostica più invasiva, come la biopsia pleurica o la pleuroscopia (tecnica chirurgica che consente di visualizzare direttamente l'interno della gabbia toracica) con biopsia (sensibilità 98%). Lo sviluppo di una metodica diagnostica con maggiore specificità e sensibilità del liquido pleurico, evitando così metodiche invasive, può migliorare l'efficienza nello screening dei pazienti con versamento pleurico, limitando lo studio invasivo ad una porzione selezionata di pazienti con un rischio effettivamente più elevato di patologia maligna . La Sua partecipazione a questo studio non comporta ulteriori procedure oltre a quelle che il Suo medico ritiene necessarie per la diagnosi della malattia o la prescrizione di farmaci specifici per lo studio in questione. I campioni raccolti saranno anonimizzati con un codice, cioè non sarà possibile per i ricercatori abbinare i campioni con i dati anagrafici dei rispettivi pazienti. Tutti i dati raccolti saranno riservati, in conformità con il nuovo Regolamento generale sulla protezione dei dati (GDPR) entrato in vigore lo scorso maggio 2018 (Regolamento (UE) n. 2016/679).

CONSENSO INFORMATO DEL PAZIENTE:

(NOME) _____________________________________________________, acconsento volontariamente a partecipare al progetto di ricerca dal titolo "Studio clinico nell'ambito della diagnosi del paziente con versamento pleurico".

Dichiaro di essere stato informato sugli obiettivi e sulla metodologia di questo studio, nonché sulle condizioni di partecipazione, avendo ricevuto informazioni orali e scritte, che ho ascoltato, letto e compreso.

Questo documento è stato firmato dopo che tutti i dubbi sono stati chiariti con il medico inquirente e dopo aver riflettuto su questa proposta di partecipazione a tempo illimitato.

I campioni e i dati saranno crittografati, per proteggere la mia identità. Sono libero di rifiutare di donare i miei campioni e, anche dopo aver dato il mio consenso, potrò ritirarlo in qualsiasi momento se lo desidero. La mia decisione non influirà in alcun modo sulla qualità del mio follow-up clinico né modificherà i miei diritti come paziente del ________________________________________________________ (unità ospedaliera).

In qualsiasi momento, posso richiedere informazioni generiche sullo studio per il quale vengono utilizzati i campioni. Tuttavia, non sarò informato dei risultati concreti ottenuti nei miei campioni, poiché questi dati non sono rilevanti per il mio follow-up clinico.

Autorizzo altresì l'utilizzo dei campioni biologici e dei dati raccolti, in forma anonima e riservata, in successivi progetti di ricerca, purché autorizzati dall'apposito Comitato Etico.

Firma del Partecipante: ______________________________________

Data: __ / __ / _____

Firma dello sperimentatore: ______________________________________

Data: __ / __ / _____

Proprietà e protezione dei dati dei partecipanti / riservatezza:

Le misure di sicurezza nella protezione dei dati personali che saranno implementate includono 1. Pseudonimizzazione e crittografia dei dati personali; 2. Capacità di ripristinare tempestivamente la disponibilità e l'accesso ai dati personali in caso di incidente; 3. Processo per testare, valutare e valutare regolarmente l'efficacia delle misure tecniche e organizzative per garantire la sicurezza del trattamento dei dati.