Immun- und Mikroumgebungs-Proteogenomik-Profilierung zur Klassifizierung von Lungenkrebspatienten

Die übermäßige Ansammlung von Flüssigkeit zwischen den die Lunge umgebenden Membranen, ein klinischer Zustand, der gemeinhin als „Pleuraerguss“ bezeichnet wird, wird durch einen von drei Faktoren verursacht: erhöhte Produktion von Pleuraflüssigkeit, verminderte Fähigkeit zur Rückresorption von Pleuraflüssigkeit oder eine Mischung aus beidem.

Die Grundlage für die Ansammlung von Pleuraergüssen können mehrere Pathologien sein: von gutartigen und extrapulmonalen Erkrankungen bis hin zu intrinsischen Pleurapathologien (entzündliche oder neoplastische Primär- oder Metastasen), bei denen die Ansammlung von Flüssigkeit im Pleuraraum hauptsächlich auf Veränderungen in der Pleurastruktur zurückzuführen ist Membran (Verlust der Integrität und/oder Infiltration durch neoplastische Zellen).

Ein Beispiel für extrapulmonale Erkrankungen ist der Pleuraerguss, der bei Patienten mit kongestiver Herzinsuffizienz beobachtet wird, bei denen es aufgrund des Versagens der Herz-Kreislaufpumpe zu einem Anstieg des hydrostatischen Kapillardrucks kommt.

Die Unterscheidung zwischen gutartigen und bösartigen Ursachen stellt derzeit eine diagnostische Herausforderung dar, die in der Regel die Sammlung von Material (in die Pleuraflüssigkeit eingetauchte Zellen oder sogar eine histologische Probe) erfordert.

Der erste Schritt dieser Untersuchung ist derzeit die zytologische Auswertung der Pleuraflüssigkeit, also die Beobachtung von Zellen, einer ersten Probe der Pleuraflüssigkeit. Dieses Verfahren ist mit einer durchschnittlichen Sensitivität von 62 % verbunden, während eine zweite Probe durch Thorakozentese die Sensitivität der Diagnose um 10 % verbessert. In bestimmten Fällen ist eine Diagnose durch Analyse der Pleuraflüssigkeit jedoch nicht möglich und in der Regel wird eine invasivere Diagnosemethode empfohlen, beispielsweise eine Pleurabiopsie (Entnahme durch Punktion mit einer „blinden“ Nadel, echogesteuert oder computergesteuert). (Tomographie geführt oder mittels direkter Visualisierung der Pleurahöhle durch Pleuroskopie erhalten).

Die diagnostische Ausbeute dieses Ansatzes kann bis zu 97 % erreichen (im Falle einer Pleurabiopsie durch medizinische Thorakoskopie). Dies bedeutet jedoch eine höhere Morbidität und einen höheren Ressourcenverbrauch (materiell und menschlich). Die Entwicklung einer empfindlicheren und spezifischeren und gleichzeitig weniger invasiven Diagnosemethode für Pleuraflüssigkeit kann zu einem effektiveren Screening von Patienten beitragen und den Einsatz invasiverer Methoden auf Patienten mit einem höheren Risiko für bösartige Erkrankungen beschränken.

Lernziele:

Dieses Projekt besteht aus einer präklinischen Studie, in der wir neue Methoden zur klinischen Bewertung erforschen werden, die auf einer proteomischen Analyse der immunologischen Eigenschaften und der Mikroumgebung des Tumors in der Pleuraflüssigkeit von Patienten basieren, deren Diagnose nicht bestätigt wurde. Die gewonnenen Ergebnisse werden bei der Implementierung eines Algorithmus zur Klassifizierung der Pleuraflüssigkeit in die folgenden Gruppen verwendet: a) geringes Risiko oder gutartig; b) hohes Risiko oder bösartig. Wenn der Algorithmus eine gute Sensitivität und Spezifität für bösartige Diagnosen aufweist, kann es nützlich sein, Patienten in folgende Gruppen zu unterteilen: a) den invasiven Test verschieben und eine aktive bildgebende Überwachung durchführen; b) Fahren Sie mit invasiven Tests fort.

Nutzen-/Risikobewertung:

Die Entnahme der Pleuraflüssigkeit erfolgt nach Verfahren, die in der Standardversorgung und Diagnose der Krankheit eingesetzt werden, und stellt daher keine zusätzlichen Risiken für die Teilnehmer dar. Die Ergebnisse dieser Untersuchung bringen keine klinischen Auswirkungen mit sich, die direkt auf die beteiligten Teilnehmer anwendbar sind. In Zukunft könnten die erzielten Ergebnisse jedoch anderen Anwendern durch ein besseres Verständnis der Tumormikroumgebung zugute kommen.

Modalitäten der Rekrutierung:

Durch ein Gespräch mit dem untersuchenden Arzt wird der Studienteilnehmer über die Modalitäten der Verarbeitung seiner personenbezogenen Daten im Rahmen des Forschungsvorhabens informiert. Darüber hinaus unterzeichnen die betroffenen Personen eine Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Studie. Die Meldung enthält eine Erläuterung der an der Untersuchung beteiligten Verfahren und der Rolle der im Rahmen der Untersuchung erhobenen personenbezogenen Daten. Im Gespräch mit dem untersuchenden Arzt und durch die Unterzeichnung der Einwilligungserklärung zur Teilnahme an der Studie wird der Betroffene auf sein Recht aufmerksam gemacht, von der Studie zurückzutreten und/oder seine Einwilligungserklärung zu widerrufen.

Die Sammlung biologischer Proben für die vergleichende prospektive Kohortenstudie wird in allen Kooperationskrankenhäusern dieses Projekts in einem Zeitraum von zwei bis drei Jahren durchgeführt. Basierend auf der Varianz und statistischen Aussagekraft, die in einer früheren Studie des Lungenflüssigkeits-Exosomen-Proteoms beobachtet wurde, wurden 200 Proben als Mindestanzahl für die Klassifizierung biologischer Proben geschätzt. Die Analyse der statistischen Aussagekraft basiert auf der Varianz, die in 10 Proben beobachtet wurde, in denen etwa 3500 Proteine ​​in Lungenflüssigkeiten identifiziert und quantifiziert wurden. Die statistische Leistungsanalyse berücksichtigt die Korrektur für mehrere Tests entsprechend der Anzahl der identifizierten und quantifizierten Proteine.

Spezifikationen zur Datenerfassung:

Während der Konsultation wird ein klinisches Interview durchgeführt, das die Erhebung personenbezogener Daten, insbesondere genetischer Daten, Daten zur Gesundheit sowie zur Rasse oder ethnischen Herkunft, ermöglicht. Außerdem wird eine objektive Untersuchung zur Beurteilung von Gewicht, Größe, Blutdruck und Herzfrequenz durchgeführt. Es werden Daten zu den Ergebnissen ergänzender diagnostischer Tests erhoben, nämlich: 1. Röntgenaufnahme des Brustkorbs (Lage, Ausmaß und Merkmale des Pleuraergusses); 2. Brustultraschall (Lage, Ausmaß, Charakterisierung der Ökostruktur – homogen/heterogen; mit/ohne sichtbare Septierungen); 3. Thorax-Computertomographie (Lage, Ausdehnung, morphologischer Aspekt der Pleura – Dickenzunahme, Knötchen usw.); 4. Zytologische Untersuchung der Pleuraflüssigkeit; 5. Biochemische Untersuchung des Serums: Blutzuckerspiegel; Bestimmung von Gesamtproteinen und Serumalbumin; Laktatdehydrogenase-Spiegel.

Die Referenzdiagnosemethode basiert auf der histologischen Untersuchung des Gewebes. Die in diesem Projekt gewonnenen Ergebnisse der Proteomikanalyse werden für die endgültige Diagnose der Teilnehmer nicht berücksichtigt.

Spezifikation der Sammlung und des endgültigen Bestimmungsorts biologischer Proben:

Je nach Entscheidung des Arztes wird Pleuraflüssigkeit zur Diagnose entnommen (durch Thorakozentese oder im Rahmen einer Pleurabiopsie oder Pleuroskopie). Die entnommene Probe wird dem üblichen klinischen Untersuchungsweg (zytologische und/oder histopathologische Bewertung, biochemische Bewertung, mikrobiologische Bewertung) folgen, wie in jeder Einrichtung registriert. Für Patienten, die der Teilnahme an der Studie zustimmen, wird nur eine zusätzliche Probe der Pleuraflüssigkeit für die von uns vorgeschlagene Studie eingesandt. Diese letzten Proben werden im CEDOC gelagert.

Informationstext für Freiwillige:

Ziel der Studie, für die wir Sie um Ihre Zustimmung bitten, ist die Entwicklung einer diagnostischen Methode mit größerer Spezifität und Sensitivität bei der Identifizierung verschiedener Pathologien, die mit einer übermäßigen Ansammlung von Pleuraflüssigkeit (ein Zustand, der allgemein als Pleuraerguss bezeichnet wird) verbunden sind. Derzeit weist die zytologische Auswertung, d Brustwand) verbessert die Sensitivität der Diagnose um 10 %. In bestimmten Fällen ist eine Diagnose durch Analyse der Pleuraflüssigkeit nicht möglich und in der Regel wird eine invasivere Diagnosemethode empfohlen, wie z. B. eine Pleurabiopsie oder eine Pleuroskopie (chirurgische Technik, die einen direkten Blick auf das Innere des Brustkorbs ermöglicht) bei Pleura Biopsie (Sensitivität 98 %). Die Entwicklung einer diagnostischen Methode mit größerer Spezifität und Empfindlichkeit der Pleuraflüssigkeit und damit die Vermeidung invasiver Methoden kann die Effizienz beim Screening von Patienten mit Pleuraerguss verbessern und die invasive Untersuchung auf einen ausgewählten Teil der Patienten mit einem tatsächlich höheren Risiko einer malignen Pathologie beschränken . Ihre Teilnahme an dieser Studie erfordert keine zusätzlichen Verfahren, die über die hinausgehen, die Ihr Arzt für die Diagnose der Krankheit oder die Verschreibung spezifischer Medikamente für die betreffende Studie als notwendig erachtet. Die gesammelten Proben werden mit einem Code anonymisiert, das heißt, es ist für die Forscher nicht möglich, die Proben den persönlichen Daten der jeweiligen Patienten zuzuordnen. Alle erfassten Daten werden gemäß der neuen Allgemeinen Datenschutzverordnung (DSGVO), die im Mai 2018 in Kraft getreten ist (Verordnung (EU) Nr. 2016/679), vertraulich behandelt.

INFORMIERTE ZUSTIMMUNG DES PATIENTEN:

(NAME) _____________________________________________________, ich erkläre mich freiwillig mit der Teilnahme am Forschungsprojekt „Klinische Studie im Kontext der Diagnostik von Patienten mit Pleuraerguss“ einverstanden.

Ich erkläre, dass ich über die Ziele und die Methodik dieser Studie sowie über die Teilnahmebedingungen informiert bin und mündliche und schriftliche Informationen erhalten habe, die ich gehört, gelesen und verstanden habe.

Dieses Dokument wurde unterzeichnet, nachdem alle Zweifel mit dem untersuchenden Arzt geklärt waren und über diesen Vorschlag zur zeitlich unbegrenzten Teilnahme nachgedacht wurde.

Die Proben und Daten werden verschlüsselt, um meine Identität zu schützen. Es steht mir frei, die Spende meiner Proben abzulehnen, und auch nach meiner Einwilligung kann ich diese jederzeit widerrufen, wenn ich dies wünsche. Meine Entscheidung hat keinerlei Auswirkungen auf die Qualität meiner klinischen Nachsorge und ändert auch nicht meine Rechte als Patient der ________________________________________________________ (Krankenhauseinheit).

Ich kann jederzeit allgemeine Informationen über die Studie anfordern, für die Proben verwendet werden. Über die konkreten Ergebnisse meiner Proben werde ich jedoch nicht informiert, da diese Daten für meine klinische Nachsorge nicht relevant sind.

Ich genehmige auch die anonyme und vertrauliche Verwendung der gesammelten biologischen Proben und Daten in nachfolgenden Forschungsprojekten, sofern sie von der zuständigen Ethikkommission genehmigt wurden.

Unterschrift des Teilnehmers: ______________________________________

Datum: __ / __ / _____

Unterschrift des Ermittlers: ______________________________________

Datum: __ / __ / _____

Eigentum und Datenschutz der Teilnehmer/Vertraulichkeit:

Zu den Sicherheitsmaßnahmen zum Schutz personenbezogener Daten, die umgesetzt werden, gehören: 1. Pseudonymisierung und Verschlüsselung personenbezogener Daten; 2. Fähigkeit, im Falle eines Vorfalls die Verfügbarkeit und den Zugriff auf personenbezogene Daten zeitnah wiederherzustellen; 3. Verfahren zur Prüfung, Beurteilung und regelmäßigen Bewertung der Wirksamkeit technischer und organisatorischer Maßnahmen zur Gewährleistung der Sicherheit der Datenverarbeitung.